目的探討1-磷酸神經(jīng)鞘氨醇（sphingosine 1-phosphate,S1P）對聯(lián)合培養(yǎng)的大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞及新生大鼠心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧所致細(xì)胞損傷的影響。方法體外分離與培養(yǎng)新生大鼠心肌細(xì)胞,并與大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞共同培養(yǎng),構(gòu)建缺氧/復(fù)氧損傷模型,于復(fù)氧期開始給予S1P干預(yù)。利用2,4二硝基苯肼顯色法檢測乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase,LDH）活性,硫代巴比妥酸顯色法檢測丙二醛（maleic dialdehyde,MDA）含量,原位末端標(biāo)記法（TUNEL）檢測細(xì)胞凋亡,并比較各組間差異,從而觀察S1P對共同培養(yǎng)新生大鼠心肌細(xì)胞和大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)細(xì)胞損傷的影響。結(jié)果①新生大鼠心肌細(xì)胞在培養(yǎng)24h后開始貼壁生長,培養(yǎng)6d內(nèi)細(xì)胞數(shù)量未見明顯變化,培養(yǎng)2d后倒置顯微鏡下見散在的具有搏動能力的心肌細(xì)胞,第3天可見散在的心肌細(xì)胞相互間連接成合胞且可見細(xì)胞搏動,4⁵d呈同一節(jié)律的搏動。②100、500、1 000nmol/L S1P均可減少共培養(yǎng)心肌細(xì)胞和骨骼肌成肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷后LDH活性和MDA含量,即可減輕復(fù)氧所誘導(dǎo)的細(xì)胞... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2013,42(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 成肌細(xì)胞的分離與培養(yǎng)
        1.2.2 心肌細(xì)胞的分離與培養(yǎng)
        1.2.3 缺氧/復(fù)氧模型建立
        1.2.4 LDH活性及MDA含量檢測
        1.2.5 原位末端標(biāo)記法(TUNEL)定量檢測凋亡細(xì)胞
        1.2.6 新生大鼠心肌細(xì)胞與大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞共同培養(yǎng)并實施缺氧/復(fù)氧
    1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定
    2.2 新生大鼠心肌細(xì)胞原代培養(yǎng)
    2.3 缺氧導(dǎo)致共同培養(yǎng)細(xì)胞中LDH、MDA輕度增高
    2.4 復(fù)氧導(dǎo)致共同培養(yǎng)細(xì)胞中LDH、MDA進(jìn)一步增高
    2.5 S1P減少共同培養(yǎng)細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷后LDH活性和MDA含量
    2.6 S1P減少共同培養(yǎng)細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷后的細(xì)胞凋亡
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)過氧化氫誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡[J]. 孔曼,陳娟,周潔,朱文德,萬麗敏,熊宇芳,李子希.  華中科技大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2012(03)
[2]S1P對心肌細(xì)胞的保護(hù)作用研究[J]. 袁磊,張文杰,張舵舵,趙春燕.  中國應(yīng)用生理學(xué)雜志. 2011(03)



本文編號：3632600