炎癥性腸病（IBD）作為一種反復(fù)發(fā)作的慢性炎癥,是結(jié)直腸癌發(fā)生的重要高危因素之一。炎癌轉(zhuǎn)化是一個(gè)涉及到許多通路、分子的復(fù)雜過(guò)程,目前確切的機(jī)制研究不多。本研究首先建立了結(jié)腸炎相關(guān)結(jié)腸癌的小鼠模型,獲得了炎癌轉(zhuǎn)化小鼠模型的基因表達(dá)譜數(shù)據(jù),并對(duì)其進(jìn)行了分析和挖掘;此外,用生物信息學(xué)的方法探討了可能參與結(jié)腸炎癌轉(zhuǎn)化的腸道干細(xì)胞及其微環(huán)境相關(guān)基因；最后,重點(diǎn)探討了LEF1/TCFs家族成員在結(jié)腸炎相關(guān)的結(jié)腸癌發(fā)生中的不同作用及其可能的機(jī)制。（第一部分）AOM-DSS小鼠模型是目前研究結(jié)腸炎相關(guān)結(jié)腸癌的一個(gè)重要模型,但是對(duì)此模型的分子機(jī)制研究不多。我們通過(guò)建立小鼠模型,進(jìn)行了全基因組表達(dá)譜芯片實(shí)驗(yàn)。通過(guò)對(duì)不同組的表達(dá)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行比較分析,包括腫瘤組織VS正常組織（AD3_VS_Con）、腫瘤組織VS瘤旁組織（AD3_VS_AD3N）、炎癌轉(zhuǎn)化晚期VS早期（AD3_VS_AD2）、腺癌VS腺瘤（AD4_VS_AD3）,我們發(fā)現(xiàn)在小鼠結(jié)腸炎癌轉(zhuǎn)... 

【文章來(lái)源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市211工程院校985工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：223 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１．?ＡＯＭ－ＤＳＳ小鼠模型的建立??

６．小鼠結(jié)腸全基因組表達(dá)譜巧片實(shí)驗(yàn)??使用的試劑盆為?Ｗｈｏｌｅ?Ｍｏｕｓｅ?Ｇｅｎｏｍｅ?Ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ?Ｋｉｔ，?４?Ｘ４４Ｋ?（Ａｇｉｌｅｎｔ，??Ｇ４１２２Ｆ）。??（１）取?ＲＮＡｌＯＯｎｇ，使其體積為?２．５ｕｌ，與?２ｕｌｓｐｉｋ：ｅ３?和?０．８ｕｌＴ７ｐｒｉｍｅｒ＇混合，總體??積為５．３ｕｌ，?６５。仁水�。欤希恚椋睿糜诒喜簧儆冢担恚椋�；??（２）每管中分別加入?２ｕｌ?５ＸＦＳ?ｂｕ帶ｒ，ｌｕｌ?０．１Ｍ?的?ＤＴＴ，０．５ｕｌ?ｄＮＴＰｓ?和?１．２ｕｌ??Ａ街ｓｃｒｉｐｔ，共４．７ｕｌ，使管中總、體積為ｌＯｕｌ，?４０°Ｃ水洛２ｈｒ，?７０°Ｃ水裕１５ｍｉｎ；??（３）避光標(biāo)記，分別加入民Ｎａｓｅ－ｆｒｅｅｗａｔｅｒ０．：７５ｕｌ，５ＸＴＢ３？２ｕｌ，ＤＴＴ０．６ｕＩ，ＮＴＰｓ??ｌｕｌ，?Ｔ７ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ?０．２１?ｕｌ?和?Ｃｙ３?０．２４ｕｌ，共?６ｕｌ，４°Ｃ水洛?２ｈｒ，置于冰上不少于?５ｍｉｎ；??（４）分別加入ＲＮａｓｅ－斤ｅｅ?ｗａｔｅｒ?８４ｕｌ，?ＲＬＴ３５０ｕｌ，無(wú)水乙醇２５０ｕｌ，使終體積為７００ｕｌ，??上柱，４Ｔ：離也，１３０００ｒｐｍＸ３０ｓｅｃ；丟棄收集管，將柱子置于新的收集管中，加入??ＲＰＥ５００Ｕ１，４１：離也，１３０００ｒｐｍＸｌｍｉｎ；棄濾液，４Ｘ：空轉(zhuǎn)，１３０００ｒｐｍＸ３０ｓｅｃ；棄??收集管，將柱子置于１．５ｍｌＥｐ管中，加入３０ｕｌ?ＲＮａｓｅ－ｆｒｅｅ?ｗａｔｅｒ，?４°Ｃ離必，１３０００ｒｐｍ??Ｘ３０？６０ｓｅｃ，收集ｃＲＮＡ，定量；??（５）�。保叮担酰纾悖遥危粒尤胂鄳�(yīng)體積的ＲＮａｓｅ－ｆｔｅｅ?ｗａｔｅｒ，使體積為４１．８ｕｌ；分別

中均未見(jiàn)明思異常（表１－１）。ＨＥ染色的病理診斷巧果顯示，小鼠結(jié)腸從ＡＤ１期的??急性炎痛恢復(fù)期發(fā)展為ＡＤ２期的輕度不典型增生巧，再發(fā)展到ＡＤ３的中、重度不??典型增生或腺瘤階段（圖１－３）。這一系列序貫的改變，與人類結(jié)腸炎相關(guān)結(jié)腸癌發(fā)??生的生理病理過(guò)程類似。因此，ＡＯＭ－ＤＳＳ模型能有效模巧人的結(jié)版炎相關(guān)結(jié)腸癌??的發(fā)病過(guò)程。???表１－１．?ＡＯＭ－ＤＳＳ模型中各組小鼠的造模結(jié)果分析???組別?數(shù)目?死ｆ：率（％）?成煙率（％）?病理診斷??．??Ｃｏｎ?（ＮａｉＶｅ）組?８?０?０?正常??ＡＯＭｏｎｌｙ?組?５?０?０?正常??ＤＳＳｏｎｌｙ組?８?１２．５（１巧）?０?慢性炎癥??ＡＤ３組?２０?１５。。０）?９４．１２?（腦７）?中、重度不典型増生或腺瘤??Ｈｍ￣??職哪■??圖１－３．各組ＨＥ染色結(jié)果??２１??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Pathogenesis of Crohn’s disease: Bug or no bug[J]. Marta Maia Bosca-Watts,Joan Tosca,Rosario Anton,Maria Mora,Miguel Minguez,Francisco Mora.  World Journal of Gastrointestinal Pathophysiology. 2015(01)
[2]MicroRNAs as novel predictive biomarkers and therapeutic targets in colorectal cancer[J]. Verena Stiegelbauer,Samantha Perakis,Alexander Deutsch,Hui Ling,Armin Gerger,Martin Pichler.  World Journal of Gastroenterology. 2014(33)
[3]Role of microRNAs in the immune system,inflammation and cancer[J]. Jennifer Raisch,Arlette Darfeuille-Michaud,Hang Thi Thu Nguyen.  World Journal of Gastroenterology. 2013(20)



本文編號(hào)：3620777