本文關(guān)鍵詞：久瀉靈顆粒對(duì)脾腎陽(yáng)虛型潰瘍性結(jié)腸炎模型大鼠TLR4、NF-κB p65及炎性細(xì)胞因子表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的闡明久瀉靈顆粒對(duì)脾腎陽(yáng)虛型UC模型大鼠結(jié)腸組織病理形態(tài)變化的影響以及對(duì)IL-1、IL-6、TNF-α、IFN-γ炎癥因子和TLR4、NF-κB p65蛋白基因表達(dá)的影響,初步闡釋以溫補(bǔ)脾腎法為指導(dǎo)的中藥制劑久瀉靈顆粒治療UC的作用機(jī)理和科學(xué)內(nèi)涵,為臨床治療UC用藥的探討提供有效的理論依據(jù)。方法1將60只SPF級(jí)Wistar大鼠隨機(jī)分為空白組和模型組,采用灌服大黃水煎液加肌肉注射氫化可的松的方法建立中醫(yī)證型“脾腎陽(yáng)虛”模型,同時(shí)結(jié)合TNBS(2,4,6-三硝基苯磺酸)加50%乙醇混合灌腸法建立西醫(yī)病“UC”模型。造模成功后將模型組隨機(jī)分為脾腎陽(yáng)虛型UC模型7天、14天、21天組,取材后進(jìn)行結(jié)腸組織病理切片制備,采用ELISA法檢測(cè)FT3、FT4、T的含量。2將90只SPF級(jí)Wistar大鼠隨機(jī)分為空白組和模型組,造模方法和實(shí)驗(yàn)一相同。造模成功后將模型組隨機(jī)分為脾腎陽(yáng)虛型UC模型組、久瀉靈顆粒治療7天、14天、21天組和陽(yáng)性對(duì)照組(SASP組)。久瀉靈顆粒治療組按各組要求分別給藥7天、14天、21天,陽(yáng)性對(duì)照組給予柳氮磺胺吡啶治療。取材后選用病理學(xué)方法(肉眼觀察和HE染色鏡下觀察)來(lái)觀察各組大鼠結(jié)腸組織病理形態(tài)變化、ELISA法檢測(cè)大鼠血清及組織中IL-1、IL-6、TNF-α、IFN-γ的含量、免疫組化法檢測(cè)大鼠結(jié)腸組織中TLR4、NF-κB p65蛋白表達(dá)、RT-q PCR法檢測(cè)大鼠結(jié)腸組織中TLR4、NF-κB p65基因的表達(dá)。結(jié)果1 ELISA法檢測(cè)大鼠血清中FT3、FT4、T的含量:與空白組比較,模型7天、14天、21天組中FT3、FT4、T的含量均有所降低,其中模型21天組差異顯著(P0.01)。2 ELISA法檢測(cè)大鼠血清及組織中IL-1、IL-6、TNF-α、IFN-γ的含量:與空白組比較,UC模型組中IL-1、IL-6、TNF-α、IFN-γ的含量均有所升高,具有顯著性差異(P0.01);與模型組比較,久瀉靈顆粒治療7天、14天、21天組及陽(yáng)性對(duì)照組中各炎癥因子的含量均有所降低(P0.01或P0.05),且以中藥治療21天組差異最為顯著(P0.01)。3 RT-q PCR法檢測(cè)大鼠結(jié)腸組織中TLR4、NF-κB p65 m RNA表達(dá):與模型組比較,空白組結(jié)腸組織中TLR4、NF-κB p65 m RNA表達(dá)量明顯低于模型組(P0.01),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;久瀉靈顆粒治療7天、14天、21天組結(jié)腸組織中TLR4、NF-κB p65 m RNA表達(dá)量均有所降低(P0.01或P0.05)。4免疫組化法檢測(cè)大鼠結(jié)腸組織中TLR4、NF-κB p65蛋白表達(dá):TLR4表達(dá):(1)鏡下觀察可見(jiàn):模型組大鼠腸粘膜上皮和固有層單個(gè)核細(xì)胞都有TLR4陽(yáng)性表達(dá),表達(dá)強(qiáng)度高于空白組,并且越接近腸腔表達(dá)越強(qiáng)。其余各治療組大鼠TLR4呈弱度或中等強(qiáng)度表達(dá)。(2)TLR4陽(yáng)性細(xì)胞灰度值結(jié)果為:與空白組比較,模型組大鼠結(jié)腸組織中TLR4表達(dá)顯著增強(qiáng)(P0.01),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與模型組比較,治療后其他各組TLR4表達(dá)均有所減弱(P0.01或P0.05)。NF-κB p65表達(dá):(1)鏡下觀察可見(jiàn):模型組中NF-κB p65陽(yáng)性表達(dá)為單核-巨噬細(xì)胞,呈現(xiàn)胞漿陽(yáng)性,大鼠結(jié)腸粘膜上皮和固有層單個(gè)核細(xì)胞中都可以見(jiàn)到,表達(dá)強(qiáng)度明顯高于空白組。其余各治療組大鼠NF-κB p65陽(yáng)性細(xì)胞呈弱度或中等強(qiáng)度表達(dá)。(2)NF-κB p65陽(yáng)性細(xì)胞灰度值結(jié)果為:與空白組比較,模型組NF-κB p65表達(dá)顯著增強(qiáng)(P0.01),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與模型組比較,治療后各組NF-κB p65表達(dá)顯著減弱(P0.01或P0.05)。結(jié)論1脾腎陽(yáng)虛是UC反復(fù)發(fā)病,病情遷延難愈的關(guān)鍵病機(jī),以溫補(bǔ)脾腎法為指導(dǎo)的久瀉靈顆粒治療UC療效顯著,為臨床用藥提供了有效依據(jù)。2久瀉靈顆粒可以明顯降低脾腎陽(yáng)虛型UC模型大鼠血清及結(jié)腸組織中IL-1、IL-6、TNF-α、IFN-γ炎癥因子的含量,進(jìn)而抑制炎性細(xì)胞浸潤(rùn),減少炎癥活性產(chǎn)物的釋放,減輕機(jī)體腸粘膜的炎癥反應(yīng)和組織損傷程度,促進(jìn)腸粘膜修復(fù)。3久瀉靈顆�？梢悦黠@降低脾腎陽(yáng)虛型UC模型大鼠中TLR4、NF-κB p65基因的轉(zhuǎn)錄和蛋白的表達(dá),減輕粘膜炎癥反應(yīng),促進(jìn)腸粘膜修復(fù)。
【關(guān)鍵詞】：潰瘍性結(jié)腸炎 IL-1 IL-6 TNF-α IFN-γ TLR4 NF-κB p65 久瀉靈顆粒
【學(xué)位授予單位】：甘肅中醫(yī)藥大學(xué)(原名：甘肅中醫(yī)學(xué)院)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R285.5;R-332
【目錄】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 英文縮略詞表10-11
• 前言11-13
• 立題依據(jù)13-14
• 第一部分 理論研究14-22
• 1 中醫(yī)學(xué)關(guān)于UC的研究14-18
• 1.1 病名范疇14
• 1.2 病因病機(jī)14-16
• 1.3 辨證論治16-17
• 1.4 中醫(yī)治療17-18
• 2 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)關(guān)于UC的研究18-22
• 2.1 流行病學(xué)研究18-19
• 2.2 病因及發(fā)病機(jī)理19-20
• 2.3 西醫(yī)治療20-22
• 第二部分 實(shí)驗(yàn)研究22-51
• 1 實(shí)驗(yàn)一22-27
• 1.1 技術(shù)路線(xiàn)圖22-23
• 1.2 實(shí)驗(yàn)材料23
• 1.3 實(shí)驗(yàn)方法23-25
• 1.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果25-27
• 2 實(shí)驗(yàn)二27-44
• 2.1 技術(shù)路線(xiàn)圖27-28
• 2.2 實(shí)驗(yàn)材料28-29
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法29-34
• 2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果34-44
• 3 討論44-51
• 3.1 模型制備方法的選擇44
• 3.2 脾腎陽(yáng)虛型UC模型評(píng)估44-45
• 3.3 久瀉靈顆粒組方分析45
• 3.4 大鼠結(jié)腸組織病理切片結(jié)果分析45-46
• 3.5 炎癥因子與 UC（IL-1、IL-6、TNF-α、IFN-γ）46-48
• 3.6 TLR4、NF-κB p65 與UC48-51
• 結(jié)論51-52
• 參考 文獻(xiàn)52-59
• 附錄59-64
• 附錄1 實(shí)驗(yàn)一大鼠病變結(jié)腸組織病理切片59-60
• 附錄2 實(shí)驗(yàn)二大鼠病變結(jié)腸組織病理切片60-61
• 附錄3 大鼠病變結(jié)腸組織免疫組化切片61-63
• 附錄4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證和設(shè)施使用許可證63-64
• 致謝64-65
• 攻讀碩士研究生階段發(fā)表的論文65

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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本文編號(hào)：360155