本文關(guān)鍵詞：Drosha在早孕期小鼠子宮內(nèi)膜的表達(dá)規(guī)律及在胚胎著床過(guò)程中的作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的胚胎的成功著床是活性胚泡和接受態(tài)子宮之間相互作用的結(jié)果。在嚙齒動(dòng)物中子宮處于接受態(tài)的時(shí)間很短,而且它的及時(shí)到來(lái)對(duì)胚胎著床至關(guān)重要,蛻膜化的過(guò)程和維持對(duì)于著床更是必不可少的。著床過(guò)程受到許多分子的調(diào)控,比如激素、細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子等。MicroRNA(miRNA)作為基因表達(dá)調(diào)節(jié)器,已被證實(shí)參與胚胎著床的調(diào)控,Drosha和Dicer在生成成熟miRNA過(guò)程中起著非常關(guān)鍵的作用,Dicer和Drosha的表達(dá)水平會(huì)直接影響到miRNA的成熟和表達(dá)及其對(duì)相關(guān)基因的調(diào)節(jié)。因?yàn)閙iRNA在胚胎著床中扮演著重要的角色,以此推測(cè)Dicer和Drosha在胚胎著床中應(yīng)該也起著非常重要的作用。已經(jīng)有研究表明,Dicer參與雌性生殖系統(tǒng)及胚胎的發(fā)育。然而,Drosha在小鼠子宮內(nèi)膜中的表達(dá)以及在胚胎著床過(guò)程中功能仍不是很清楚。我們前期在DGE(數(shù)字基因表達(dá)譜)結(jié)果中發(fā)現(xiàn),Drosha的表達(dá)在小鼠著床點(diǎn)和著床旁具有顯著差異,我們推測(cè)這種差異與胚胎著床可能相關(guān)。因此,本研究檢測(cè)了Drosha在小鼠早孕期子宮內(nèi)膜的表達(dá)規(guī)律,雌孕激素對(duì)其的影響,并探索Drosha在胚胎著床中的功能。方法(1)應(yīng)用熒光定量PCR(qPCR),蛋白免疫印跡技術(shù)(WB)和免疫組織化學(xué)(IHC)的方法檢測(cè)了Drosha mRNA和蛋白在真孕,假孕小鼠子宮內(nèi)膜中的表達(dá)模式。為了檢測(cè)Drosha的表達(dá)是不是受到雌孕激素的調(diào)控,我們應(yīng)用蛋白免疫印跡(WB)和免疫組織和化學(xué)技術(shù)(IHC)檢測(cè)了Drosha在激素處理后的小鼠子宮中的表達(dá)情況。(2)通過(guò)宮角注射玉米油,免疫組織化學(xué)(IHC)和蛋白免疫印跡技術(shù)(WB)檢測(cè)了人工誘導(dǎo)蛻膜化后Drosha蛋白的表達(dá)部位和表達(dá)量。(3)同時(shí),分離培養(yǎng)小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞,體外誘導(dǎo)蛻膜化,熒光定量PCR(qPCR)和蛋白免疫印跡技術(shù)(WB)檢測(cè)了Drosha mRNA和蛋白隨著蛻膜化過(guò)程的表達(dá)規(guī)律結(jié)果(1)在早期正常妊娠的小鼠子宮內(nèi)膜中,Drosha具有時(shí)空表達(dá)特性,Drosha的mRNA和蛋白在d4開(kāi)始升高,并在d6達(dá)到高峰。(2) Drosha在妊娠d5胚胎著床點(diǎn)的表達(dá)明顯高于著床旁。(3)假孕小鼠子宮內(nèi)膜Drosha的表達(dá)低于正常妊娠小鼠。(4)類(lèi)固醇激素處理模型中發(fā)現(xiàn)Drosha的表達(dá)受P4的調(diào)控。(5)宮角注射玉米油,體內(nèi)人工誘導(dǎo)蛻膜化后,與對(duì)照相比,Drosha的表達(dá)顯著升高(6)分離培養(yǎng)小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞,體外誘導(dǎo)蛻膜化,隨著蛻膜化進(jìn)程,Drosha及蛻膜化標(biāo)志物的表達(dá)逐漸升高。結(jié)論實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在妊娠早期,真孕和假孕小鼠的子宮內(nèi)膜中Drosha具有一定的時(shí)空表達(dá)特性。Drosha在小鼠子宮內(nèi)膜植入窗口期和人工誘導(dǎo)蛻膜化模型中高表達(dá),并且Drosha基因受到P4的調(diào)控,表明Drosha可能參與了胚胎著床的過(guò)程,我們推測(cè)Drosha可能通過(guò)調(diào)控miRNAs的成熟來(lái)參與這個(gè)過(guò)程,然而具體機(jī)制仍需要進(jìn)一步研究。
【關(guān)鍵詞】：DROSHA MicroRNA 胚胎著床
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R321
【目錄】：

• 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照5-7
• 中文摘要7-10
• 英文摘要10-14
• 前言14-15
• 1 材料和方法15-22
• 2 結(jié)果22-30
• 3 討論30-32
• 全文總結(jié)與展望32-33
• 參考文獻(xiàn)33-36
• 文獻(xiàn)綜述：MiRNA和Drosha在腫瘤中的研究進(jìn)展36-41
• 參考文獻(xiàn)38-41
• 致謝41-42
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況42

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本文編號(hào)：357677