外周血造血干細胞微泡的提取鑒定及初探其生物學特性
發(fā)布時間:2017-05-09 12:04
本文關鍵詞:外周血造血干細胞微泡的提取鑒定及初探其生物學特性,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:研究目的:外周血造血干細胞是存在于外周血中的一類具有高度自我更新和分化潛能的造血細胞群體。正常生理條件下外周血中造血干細胞的含量約占骨髓中的0.1%-1%,當給予動員劑刺激后,外周血中的造血干細胞含量增加,CD34+細胞占外周血單個核細胞(MNC)的0.5%-1.5%。隨著外周血造血干細胞采集簡便、短期內采集,另外輸注給受者后造血功能和免疫功能重建快及植入率高,逐漸取代骨髓造血干細胞用于臨床。外周血造血干細胞具有促進造血、免疫功能重建、抗腫瘤等作用。研究已證實胚胎干細胞、臍帶血造血干細胞、間充質干細胞等干細胞可分泌微泡,而且分泌的微泡攜帶母細胞的成分及特性,另外分泌的微泡沒有了母體細胞的一些缺點。對于外周血造血干細胞能否分泌微泡,目前國內外尚無報道。本研究旨在探討外周血造血干細胞能否分泌微泡,如果外周血造血干細胞能分泌微泡,初步探討外周血造血干細胞微泡的生物學特性。研究內容:1.驗證外周血造血干細胞能否分泌微泡;2.如果能,開始驗證它們的生物學功能。研究方法:1.使用超速離心法提取孵育后外周血造血干細胞培養(yǎng)上清中的“物質”,并應用負染透射電鏡從形態(tài)上鑒別提取的物質是否為微泡;2.如果驗證外周血造血干細胞能分泌微泡,應用細胞膜染液PKH-26標染微泡和細胞核染液Hoechst 33258標染PBMNC細胞核,再通過激光掃描共聚焦顯微鏡觀察微泡能否進入PBMNC中;3.如果能進入,驗證微泡能否改變受體細胞PBMNC的殺傷效應。研究結果:1.外周血造血干細胞采能分泌微泡;2.外周血造血干細胞微泡能進入PBMNC細胞中;3.初步驗證了微泡能改變受體細胞PBMNC的殺傷效應。研究結論:1.首次證實了外周血造血干細胞可以分泌微泡;2.初步驗證了外周血造血干細胞微泡可以改變受者細胞的生物學功能。
【關鍵詞】:外周血造血干細胞 微泡
【學位授予單位】:安徽醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R329.2
【目錄】:
- 摘要6-7
- Abstract7-9
- 前言9-10
- 第一章 微泡的提取與鑒定10-23
- 第一節(jié) K562細胞培養(yǎng)上清微泡的提取和鑒定10-13
- 1. 實驗材料10-11
- 2. 實驗方法11-12
- 3. 結果12-13
- 第二節(jié) 胎牛血清微泡的提取與鑒定13-15
- 1. 實驗材料14
- 2. 實驗方法14-15
- 3. 結果15
- 第三節(jié) 外周造血干細胞微泡的提取和鑒定15-19
- 1. 實驗材料15-16
- 2. 實驗方法16-17
- 3. 結果17-19
- 第四節(jié) 外周血造血干細胞微泡的蛋白定量19-20
- 1 實驗材料19
- 2 實驗方法19-20
- 3 結果20
- 第五節(jié) 外周血造血干細胞微泡表面抗原的流式鑒定20-23
- 1 實驗材料20-21
- 2 實驗方法21-22
- 3 結果22-23
- 第二章 初探外周血造血干細胞微泡的生物學功能23-34
- 第一節(jié) 人外周血造血干細胞微泡進入正常受者外周血單個核細胞中23-27
- 1 實驗材料23-24
- 2 實驗方法24-26
- 3 結果26-27
- 第二節(jié) 外周血造血干細胞微泡進入緩解期白血病患者外周血單個核細胞中27-30
- 1 實驗材料28
- 2 實驗方法28-29
- 3 結果29-30
- 第三節(jié) 在體外初步探討外周血造血干細胞微泡的特性30-34
- 1 實驗材料31
- 2 實驗方法31-33
- 3 結果33-34
- 第三章 動員后小鼠脾造血干細胞微泡進入受鼠脾單個核細胞中34-38
- 1 實驗材料35-36
- 2 實驗方法36-37
- 3 結果37-38
- 討論38-40
- 結論40-41
- 參考文獻41-44
- 附錄 個人簡歷44-45
- 致謝45-46
- 綜述46-53
- 參考文獻51-53
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條
1 左洪莉;彭恩蘭;劉鐵強;黃珊;李玉芳;姚曉蘭;尚世臣;艾輝勝;;CB6F1小鼠急性粒單核細胞白血病M4(AML-M4)模型的建立及鑒定[J];解放軍醫(yī)學雜志;2011年01期
2 吳惠惠;劉鐵強;孫雪冬;黃曉梅;張銳;劉志強;滿秋紅;黃雅靜;孫琪云;左紅莉;喬建輝;余長林;胡鍇勛;艾輝勝;郭梅;;白血病小鼠H-2全不相合微移植模型的建立及鑒定[J];中國實驗血液學雜志;2014年03期
本文關鍵詞:外周血造血干細胞微泡的提取鑒定及初探其生物學特性,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
,本文編號:352439
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