由病原菌侵染所致的感染性疾病威脅著人類的生存。天然免疫作為宿主對病原微生物免疫防御的第一道天然屏障,能識別并清除病原菌。自噬是由溶酶體介導的分解代謝過程,能有效地降解包括鼠傷寒沙門氏菌在內(nèi)的一些胞內(nèi)病原菌,在天然免疫中發(fā)揮著重要的作用。在日常生活中,口服補充鐵劑能有效緩解缺鐵癥。但是,過量地口服鐵劑容易引發(fā)感染性疾病。過量的鐵會改變宿主腸道內(nèi)微生物菌群的種類及數(shù)量,使病原微生物大量增殖,增加宿主腹瀉的幾率。然而,對于過量補充鐵劑對宿主免疫系統(tǒng)的影響還有待研究。為阻止病原菌的入侵,宿主采用營養(yǎng)免疫的防御方式,將金屬鐵離子與宿主體內(nèi)高親和力的蛋白質(zhì)結(jié)合并儲存,使金屬離子與病原菌隔絕,以限制病原菌利用金屬作為營養(yǎng)源侵染宿主。在宿主細胞內(nèi),鐵蛋白（Ferritin）是主要負責儲存鐵離子的儲鐵蛋白。然而,目前對于腸上皮細胞的Ferritin是否參與宿主對病原菌的抵抗還不清楚。在本研究中,我們以模式動物秀麗隱桿線蟲（C.elegans）以及人結(jié)腸腺癌細胞系Caco-2作為研究對象,在外源補充鐵時,用腸道病原菌鼠傷寒沙門氏菌（S.Typhimurium）侵染,研究宿主的營養(yǎng)免疫防御機制。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)... 

【文章來源】：云南大學云南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：135 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 模式生物秀麗隱桿線蟲
        1.1.1 C. elegans形態(tài)特征與生活史
        1.1.2 C. elegans腸道的形態(tài)及其功能
        1.1.3 宿主與微生物間的相互關系
        1.1.4 C. elegans的免疫防御系統(tǒng)
    1.2 哺乳動物的腸道及腸上皮
        1.2.1 人體小腸的結(jié)構及功能
        1.2.2 人體的腸上皮及Caco-2 細胞
    1.3 鐵代謝與營養(yǎng)免疫
        1.3.1 哺乳動物鐵代謝的機制
        1.3.2 秀麗隱桿線蟲鐵代謝的機制
        1.3.3 鐵蛋白Ferritin
        1.3.4 營養(yǎng)免疫
    1.4 自噬
        1.4.1 自噬的定義及分類
        1.4.2 自噬相關基因
        1.4.3 自噬的生物學功能
    1.5 本項研究的意義
第二章 鐵抑制線蟲自噬啟動FTN介導的營養(yǎng)免疫
    1、引言
    2、實驗材料與方法
        2.1 實驗儀器設備
        2.2 實驗所用化學試劑
        2.3 實驗使用試劑盒
        2.4 實驗材料
        2.5 線蟲與細菌培養(yǎng)基的配制
        2.6 實驗溶液的配制
        2.7 實驗方法
    3、實驗結(jié)果
        3.1 自噬參與線蟲對鼠傷寒沙門氏菌的抵抗
        3.2 突變自噬相關基因不影響鐵增加線蟲對鼠傷寒沙門氏菌的敏感性
        3.3 鐵抑制鼠傷寒沙門氏菌誘導線蟲的自噬
        3.4 鐵存在時，ftn參與線蟲對鼠傷寒沙門氏菌的抵抗
        3.5 鐵誘導線蟲ftn的表達
        3.6 自噬降低FTN蛋白水平
        3.7 在自噬抑制條件下，ftn才能發(fā)揮出免疫作用
        3.8 鐵參與調(diào)控自噬信號通路的篩選
        3.9 沉默ERK抑制鼠傷寒沙門氏菌誘導線蟲的自噬
        3.10 ERK參與線蟲對鼠傷寒沙門氏菌的抵抗
        3.11 ERK負調(diào)控ftn介導的營養(yǎng)免疫
        3.12 ERK參與調(diào)控FTN的表達水平
        3.13 外源添加鐵使線蟲體內(nèi)游離的Fe3+增多
    4、本章討論
第三章 鐵抑制Caco-2 細胞自噬啟動Ferritin介導的營養(yǎng)免疫
    1、引言
    2、實驗材料與方法
        2.1 實驗儀器設備
        2.2 實驗所用化學試劑
        2.3 實驗使用試劑盒
        2.4 細胞培養(yǎng)基的配制
        2.5 實驗方法
    3、實驗結(jié)果
        3.1 自噬參與Caco-2 細胞對鼠傷寒沙門氏菌的抵抗
        3.2 鐵抑制鼠傷寒沙門氏菌誘導Caco-2 細胞的自噬
        3.3 細胞自噬下調(diào)Ferritin的蛋白水平
        3.4 鐵存在時，抑制由鼠傷寒沙門氏菌激活的ERK
        3.5 沉默ERK抑制鼠傷寒沙門氏菌誘導Caco-2 細胞的自噬
        3.6 ERK參與Caco-2 細胞對鼠傷寒沙門氏菌的抵抗
        3.7 ERK抑制Ferritin蛋白水平
    4、本章討論
第四章 全文討論與展望
參考文獻
戴利利 博士期間研究成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Human small intestine is capable of restoring barrier function after short ischemic periods[J]. Dirk HSM Schellekens,Inca HR Hundscheid,Claire AJI Leenarts,Joep Grootjans,Kaatje Lenaerts,Wim A Buurman,Cornelis HC Dejong,Joep PM Derikx.  World Journal of Gastroenterology. 2017(48)



本文編號：3467490