不動桿菌CRISPR系統(tǒng)基因結(jié)構(gòu)的研究與分析
發(fā)布時間:2021-10-21 22:59
目的不動桿菌屬(Acinetobacter)是一類無芽胞,不能運動的革蘭陰性桿菌。近年來,因該類細(xì)菌在醫(yī)院感染中越來越多見,且多重耐藥(MDR)菌株的比例迅速增加,從而引起公眾的關(guān)注。規(guī)律成簇間隔的短回文重復(fù)序列(CRISPR)是廣泛存在于古生菌和細(xì)菌基因組中的、針對外來入侵元件的適應(yīng)性免疫系統(tǒng)。細(xì)菌一方面為了物種的穩(wěn)定進(jìn)化出CRISPR系統(tǒng)等機制以抵御外來基因的干擾,另一方面在生存壓力下而需要通過水平基因轉(zhuǎn)移(HGT)從外界獲得新的基因以適應(yīng)新的環(huán)境。本文旨在通過對不動桿菌CRISPR系統(tǒng)基因結(jié)構(gòu)的分析,以深入理解細(xì)菌如何協(xié)調(diào)二者的矛盾。方法本文將從兩個不同角度(NCBI數(shù)據(jù)庫已公布的菌株以及我們收集獲得的臨床分離株)分析不動桿菌CRISPR系統(tǒng)的基因結(jié)構(gòu)并初步探討其與耐藥之間的關(guān)系,并且對兩部分結(jié)果進(jìn)行對比分析。不動桿菌各菌株CRISPR陣列等相關(guān)序列信息收集自CRISPRdb數(shù)據(jù)庫,基因序列下載自NCBI的Nucleotide數(shù)據(jù)庫。使用Meg Align軟件對其重復(fù)序列(Repeat Sequence)進(jìn)行比較歸類,將最終分類結(jié)果輸入到CRISPRmap軟件中進(jìn)行分析,預(yù)測并比...
【文章來源】:青島大學(xué)山東省
【文章頁數(shù)】:64 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
CRISPR-Cas系統(tǒng)的基因結(jié)構(gòu)示意圖
在內(nèi)的更多的抗生素敏感。D 類酶又稱為 OXA 水解酶(主要水解苯唑西林)。不動桿菌作為醫(yī)院感染中重要的條件病原菌,目前對該菌基因組中 CRISPR-Cas系統(tǒng)的研究尚較少,尤其是該系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)與細(xì)菌耐藥性的關(guān)系的研究更是未見報道。CRISPR-Cas 系統(tǒng)已經(jīng)證明能夠提供對噬菌體的抗性,但是在不動桿菌中 CRISPR 系統(tǒng)是否可以發(fā)揮適應(yīng)性免疫仍然是一個需要研究的問題。眾所周知,系統(tǒng)地分析細(xì)菌的基因結(jié)構(gòu)對于我們探索該細(xì)菌更多潛在的功能具有重要意義。因此,本研究旨在全面分析和了解不動桿菌的 CRISPR-Cas 系統(tǒng)。首先,我們利用基因庫中收集到的不動桿菌基因組信息來探索 CRISPR 的組織結(jié)構(gòu)和多樣性,利用生物信息學(xué)分析了CRISPR(重復(fù)序列,間隔序列,前導(dǎo)序列和 cas 序列)的結(jié)構(gòu)特征及其可能的功能;然后,我們比較分析了間隔序列與外侵遺傳元件之間的同源性,以評估系統(tǒng)是否具有抵抗外來入侵元素的免疫活性;此外,我們比較分析了不動桿菌的 CRISPR 分型和MLST 分型,以探索二者潛在的聯(lián)系;最后,對 CRISPR 系統(tǒng)存在與否和不動桿菌耐藥基因的檢出率進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,以評估 CRISPR 系統(tǒng)是否可以限制抗生素耐藥基因的獲得和傳播。
圖 1.1 5 組 motif 分類中的重復(fù)序列 RNA 二級結(jié)構(gòu)預(yù)測及其自由能tif 結(jié)構(gòu)分類中,左圖顯示由 CRISPRmap 數(shù)據(jù)庫中包含的重復(fù)序列的共享序列的 motif 序右圖則為在 CRISPRmap 數(shù)據(jù)庫已有序列的基礎(chǔ)上加入了我們提供的序列后所形成的 R下方數(shù)值為其自由能。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]CRISPR-Cas系統(tǒng)在生物學(xué)研究中的應(yīng)用[J]. 康峰,盧勝明,張海峰. 實驗動物科學(xué). 2014(04)
[2]食源性單核細(xì)胞增生李斯特菌CRISPR結(jié)構(gòu)的研究[J]. 狄慧玲,閆鶴,石磊. 現(xiàn)代食品科技. 2014(08)
[3]嗜熱鏈球菌中CRISPR序列的檢測與同源性分析[J]. 鄧凱波,霍貴成. 食品科學(xué). 2013(03)
本文編號:3449882
【文章來源】:青島大學(xué)山東省
【文章頁數(shù)】:64 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
CRISPR-Cas系統(tǒng)的基因結(jié)構(gòu)示意圖
在內(nèi)的更多的抗生素敏感。D 類酶又稱為 OXA 水解酶(主要水解苯唑西林)。不動桿菌作為醫(yī)院感染中重要的條件病原菌,目前對該菌基因組中 CRISPR-Cas系統(tǒng)的研究尚較少,尤其是該系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)與細(xì)菌耐藥性的關(guān)系的研究更是未見報道。CRISPR-Cas 系統(tǒng)已經(jīng)證明能夠提供對噬菌體的抗性,但是在不動桿菌中 CRISPR 系統(tǒng)是否可以發(fā)揮適應(yīng)性免疫仍然是一個需要研究的問題。眾所周知,系統(tǒng)地分析細(xì)菌的基因結(jié)構(gòu)對于我們探索該細(xì)菌更多潛在的功能具有重要意義。因此,本研究旨在全面分析和了解不動桿菌的 CRISPR-Cas 系統(tǒng)。首先,我們利用基因庫中收集到的不動桿菌基因組信息來探索 CRISPR 的組織結(jié)構(gòu)和多樣性,利用生物信息學(xué)分析了CRISPR(重復(fù)序列,間隔序列,前導(dǎo)序列和 cas 序列)的結(jié)構(gòu)特征及其可能的功能;然后,我們比較分析了間隔序列與外侵遺傳元件之間的同源性,以評估系統(tǒng)是否具有抵抗外來入侵元素的免疫活性;此外,我們比較分析了不動桿菌的 CRISPR 分型和MLST 分型,以探索二者潛在的聯(lián)系;最后,對 CRISPR 系統(tǒng)存在與否和不動桿菌耐藥基因的檢出率進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,以評估 CRISPR 系統(tǒng)是否可以限制抗生素耐藥基因的獲得和傳播。
圖 1.1 5 組 motif 分類中的重復(fù)序列 RNA 二級結(jié)構(gòu)預(yù)測及其自由能tif 結(jié)構(gòu)分類中,左圖顯示由 CRISPRmap 數(shù)據(jù)庫中包含的重復(fù)序列的共享序列的 motif 序右圖則為在 CRISPRmap 數(shù)據(jù)庫已有序列的基礎(chǔ)上加入了我們提供的序列后所形成的 R下方數(shù)值為其自由能。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]CRISPR-Cas系統(tǒng)在生物學(xué)研究中的應(yīng)用[J]. 康峰,盧勝明,張海峰. 實驗動物科學(xué). 2014(04)
[2]食源性單核細(xì)胞增生李斯特菌CRISPR結(jié)構(gòu)的研究[J]. 狄慧玲,閆鶴,石磊. 現(xiàn)代食品科技. 2014(08)
[3]嗜熱鏈球菌中CRISPR序列的檢測與同源性分析[J]. 鄧凱波,霍貴成. 食品科學(xué). 2013(03)
本文編號:3449882
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