目的制備高特異性的小鼠抗人IgE單克隆抗體（mAb）作為候選免疫吸附劑。方法用重組人IgE重鏈2～4區(qū)（IgECε2-4）免疫BALB/c小鼠,經(jīng)細(xì)胞融合后,用甲基纖維素半固體培養(yǎng)基法篩選雜交瘤細(xì)胞。用IgECε2-4包被酶標(biāo)板,間接ELISA篩選陽(yáng)性細(xì)胞株,用天然IgE、 IgG、 IgM、 IgA、 IgD包被酶標(biāo)板,間接ELISA檢測(cè)陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)上清與天然IgE的親和性和特異性;將穩(wěn)定分泌特異性抗IgE mAb的細(xì)胞株擴(kuò)大培養(yǎng),小鼠體內(nèi)誘生腹水法制備mAb,檢測(cè)腹水的效價(jià)和親和力,利用mAb亞型鑒定試劑盒檢測(cè)獲得的mAb的亞型。結(jié)果經(jīng)過(guò)5次細(xì)胞融合總共得到29株陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞,有11株與天然IgE親和性較強(qiáng),有2株與其他免疫球蛋白幾乎無(wú)交叉反應(yīng),分別為3E9和7B4。結(jié)論成功制備了小鼠抗人IgE mAb,該mAb具有高效價(jià)、較高親和力和高特異性。 

【文章來(lái)源】：細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2020,36(07)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【部分圖文】：

ELISA檢測(cè)mAb與天然IgE的親和性

mAb與其他免疫球蛋白的結(jié)合結(jié)果表明3E9和7B4與其他免疫球蛋白反應(yīng)的A值均較小(圖2), 與陰性對(duì)照幾乎相等。因此, 選擇3E9和7B4作為候選免疫吸附劑。2.4 3E9、 7B4不與其他免疫球蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)

Western blot法檢測(cè)3E9、 7B4與其他幾種免疫球蛋白的交叉反應(yīng)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人IgE重鏈恒定區(qū)2～4區(qū)蛋白的真核表達(dá)、純化及其相互作用分子捕獲[J]. 黃慧慧,王哲彥,楊正根,李珍,王萍,董文其.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2018(03)
[2]太原市0～24月齡嬰幼兒過(guò)敏性疾病癥狀流行病學(xué)調(diào)查[J]. 穆文娟,楊建平,李彩霞.  中國(guó)藥物與臨床. 2017(08)
[3]過(guò)敏性疾病研究進(jìn)展與展望[J]. 劉恩梅,楊錫強(qiáng).  實(shí)用兒科臨床雜志. 2007(21)



本文編號(hào)：3422235