骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)液對(duì)大鼠皮層神經(jīng)元氧糖剝奪損傷的保護(hù)作用及機(jī)制
發(fā)布時(shí)間:2021-09-28 01:51
目的:探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)培養(yǎng)液對(duì)大鼠皮層神經(jīng)元氧糖剝奪(oxygen-glucose deprivation,OGD)損傷后細(xì)胞存活的作用及其影響機(jī)制。方法:分別取清潔級(jí)6~8周60~80 g SD大鼠和孕16~18 d孕鼠進(jìn)行BMSCs和皮層神經(jīng)元培養(yǎng)。培養(yǎng)第5天的皮層神經(jīng)元建立OGD損傷模型,實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分為4組:氧糖剝奪組(OGD組);氧糖剝奪+BMSCs培養(yǎng)液組(OGD+CM組),神經(jīng)元OGD后培養(yǎng)基更換為BMSCs培養(yǎng)液(CM)繼續(xù)培養(yǎng);OGD+CM+LY294002組及OGD+LY294002組,以上2組分別加入PI3K/AKT特異性抑制劑LY294002。各組培養(yǎng)12 h后分別通過(guò)電子顯微鏡和光學(xué)顯微鏡觀察神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)。各組培養(yǎng)2 h后分別檢測(cè)AKT、pAKT(Ser473)、激活型Casepase-3蛋白表達(dá)量,在培養(yǎng)48 h后檢測(cè)神經(jīng)元的存活率。結(jié)果:OGD培養(yǎng)后的神經(jīng)元突起斷裂、縮短、溶解,線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)細(xì)胞器腫脹。OGD+LY294002組、OGD+CM組分別與OG...
【文章來(lái)源】:重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,45(01)北大核心CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)
【部分圖文】:
BMSCs的培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化
第3代BMSCs高表達(dá)細(xì)胞表面分子CD29、CD90、CD106,細(xì)胞表面分子陽(yáng)性率均達(dá)85%左右;基本不表達(dá)血細(xì)胞表面標(biāo)志CD45,陽(yáng)性率僅在2.33%(圖2)。2.3 各組皮層神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化
流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果顯示,神經(jīng)元OGD損傷后細(xì)胞平均存活率為(61.07±2.61)%。與OGD組比較,OGD+CM組細(xì)胞平均存活率升高,[(73.75±2.04)%]OGD+LY294002組細(xì)胞平均存活率降低[(54.59±1.58)%],差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=6.630,P=0.003;t=3.679,P=0.021);與OGD+CM組比較,OGD+CM+LY294002組細(xì)胞平均存活率降低[(50.75±1.91)%],差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=14.255,P=0.000),如圖4所示。圖4 各組神經(jīng)元細(xì)胞平均存活率的分析
本文編號(hào):3411015
【文章來(lái)源】:重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,45(01)北大核心CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)
【部分圖文】:
BMSCs的培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化
第3代BMSCs高表達(dá)細(xì)胞表面分子CD29、CD90、CD106,細(xì)胞表面分子陽(yáng)性率均達(dá)85%左右;基本不表達(dá)血細(xì)胞表面標(biāo)志CD45,陽(yáng)性率僅在2.33%(圖2)。2.3 各組皮層神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化
流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果顯示,神經(jīng)元OGD損傷后細(xì)胞平均存活率為(61.07±2.61)%。與OGD組比較,OGD+CM組細(xì)胞平均存活率升高,[(73.75±2.04)%]OGD+LY294002組細(xì)胞平均存活率降低[(54.59±1.58)%],差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=6.630,P=0.003;t=3.679,P=0.021);與OGD+CM組比較,OGD+CM+LY294002組細(xì)胞平均存活率降低[(50.75±1.91)%],差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=14.255,P=0.000),如圖4所示。圖4 各組神經(jīng)元細(xì)胞平均存活率的分析
本文編號(hào):3411015
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