目的:探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs）培養(yǎng)液對大鼠皮層神經(jīng)元氧糖剝奪（oxygen-glucose deprivation,OGD）損傷后細(xì)胞存活的作用及其影響機(jī)制。方法:分別取清潔級6～8周60～80 g SD大鼠和孕16～18 d孕鼠進(jìn)行BMSCs和皮層神經(jīng)元培養(yǎng)。培養(yǎng)第5天的皮層神經(jīng)元建立OGD損傷模型,實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分為4組:氧糖剝奪組（OGD組）;氧糖剝奪+BMSCs培養(yǎng)液組（OGD+CM組）,神經(jīng)元OGD后培養(yǎng)基更換為BMSCs培養(yǎng)液（CM）繼續(xù)培養(yǎng);OGD+CM+LY294002組及OGD+LY294002組,以上2組分別加入PI3K/AKT特異性抑制劑LY294002。各組培養(yǎng)12 h后分別通過電子顯微鏡和光學(xué)顯微鏡觀察神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)。各組培養(yǎng)2 h后分別檢測AKT、pAKT（Ser473）、激活型Casepase-3蛋白表達(dá)量,在培養(yǎng)48 h后檢測神經(jīng)元的存活率。結(jié)果:OGD培養(yǎng)后的神經(jīng)元突起斷裂、縮短、溶解,線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)細(xì)胞器腫脹。OGD+LY294002組、OGD+CM組分別與OG... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,45(01)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

BMSCs的培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化

第3代BMSCs高表達(dá)細(xì)胞表面分子CD29、CD90、CD106，細(xì)胞表面分子陽性率均達(dá)85%左右；基本不表達(dá)血細(xì)胞表面標(biāo)志CD45，陽性率僅在2.33%（圖2）。2.3 各組皮層神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化

流式細(xì)胞檢測結(jié)果顯示，神經(jīng)元OGD損傷后細(xì)胞平均存活率為（61.07±2.61）%。與OGD組比較，OGD+CM組細(xì)胞平均存活率升高，[（73.75±2.04)%]OGD+LY294002組細(xì)胞平均存活率降低[（54.59±1.58）%]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=6.630,P=0.003;t=3.679,P=0.021）；與OGD+CM組比較，OGD+CM+LY294002組細(xì)胞平均存活率降低[（50.75±1.91）%]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=14.255,P=0.000），如圖4所示。圖4 各組神經(jīng)元細(xì)胞平均存活率的分析


本文編號：3411015