本文關鍵詞：氧化鐵納米粒子對DC抗原提呈功能的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：[目的]：口腔癌在惡性腫瘤中位列前十,在全身多系統(tǒng)惡性腫瘤中約占7%。2015年發(fā)布的全球癌癥統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示,2012年發(fā)展中國家新發(fā)口腔癌在男性患者全身系統(tǒng)腫瘤中位列第8,死亡人數(shù)位列男性全身系統(tǒng)性腫瘤第9。最近幾十年來,雖然手術、放療和化療等傳統(tǒng)方法在腫瘤治療方面取得了較大的進步,但口腔癌的5年生存率仍然處于較低水平,徘徊在50%-55%之間。新興的DC介導的免疫治療在頭頸癌的治療方面顯示出巨大的潛在價值。DC抗腫瘤免疫療法成功與否,很大程度上依賴于DC的提呈效率。在本次實驗中,我們使用氧化鐵納米顆粒負載DC,觀察DC對材料的吞噬作用,研究氧化鐵納米粒子對DC凋亡,表面分子表達和分泌細胞因子等功能的影響,并檢測氧化鐵納米粒子和經(jīng)表面修飾后的氧化鐵納米粒子對DC抗原提呈功能的影響,綜合評價氧化鐵納米粒子作為DC疫苗腫瘤抗原自佐劑運載體的應用前景。[方法]：提取小鼠骨髓細胞,運用細胞因子誘導方法培養(yǎng)DC。制備氧化鐵納米粒子。將不同濃度的納米粒子負載給小鼠骨髓產(chǎn)生的DC。通過普魯士藍染色及細胞鐵含量測定,檢測DC負載氧化鐵納米材料的效率。采用流式細胞技術檢測負載納米材料DC表面分子的表達和DC凋亡情況。通過酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測DC的細胞因子分泌量。氧化鐵納米粒子負載給DC, DC與雜交瘤細胞B3ZCD8+T細胞混合溫育,通過p-半乳糖苷酶(Chlorophenol Red-β-D-galactosidase, CPRG)測定實驗驗證氧化鐵納米粒子對DC抗原提呈功能的影響。帶正電荷的3-氨丙基三乙氧基硅烷(3-aminopropyltriethoxysilane, APTS)和帶負電荷的二巰基琥珀酸(dimercaptosuccinic acid, DMSA)分別修飾氧化鐵納米粒子,通過CPRG實驗驗證不同表面修飾氧化鐵納米粒子對于DC抗原提呈的影響。[結果]：培養(yǎng)至第7天的細胞集落較多,形態(tài)特征符合DC基本特征。誘導培養(yǎng)的DC表面分子CD11c陽性率達80%以上,CD80, CD86, MHCⅡ表達量均與成熟DC一致,符合實驗要求。細胞幾乎100%被藍色的氧化鐵納米材料標記。隨著氧化鐵納米粒子濃度的提高,DC含鐵量不斷增加。在濃度為0,10,25,50μg/ml,用氧化鐵納米粒子溫育24小時后,DC凋亡比例和CD80, CD86, MHCⅡ等表面分子表達沒有差異,CCR7表達下調。DC分泌細胞因子IL-12和IFN-γ能力不受氧化鐵納米粒子影響。DC的抗原提呈功能隨著氧化鐵納米粒子濃度升高而增強。修飾APTS帶正電荷的氧化鐵納米粒子相較于修飾DMSA帶負電荷的氧化鐵納米粒子具有更強的促進DC提呈的能力。[結論]：經(jīng)細胞因子誘導方法可以培養(yǎng)高純度DC。氧化鐵納米粒子具有良好的標記DC的功能。氧化鐵納米粒子對DC的表面分子表達,凋亡及分泌細胞因子功能無顯著性影響。更重要的是,它能夠促進DC的抗原提呈能力,這表明氧化鐵納米粒子不僅具有示蹤DC的功能,同時能夠增強DC介導的免疫應答反應,表面修飾APTS的氧化鐵納米粒子促進DC抗原提呈能力作用更強,是一種潛在的多功能自佐劑納米材料。
【關鍵詞】：氧化鐵納米粒子 樹突狀細胞 APTS 抗原提呈
【學位授予單位】：南京大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R392.11
【目錄】：

• 前言5-7
• 摘要7-9
• Abstract9-15
• 第一章 緒論15-24
• 1.1 腫瘤的免疫監(jiān)視與逃逸16-17
• 1.2 腫瘤免疫治療的發(fā)展17-18
• 1.3 納米材料在腫瘤免疫治療中的應用18-23
• 1.4 腫瘤免疫治療面臨的挑戰(zhàn)與機遇23-24
• 第二章 氧化鐵納米粒子對DC抗原提呈功能的影響24-46
• 2.1 引言24-26
• 2.2 實驗材料26-29
• 2.3 實驗方法29-34
• 2.4 實驗結果34-42
• 2.5 討論42-46
• 全文總結46-47
• 參考文獻47-51
• 致謝51-52
• 附錄52-53

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中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉開;氧化鐵納米粒子對DC抗原提呈功能的影響[D];南京大學;2016年

  本文關鍵詞：氧化鐵納米粒子對DC抗原提呈功能的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：339028