本文關(guān)鍵詞：氧化鐵納米粒子對(duì)DC抗原提呈功能的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：[目的]：口腔癌在惡性腫瘤中位列前十,在全身多系統(tǒng)惡性腫瘤中約占7%。2015年發(fā)布的全球癌癥統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示,2012年發(fā)展中國(guó)家新發(fā)口腔癌在男性患者全身系統(tǒng)腫瘤中位列第8,死亡人數(shù)位列男性全身系統(tǒng)性腫瘤第9。最近幾十年來(lái),雖然手術(shù)、放療和化療等傳統(tǒng)方法在腫瘤治療方面取得了較大的進(jìn)步,但口腔癌的5年生存率仍然處于較低水平,徘徊在50%-55%之間。新興的DC介導(dǎo)的免疫治療在頭頸癌的治療方面顯示出巨大的潛在價(jià)值。DC抗腫瘤免疫療法成功與否,很大程度上依賴(lài)于DC的提呈效率。在本次實(shí)驗(yàn)中,我們使用氧化鐵納米顆粒負(fù)載DC,觀察DC對(duì)材料的吞噬作用,研究氧化鐵納米粒子對(duì)DC凋亡,表面分子表達(dá)和分泌細(xì)胞因子等功能的影響,并檢測(cè)氧化鐵納米粒子和經(jīng)表面修飾后的氧化鐵納米粒子對(duì)DC抗原提呈功能的影響,綜合評(píng)價(jià)氧化鐵納米粒子作為DC疫苗腫瘤抗原自佐劑運(yùn)載體的應(yīng)用前景。[方法]：提取小鼠骨髓細(xì)胞,運(yùn)用細(xì)胞因子誘導(dǎo)方法培養(yǎng)DC。制備氧化鐵納米粒子。將不同濃度的納米粒子負(fù)載給小鼠骨髓產(chǎn)生的DC。通過(guò)普魯士藍(lán)染色及細(xì)胞鐵含量測(cè)定,檢測(cè)DC負(fù)載氧化鐵納米材料的效率。采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)負(fù)載納米材料DC表面分子的表達(dá)和DC凋亡情況。通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)DC的細(xì)胞因子分泌量。氧化鐵納米粒子負(fù)載給DC, DC與雜交瘤細(xì)胞B3ZCD8+T細(xì)胞混合溫育,通過(guò)p-半乳糖苷酶(Chlorophenol Red-β-D-galactosidase, CPRG)測(cè)定實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證氧化鐵納米粒子對(duì)DC抗原提呈功能的影響。帶正電荷的3-氨丙基三乙氧基硅烷(3-aminopropyltriethoxysilane, APTS)和帶負(fù)電荷的二巰基琥珀酸(dimercaptosuccinic acid, DMSA)分別修飾氧化鐵納米粒子,通過(guò)CPRG實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證不同表面修飾氧化鐵納米粒子對(duì)于DC抗原提呈的影響。[結(jié)果]：培養(yǎng)至第7天的細(xì)胞集落較多,形態(tài)特征符合DC基本特征。誘導(dǎo)培養(yǎng)的DC表面分子CD11c陽(yáng)性率達(dá)80%以上,CD80, CD86, MHCⅡ表達(dá)量均與成熟DC一致,符合實(shí)驗(yàn)要求。細(xì)胞幾乎100%被藍(lán)色的氧化鐵納米材料標(biāo)記。隨著氧化鐵納米粒子濃度的提高,DC含鐵量不斷增加。在濃度為0,10,25,50μg/ml,用氧化鐵納米粒子溫育24小時(shí)后,DC凋亡比例和CD80, CD86, MHCⅡ等表面分子表達(dá)沒(méi)有差異,CCR7表達(dá)下調(diào)。DC分泌細(xì)胞因子IL-12和IFN-γ能力不受氧化鐵納米粒子影響。DC的抗原提呈功能隨著氧化鐵納米粒子濃度升高而增強(qiáng)。修飾APTS帶正電荷的氧化鐵納米粒子相較于修飾DMSA帶負(fù)電荷的氧化鐵納米粒子具有更強(qiáng)的促進(jìn)DC提呈的能力。[結(jié)論]：經(jīng)細(xì)胞因子誘導(dǎo)方法可以培養(yǎng)高純度DC。氧化鐵納米粒子具有良好的標(biāo)記DC的功能。氧化鐵納米粒子對(duì)DC的表面分子表達(dá),凋亡及分泌細(xì)胞因子功能無(wú)顯著性影響。更重要的是,它能夠促進(jìn)DC的抗原提呈能力,這表明氧化鐵納米粒子不僅具有示蹤DC的功能,同時(shí)能夠增強(qiáng)DC介導(dǎo)的免疫應(yīng)答反應(yīng),表面修飾APTS的氧化鐵納米粒子促進(jìn)DC抗原提呈能力作用更強(qiáng),是一種潛在的多功能自佐劑納米材料。
【關(guān)鍵詞】：氧化鐵納米粒子 樹(shù)突狀細(xì)胞 APTS 抗原提呈
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R392.11
【目錄】：

• 前言5-7
• 摘要7-9
• Abstract9-15
• 第一章 緒論15-24
• 1.1 腫瘤的免疫監(jiān)視與逃逸16-17
• 1.2 腫瘤免疫治療的發(fā)展17-18
• 1.3 納米材料在腫瘤免疫治療中的應(yīng)用18-23
• 1.4 腫瘤免疫治療面臨的挑戰(zhàn)與機(jī)遇23-24
• 第二章 氧化鐵納米粒子對(duì)DC抗原提呈功能的影響24-46
• 2.1 引言24-26
• 2.2 實(shí)驗(yàn)材料26-29
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法29-34
• 2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果34-42
• 2.5 討論42-46
• 全文總結(jié)46-47
• 參考文獻(xiàn)47-51
• 致謝51-52
• 附錄52-53

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 劉開(kāi);氧化鐵納米粒子對(duì)DC抗原提呈功能的影響[D];南京大學(xué);2016年

  本文關(guān)鍵詞：氧化鐵納米粒子對(duì)DC抗原提呈功能的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：339028