本文關(guān)鍵詞：人肝癌裸鼠模型建立及苦參堿與順鉑聯(lián)合對肝癌移植瘤和Survivin、Caspase-3表達的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:建立人肝癌細胞裸鼠移植瘤模型,并應(yīng)用于苦參堿(Matrine,Ma)及其聯(lián)用順鉑(Cisplatin,DDP)對人肝癌裸鼠移植瘤生長和生存素(Survivin)及半胱氨酸天冬氨酸特異性蛋白酶-3(Caspase-3)基因蛋白表達水平的影響,探討其抑制肝癌的效果,闡明其在促腫瘤凋亡方面可能存在的機制。方法:將人肝癌細胞株HepG2注入BALB/c裸鼠腋部皮下建立移植瘤模型,隨機分為6組:生理鹽水(NS)對照組、Ma組(分別為給藥1、2、3wk組)、DDP組及Ma和DDP聯(lián)合組,均采用腹腔注射給藥。期間觀察裸鼠的全身狀況、接種部位成瘤時間;測量動物體質(zhì)量、瘤體體積,繪制體重變化曲線與瘤體生長曲線圖;用藥14d后處死實驗裸鼠稱瘤重,計算抑瘤率以及采用HE染色法進行瘤組織的病理學觀察;免疫組織化學法檢測瘤組織中凋亡相關(guān)蛋白Survivin與Caspase-3的表達。結(jié)果:將5.0×106個人肝癌細胞HepG2種植于裸鼠腋部皮下造移植瘤模型成功,成瘤率達100%;觀察發(fā)現(xiàn)Ma對肝癌皮下移植瘤有抑制作用,給藥1、2、3 wk組的抑瘤率分別為8.3%、37.5%、54%,給藥3、2 wk組與NS、1 wk組比較差異具有統(tǒng)計學意義(均P0.01),給藥3wk組與2 wk組比較、給藥1 wk組與NS組比較差異也具統(tǒng)計學意義(P0.05),DDP單用對裸鼠移植瘤抑瘤率為75%,Ma和DDP聯(lián)用可明顯抑制瘤體生長,其抑瘤率達83.3%,明顯高于Ma或DDP單用組,差異具有統(tǒng)計學意義(P值均0.05)。各Ma組裸鼠的體質(zhì)量等全身狀況未出現(xiàn)明顯降低且組間差異不明顯,Ma+DDP組裸鼠的平均體質(zhì)量為21.5g,比NS組(28.5g)及Ma組(26.67g)低,但較DDP組(17.33g)高且精神、活動、食量等全身狀況也明顯優(yōu)于DDP組。HE染色給藥組癌組織基本結(jié)構(gòu)和癌細胞形態(tài)與對照組無明顯變化,均為肝實體瘤組織,不同之處是給藥組可見數(shù)量、大小不等的凋亡細胞和凝固性壞死灶。Ma+DDP組瘤組織中Survivin的陽性細胞率為(19.58±4.52)%,較NS組(83.26±15.56)%、1wk組(79.58±16.36)、2wk組(62.50±8.09)、3wk組(55.56±8.16)%及DDP組(38.67±8.26)%降低,差異具有統(tǒng)計學意義(P值均0.05)。與之相對的,NS組、1wk組、2wk組、3wk組及DDP組Caspase-3的陽性細胞率分別為:(21.15±3.68)%、(24.65±2.29)%、(35.13±10.57)%、(43.68±10.96)%、(65.88±4.81)%,而Ma+DDP組較之明顯升高,為(78.26±6.09)%,Ma+DDP組與其他組比較,差異亦具統(tǒng)計學意義(P值均0.05)。結(jié)論:將人肝癌細胞HepG2種植于裸鼠腋部皮下造移植瘤模型成功,成瘤率達100%;在肝癌模型中,Ma具有一定的抑瘤作用且無明顯不良反應(yīng),早期給藥比晚期給藥抑瘤作用明顯;Ma與DDP聯(lián)用能增強DDP對裸鼠移植瘤的抑瘤作用和改善全身狀況,降低DDP的毒副反應(yīng)。其可能的作用機制是通過影響Survivin和Caspase-3的表達,而誘導(dǎo)腫瘤細胞發(fā)生凋亡。
【關(guān)鍵詞】：肝細胞癌 苦參堿 順鉑 存活素 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3
【學位授予單位】：桂林醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7;R-332
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 英漢縮略詞對照表10-11
• 前言11-14
• 1 材料與方法14-23
• 1.1 研究對象14
• 1.2 主要實驗器材與實驗試劑14-15
• 1.2.1 主要實驗儀器14-15
• 1.2.2 主要實驗試劑15
• 1.3 實驗方法15-23
• 1.3.1 細胞培養(yǎng)15-18
• 1.3.2 模型建立與給藥干預(yù)18-20
• 1.3.3 觀察指標20
• 1.3.4 大體解剖及組織病理學觀察20-21
• 1.3.5 survivin和caspase-3 免疫組化檢測及結(jié)果判定21-23
• 1.4 統(tǒng)計學處理23
• 2 結(jié)果23-33
• 2.1 模型建立23
• 2.2 全身狀況23-24
• 2.3 瘤體生長情況及腫瘤體積24-26
• 2.4 瘤質(zhì)量及抑瘤率26-27
• 2.5 病理組織學檢查結(jié)果27-28
• 2.6 Survivin與Caspase-3 免疫組化結(jié)果28-33
• 3 討論33-38
• 3.1 人肝癌動物腫瘤模型建立33
• 3.2 Ma對裸鼠體質(zhì)量及肝癌移植瘤生長的作用分析33-34
• 3.3 Ma合用DDP對裸鼠體質(zhì)量及肝癌移植瘤生長的作用分析34
• 3.4 HE染色結(jié)果分析34-35
• 3.5 Ma和DDP對人肝癌裸鼠皮下移植瘤Survivin/Caspase3表達的影響35-36
• 3.6 小結(jié)36-38
• 4 結(jié)論38-39
• 參考文獻39-44
• 附錄（綜述）44-58
• 參考文獻52-58
• 攻讀學位期間發(fā)表的學術(shù)論文目錄58-59
• 致謝59

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 屈飛;崔艷茹;徐鏡;;苦參堿對小鼠H22細胞抗腫瘤作用及其機制研究[J];腫瘤藥學;2011年04期

  本文關(guān)鍵詞：人肝癌裸鼠模型建立及苦參堿與順鉑聯(lián)合對肝癌移植瘤和Survivin、Caspase-3表達的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：323888