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骨髓間充質(zhì)干細胞對IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細胞損傷的抑制作用及其機制

發(fā)布時間:2021-05-18 05:47
  目的探討骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)對白介素1-β(IL-1β)誘導(dǎo)的軟骨細胞損傷的抑制作用及其機制。方法通過Ⅱ型膠原酶消化分離大鼠原代軟骨細胞,貼壁培養(yǎng)法獲得BMSCs。并將軟骨細胞分為正常對照組(無任何干預(yù))、IL-1β組(10 ng/ml)、BMSCs組(軟骨細胞、BMSCs及10 ng/ml的IL-1β)。MTT法檢測軟骨細胞活力,實時熒光定量PCR(qRT-PCR)法檢測蛋白聚糖(aggrecan)及Ⅱ型膠原酶(ColⅡ) mRNA的表達,Western blot檢測B細胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相關(guān)的X蛋白(Bax)、細胞外基質(zhì)金屬蛋白酶-1(MMP-1)、MMP-13、核因子-κB(NF-κB)及核因子-κB抑制蛋白(IκBα)磷酸化水平。結(jié)果與正常對照組比較,IL-1β組細胞活力、Aggrecan、ColⅡmRNA表達量及Bcl-2表達量下調(diào)(P <0. 05),Bax、MMP-1、MMP-13和p-IκBα蛋白表達量均顯著上調(diào)(P <0. 05)。與IL-1β組比較,BMSCs組細胞活力、Aggrecan、ColⅡmRNA表達量及Bc... 

【文章來源】:山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2020,51(05)

【文章頁數(shù)】:4 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 實驗動物
    1.2 主要試劑及儀器
    1.3 大鼠軟骨細胞的制備
    1.4 大鼠BMSCs的分離、培養(yǎng)、純化及鑒定
    1.5 細胞分組
    1.6 CCK-8法檢測細胞活力
    1.7 RT-PCR法檢測細胞中Aggrecan及ColⅡmR-NA表達
    1.8 Western blot檢測蛋白表達量
    1.9 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 BMSCs對IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細胞活力的影響
    2.2 BMSCs對IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細胞中Aggrecan及ColⅡmRNA表達量的影響
    2.3 BMSCs對IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細胞中Bcl-2、Bax、MMP-1和MMP-13蛋白表達量的影響
    2.4 BMSCs對IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細胞中p-NF-κB、p-IκBα蛋白表達量的影響
3 討論


【參考文獻】:
期刊論文
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本文編號:3193234

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