骨髓間充質(zhì)干細胞對IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細胞損傷的抑制作用及其機制
發(fā)布時間:2021-05-18 05:47
目的探討骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)對白介素1-β(IL-1β)誘導(dǎo)的軟骨細胞損傷的抑制作用及其機制。方法通過Ⅱ型膠原酶消化分離大鼠原代軟骨細胞,貼壁培養(yǎng)法獲得BMSCs。并將軟骨細胞分為正常對照組(無任何干預(yù))、IL-1β組(10 ng/ml)、BMSCs組(軟骨細胞、BMSCs及10 ng/ml的IL-1β)。MTT法檢測軟骨細胞活力,實時熒光定量PCR(qRT-PCR)法檢測蛋白聚糖(aggrecan)及Ⅱ型膠原酶(ColⅡ) mRNA的表達,Western blot檢測B細胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相關(guān)的X蛋白(Bax)、細胞外基質(zhì)金屬蛋白酶-1(MMP-1)、MMP-13、核因子-κB(NF-κB)及核因子-κB抑制蛋白(IκBα)磷酸化水平。結(jié)果與正常對照組比較,IL-1β組細胞活力、Aggrecan、ColⅡmRNA表達量及Bcl-2表達量下調(diào)(P <0. 05),Bax、MMP-1、MMP-13和p-IκBα蛋白表達量均顯著上調(diào)(P <0. 05)。與IL-1β組比較,BMSCs組細胞活力、Aggrecan、ColⅡmRNA表達量及Bc...
【文章來源】:山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2020,51(05)
【文章頁數(shù)】:4 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 實驗動物
1.2 主要試劑及儀器
1.3 大鼠軟骨細胞的制備
1.4 大鼠BMSCs的分離、培養(yǎng)、純化及鑒定
1.5 細胞分組
1.6 CCK-8法檢測細胞活力
1.7 RT-PCR法檢測細胞中Aggrecan及ColⅡmR-NA表達
1.8 Western blot檢測蛋白表達量
1.9 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 BMSCs對IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細胞活力的影響
2.2 BMSCs對IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細胞中Aggrecan及ColⅡmRNA表達量的影響
2.3 BMSCs對IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細胞中Bcl-2、Bax、MMP-1和MMP-13蛋白表達量的影響
2.4 BMSCs對IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細胞中p-NF-κB、p-IκBα蛋白表達量的影響
3 討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]TLR4/NF-κB通路參與大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎滑膜早期病變的研究[J]. 王學(xué)宗,丁道芳,薛艷,顧新豐,龐堅,張旻,鄭昱新,曹月龍,詹紅生. 中國骨傷. 2019(01)
[2]關(guān)節(jié)軟骨細胞和骨髓間充質(zhì)干細胞不同共培養(yǎng)方式對細胞增殖與分化的影響[J]. 趙文慧,皮洪濤,馮萬文,李向東,王建偉,劉岳鵬,姜洋,馬建新,夏亞一,王翠芳,邵林林,李春輝,郁洪陽,劉尚林,董言斌,馬亞輝. 中國組織工程研究. 2019(01)
[3]Ⅰ、Ⅱ型膠原蛋白在不同損傷類型動物模型椎間盤組織內(nèi)的含量變化規(guī)律[J]. 趙小丹,劉浩,黃富國,劉熹,鄧宇驍. 華西醫(yī)學(xué). 2018(09)
[4]1α,25(OH)2D3對大鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞蛋白聚糖和蛋白聚糖酶代謝的調(diào)節(jié)作用[J]. 官劍,譚啟釗,趙振達,劉忠軍,宋純理,冷慧杰. 中國實驗動物學(xué)報. 2018(03)
[5]炎癥分子核因子κB及骨橋蛋白在骨關(guān)節(jié)炎患者膝關(guān)節(jié)液中的表達及臨床意義[J]. 蔣華,曾勇,馬紅兵,徐兵,王俊瑞. 標(biāo)記免疫分析與臨床. 2017(11)
[6]新西蘭大白兔距骨軟骨細胞的分離培養(yǎng)與鑒定[J]. 王勇平,朱兆金,徐向陽. 中國組織工程研究. 2017(28)
[7]骨關(guān)節(jié)炎發(fā)病機制和治療的最新進展[J]. 鄭曉芬. 中國組織工程研究. 2017(20)
[8]大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞分離鑒定方法及生物學(xué)特性[J]. 曹華,高建華,劉小龍,林思思. 中國組織工程研究. 2017(09)
[9]骨關(guān)節(jié)炎治療藥物的研究進展[J]. 肖壯,唐濤,孫先潤,劉穎,李亞國,李連娥,李曉云. 中國藥房. 2016(35)
[10]骨髓間充質(zhì)干細胞修復(fù)軟骨缺損的應(yīng)用前景[J]. 魯先闖,張志峰,黃健. 中國組織工程研究. 2015(19)
本文編號:3193234
【文章來源】:山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2020,51(05)
【文章頁數(shù)】:4 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 實驗動物
1.2 主要試劑及儀器
1.3 大鼠軟骨細胞的制備
1.4 大鼠BMSCs的分離、培養(yǎng)、純化及鑒定
1.5 細胞分組
1.6 CCK-8法檢測細胞活力
1.7 RT-PCR法檢測細胞中Aggrecan及ColⅡmR-NA表達
1.8 Western blot檢測蛋白表達量
1.9 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 BMSCs對IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細胞活力的影響
2.2 BMSCs對IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細胞中Aggrecan及ColⅡmRNA表達量的影響
2.3 BMSCs對IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細胞中Bcl-2、Bax、MMP-1和MMP-13蛋白表達量的影響
2.4 BMSCs對IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細胞中p-NF-κB、p-IκBα蛋白表達量的影響
3 討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]TLR4/NF-κB通路參與大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎滑膜早期病變的研究[J]. 王學(xué)宗,丁道芳,薛艷,顧新豐,龐堅,張旻,鄭昱新,曹月龍,詹紅生. 中國骨傷. 2019(01)
[2]關(guān)節(jié)軟骨細胞和骨髓間充質(zhì)干細胞不同共培養(yǎng)方式對細胞增殖與分化的影響[J]. 趙文慧,皮洪濤,馮萬文,李向東,王建偉,劉岳鵬,姜洋,馬建新,夏亞一,王翠芳,邵林林,李春輝,郁洪陽,劉尚林,董言斌,馬亞輝. 中國組織工程研究. 2019(01)
[3]Ⅰ、Ⅱ型膠原蛋白在不同損傷類型動物模型椎間盤組織內(nèi)的含量變化規(guī)律[J]. 趙小丹,劉浩,黃富國,劉熹,鄧宇驍. 華西醫(yī)學(xué). 2018(09)
[4]1α,25(OH)2D3對大鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞蛋白聚糖和蛋白聚糖酶代謝的調(diào)節(jié)作用[J]. 官劍,譚啟釗,趙振達,劉忠軍,宋純理,冷慧杰. 中國實驗動物學(xué)報. 2018(03)
[5]炎癥分子核因子κB及骨橋蛋白在骨關(guān)節(jié)炎患者膝關(guān)節(jié)液中的表達及臨床意義[J]. 蔣華,曾勇,馬紅兵,徐兵,王俊瑞. 標(biāo)記免疫分析與臨床. 2017(11)
[6]新西蘭大白兔距骨軟骨細胞的分離培養(yǎng)與鑒定[J]. 王勇平,朱兆金,徐向陽. 中國組織工程研究. 2017(28)
[7]骨關(guān)節(jié)炎發(fā)病機制和治療的最新進展[J]. 鄭曉芬. 中國組織工程研究. 2017(20)
[8]大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞分離鑒定方法及生物學(xué)特性[J]. 曹華,高建華,劉小龍,林思思. 中國組織工程研究. 2017(09)
[9]骨關(guān)節(jié)炎治療藥物的研究進展[J]. 肖壯,唐濤,孫先潤,劉穎,李亞國,李連娥,李曉云. 中國藥房. 2016(35)
[10]骨髓間充質(zhì)干細胞修復(fù)軟骨缺損的應(yīng)用前景[J]. 魯先闖,張志峰,黃健. 中國組織工程研究. 2015(19)
本文編號:3193234
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