目的探討表皮生長因子受體（epidermal growth factor receptor, EGFR）信號通路抑制劑Gefitinib對骨外膜間充質(zhì)干細(xì)胞（periosteum mesenchymal stem cells, PMSCs）和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs）生物學(xué)功能的影響。方法將10只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組（n=5）和對照組（n=5）,均予以制備股骨閉合骨折模型。實(shí)驗(yàn)組給予Gefitinib灌胃（100 mg/kg·d）,對照組給予相同劑量甲基纖維素灌胃。術(shù)后1周在麻醉狀態(tài)下處死大鼠并分離提取股骨BMSCs和PMSCs,通過流式細(xì)胞術(shù)鑒定細(xì)胞表面分化抗原群（cluster of differentiation, CD）29、CD34、CD45、CD90;成纖維樣細(xì)胞集落形成單位（colony forming unit-fibroblast, CFU-F）檢測形成沉淀的堿性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP）染色陽性細(xì)胞數(shù)及沉淀直徑大小;5-溴-2-脫氧尿苷（5-Bro... 

【文章來源】：華南國防醫(yī)學(xué)雜志. 2020,34(05)

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 資料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動物
    1.2 試劑
    1.3 儀器
    1.4 方法
        1.4.1 分組與造模
        1.4.2 PMSCs和BMSCs的分離提取與培養(yǎng)
        1.4.3 流式細(xì)胞學(xué)技術(shù)鑒定干細(xì)胞表型
        1.4.4 成纖維樣細(xì)胞集落形成單位(colony forming unit-fibroblast, CFU-F)及堿性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)染色
        1.4.5 BrdU檢測細(xì)胞增殖能力
        1.4.6 Von Kossa染色和阿爾新藍(lán)染色
        1.4.7 qPCR檢測細(xì)胞周期因子、成骨分化及成軟骨化相關(guān)基因
    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 流式細(xì)胞鑒定干細(xì)胞表面標(biāo)志物
    2.2 成纖維樣細(xì)胞CFU-F檢測
    2.3 BrdU檢測干細(xì)胞增殖能力
    2.4 多向誘導(dǎo)分化鑒定
    2.5 qPCR法檢測細(xì)胞周期抑制因子相關(guān)基因的表達(dá)
    2.6 qPCR法檢測成骨分化和成軟骨分化相關(guān)基因的表達(dá)
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]吉非替尼對骨折愈合中Ⅰ、Ⅱ及Ⅹ型膠原基因表達(dá)的影響[J]. 袁功武,蘭生輝,曾文波,劉曦明,聶宇.  中國矯形外科雜志. 2018(10)
[2]表皮生長因子受體信號通路抑制劑吉非替尼對大鼠股骨骨折愈合的影響[J]. 袁功武,蘭生輝,聶宇,劉曦明.  中華創(chuàng)傷雜志. 2018 (05)
[3]抑制表皮生長因子受體信號通路對大鼠股骨骨折愈合的作用[J]. 袁功武,蘭生輝,劉曦明.  中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2018(04)
[4]Reduced EGFR signaling enhances cartilage destruction in a mouse osteoarthritis model[J]. Xianrong Zhang,Ji Zhu,Fei Liu,Yumei Li,Abhishek Chandra,L Scott Levin,Frank Beier,Motomi Enomoto-Iwamoto,Ling Qin.  Bone Research. 2014(03)
[5]大鼠股骨閉合骨折模型的制作[J]. 周曉中,董啟榕,張健.  東南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2007(01)



本文編號：3193908