發(fā)布時(shí)間：2021-05-05 23:22

　　目的:通過構(gòu)建Id3-Gdf9條件性敲除（CKO）小鼠并研究雌性小鼠的表型,從而確定分化抑制因子3（inhibitor of differentiotion 3,Id3）對(duì)雌性小鼠生育能力的影響。方法:通過交配繁殖獲得Id3-Gdf9 CKO小鼠,以HE染色、卵泡計(jì)數(shù)對(duì)CKO小鼠卵巢中的卵泡發(fā)育情況進(jìn)行檢測(cè),以卵母細(xì)胞體外成熟實(shí)驗(yàn)和體外超排實(shí)驗(yàn)對(duì)卵母細(xì)胞的體外成熟進(jìn)行檢測(cè),通過交配實(shí)驗(yàn)對(duì)生育力進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果:qPCR、Western blot結(jié)果顯示卵母細(xì)胞中Id3被成功敲除;對(duì)3、8周小鼠卵巢進(jìn)行HE染色并對(duì)各級(jí)卵泡進(jìn)行計(jì)數(shù),結(jié)果表明CKO小鼠中各級(jí)卵泡發(fā)育正常;卵母細(xì)胞體外成熟以及體外超排實(shí)驗(yàn)顯示CKO小鼠中卵母細(xì)胞體外成熟正常;交配實(shí)驗(yàn)表明CKO小鼠生育能力正常。結(jié)論:在正常飼養(yǎng)條件下,條件性敲除Id3不影響正常卵泡的發(fā)育以及雌性小鼠的生育能力。 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2020,40(07)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 構(gòu)建條件性敲除（conditional knockout,CKO）小鼠模型
        1.2.2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR）檢測(cè)Id3表達(dá)
        1.2.3 Western blot檢測(cè)Id3敲除效率
        1.2.4 HE染色
        1.2.5 卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)和體外超排實(shí)驗(yàn)
        1.2.6 卵泡計(jì)數(shù)
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 Id3-Gdf9 CKO小鼠構(gòu)建以及敲除效率的驗(yàn)證
    2.2 CKO小鼠中各級(jí)卵泡發(fā)育情況分析
    2.3 CKO小鼠卵母細(xì)胞體外成熟及體外超排情況
    2.4 CKO小鼠生育能力
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]利用CRISPR/Cas9技術(shù)建立RelB敲除小鼠模型[J]. 徐幟,孫文博,張妍妍,許勇,唐金海.  南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2019(03)



本文編號(hào)：3170782