TRPA1在THP-1來源巨噬細(xì)胞上表達(dá)及調(diào)控LPC誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)
發(fā)布時(shí)間：2021-04-13 15:06
瞬時(shí)受體電位錨蛋白離子通道1（Transient receptor potential ankyrin 1,TRPA1）是瞬時(shí)受體電位（Transient receptor potential,TRP）超家族的成員之一。TRPA1不僅是主要的痛覺及冷覺感受器,同時(shí)也能感受細(xì)胞外刺激物刺激,機(jī)械刺激等。在痛覺,溫度感知,炎癥反應(yīng)等生理功能中發(fā)揮了重要作用。盡管TRPA1廣泛表達(dá)于各組織和器官中,但在淋巴細(xì)胞中的表達(dá)及功能研究還鮮有報(bào)道。溶血磷脂酰膽堿（Lysophosphatidylcholine,LPC）是哺乳動(dòng)物體內(nèi)重要的脂質(zhì)分子,其是構(gòu)成細(xì)胞膜及氧化脂蛋白的主要組成部分。當(dāng)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生時(shí),機(jī)體內(nèi)的磷脂酶A2（Phospholipase A2,PLA2）能催化細(xì)胞膜上的磷脂酰膽堿（Phosphatidylcholine,PC）及氧化脂蛋白產(chǎn)生LPC。LPC是重要的促炎以及促動(dòng)脈粥樣硬化脂質(zhì),能促進(jìn)單核細(xì)胞的粘附,以及巨噬細(xì)胞向泡沫細(xì)胞轉(zhuǎn)化。在內(nèi)皮細(xì)胞中,LPC能促進(jìn)線粒體活性氧（Mitochondrial reactive oxygen species,mtROS）的產(chǎn)生。在單核...
【文章來源】：中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)安徽省 211工程院校 985工程院校
【文章頁數(shù)】：67 頁
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
圖１－１哺乳類動(dòng)物ＴＲＰ通道超家族系統(tǒng)發(fā)生樹
１１以及１２可以剪切ｇａｓｄｅｒｍｉｎ?Ｄ的連接處，使Ｎ端及Ｃ端分離。Ｇａｓｄｅｒｍｉｎ?Ｄ??的Ｎ端具有引發(fā)細(xì)胞焦亡的活性，并對細(xì)菌有很強(qiáng)的毒性，而Ｃ端與Ｎ端的結(jié)??合能抑制其作用（Ｓｈｉ?ｅＺ?〇／．，２０１７）ｃ＝Ｇａｓｄｅｒｍｉｎ?Ｄ參與細(xì)胞焦亡過程如圖１－５所示。??Ｉ?Ｔｏ？ｉｎｓ?１?Ｊ?＇?Ａｃｔｉｖｅ?ｃａＳｐａ？－４／５／ｎ?ｐ?Ｉ?，?Ｊ?＼?＼?ＰＶ？ｐｔ〇ｓｉｓ??！?Ｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅ?ｓｅｎｓｏｒｓ?＾＾?１??ｌ?｛ＮＬＲＰｌ，?ＮＬＲＰ３，?Ｉ?Ｉ?ＶｊＳｒ??ｌ?ＭＡＩＰｓ，ＡＩＭ２，?Ｐｙｒｉｎ，．．．）?．?Ｋ?★?／??Ｉ?ＮＬＲＣ４?／??Ｐｒｏｃａｓｐａｓｅ－１?ＭＢＩ?＾＾ＳＤＭＤ?ｐｏｒｅ＿＿??Ａｃｔｉｖｅ?ｃａｓｐａｓｅ－ｌ?Ｐｒｏ－ＩＬ－ｌ｜３／??＾——麵??圖１－５?Ｇａｓｄｅｒｍｉｎ?Ｄ參與細(xì)胞焦亡示意圖。（Ｓｈｉ?ｅｔ?ａＡ，?２０１７）??圖注：Ｇａｓｄｅｒｍｉｎ?Ｄ在未剪切時(shí)成失活狀態(tài)，當(dāng)炎癥小體感知細(xì)胞中相關(guān)信號(hào)后，通過??作用ｃａｓｐａｓｅ－１剪切ＩＬ－１?０前體為活化態(tài)并剪切ｇａｓｄｅｒｍｉｎ?Ｄ，使其Ｎ端和Ｃ端??１６??
為了驗(yàn)證ＴＲＰＡ１在ＴＨＰ－１來源的巨噬細(xì)胞上有ＲＮＡ水平轉(zhuǎn)錄以及蛋白質(zhì)??水平的表達(dá)。我們分別運(yùn)用了?ＲＴ－ｑＰＣＲ鑒定了吵ｄ的ｍＲＮＡ轉(zhuǎn)錄（如圖３－１Ａ）??以及用ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ鑒定了其蛋白質(zhì)表達(dá)水平（如圖３－１Ｂ）。通過免疫焚光檢??測，分析ＴＲＰＡ１在細(xì)胞上的分布。從共聚焦顯微圖片上能夠發(fā)現(xiàn)ＴＲＰＡ１在細(xì)胞??膜以及細(xì)胞胞質(zhì)中均有表達(dá)（如圖３－１Ｃ）。最后，為了驗(yàn)證ＴＲＰＡ１在細(xì)胞中具??有生理功能，并能介導(dǎo)鈣離子內(nèi)流，我們用鈣離子成像進(jìn)行了分析。鈣成像結(jié)果??顯示ＴＲＰＡ１的激動(dòng)劑異硫氰酸丙酯（ＡＩＴＣ）能引起ＴＨＰ－１來源的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生??Ａ?，?？?滬?Ｂ??（ｂｐ）?ＴＲＰＡ１?ＨＵＭＰ?１１０?ｋＤａ??２５０－?Ｉ??ｉｎｎ????１?ｓ５ｋＤａ??ｃ?ＴＲＰＡ１?ＤＡＰＩ?Ｍｅｒｇｅ??■■■??ＰＭＰＢＰＭＨ??Ｄ?１．６－??１．４－?—?ＡＩＴＣ??咖ｍｒｉｒｒ－「．?—?ＡＩＴＣ＋ＨＣ０３００３１??ｇ?１．２－???????｜?＾???５；?１．０－?！丄一＿＿，．－丨?ＶＴＥ—一??０．８－?＝??〇６〇?５０?１００
本文編號(hào)：3135521
【文章來源】：中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)安徽省 211工程院校 985工程院校
【文章頁數(shù)】：67 頁
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
圖１－１哺乳類動(dòng)物ＴＲＰ通道超家族系統(tǒng)發(fā)生樹
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