發(fā)布時間：2021-03-25 04:17

　　背景:骨骼肌細胞呈現(xiàn)免疫學特性,主動參與局部免疫應答。它們能夠通過主要組織相容性復合物呈遞抗原,并能夠分泌可溶性肌細胞因子,這些分子以促炎或抗炎方式主動參與損傷肌組織修復再生過程以及炎性肌病的病理過程。了解骨骼肌細胞免疫學特性有助于確定肌損傷與炎性肌病的新治療靶點。非折疊蛋白反應（Unfolded Protein Responses,UPR）是一種適應性反應,旨在恢復內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激條件下內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的穩(wěn)態(tài)。研究表明UPR的功能超出了其傳統(tǒng)認定功能,并與其他功能相交叉,如先天免疫和抗原呈遞。UPR也被認為參與骨骼肌的修復再生過程,并調(diào)節(jié)肌肉的重塑。那么,炎性刺激誘發(fā)的肌纖維UPR是否直接影響肌纖維自身的免疫特征?具體由哪些UPR通路參與對肌纖維免疫功能的調(diào)節(jié)?目前尚無相關的研究報道。目的分析急性肌損傷誘導的炎性環(huán)境以及體外炎性刺激對肌組織和肌細胞內(nèi)UPR的影響;明確UPR對體外炎性刺激誘導的肌細胞免疫表型的影響并進一步分析UPR影響肌細胞免疫表型的機制。方法采用qRT-PCR等分析心臟毒素（cardiotoxin,CTX）誘導的急性肌損傷以及體外炎性刺激與肌細胞UPR-IRE1α軸活化的相關性;應... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數(shù)】：108 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激的啟動機制??Ｆｉｇｕｒｅ?１．?Ｔｈｅ?ｍｅｃｈａｎｉｓｍ?ｏｆ?ＥＲ?ｓｔｒｅｓｓ??

?第一章急性損傷以及體外炎性刺激導致肌細胞內(nèi)ＵＰＲ被激活???環(huán)節(jié)。我們采用廣泛被報道的脛骨前肌肌內(nèi)注射ＣＴＸ的方法構建肌損傷小鼠模??型，Ｈ＆Ｅ染色和免疫熒光Ｌａｍｉｒｉｉｎ２ａ染色觀察肌肉的損傷程度。結(jié)果顯示（圖??１－１）：?ＣＴＸ肌內(nèi)注射４天時，肌細胞細胞膜遭到破壞、正常結(jié)構消失，局部大??量細胞核聚集，表明組織細胞溶解、潰變，局部淋巴細胞滲出明顯；ＣＴＸ肌內(nèi)??注射７天時，大量聚集的細胞核明顯減少，中央核細胞增多，表明損傷組織內(nèi)??淋巴細胞滲出減少，再生肌細胞増多，肌組織進入修復再生期；ＣＴＸ肌內(nèi)注射??１０天時，少量出現(xiàn)聚集的細胞核，中央核細胞較１０天時增大，表明滲出的淋巴??細胞大部分己消失，肌細胞進一步修復；ＣＴＸ肌內(nèi)注射１４天時，聚集的細胞核??基本消失，中央核細胞進一步增大，且部分己成熟為周邊核細胞，表明損傷肌??組織炎癥滲出己消失，且組織基本完成修復。以上結(jié)果表明：采用ＣＴＸ?（５０?ｐＬ，??５（Ｈｌｇ／ｍＬ）肌內(nèi)注射可以成功制備急性肌損傷模型，在此基礎上可以進行后續(xù)實??驗。??ｄ０?ｄ４?ｄ７?ｄｌＯ?ｄ?１４??

?博士學位論文???則在７天時顯著升高，之后下降至正常水平。采用蛋白免疫印跡（ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ）??檢測肌損傷后４天、７天、１０天、丨４天脛骨前肌蛋白提取物中ＡＴＦ６、ｐ－ＩＲＥｌａ??和ｐ－ｅＩＦ２ａ。結(jié)果顯示（圖１－３）：損傷后４天，ＡＴＦ６ａ明顯上調(diào)，其上調(diào)趨勢持??續(xù)至７天，隨后下調(diào)至１４天恢復正常水平；ｐ－ｅＩＦ２ａ、ｐ－ＩＲＥｌ在損傷后呈上調(diào)趨??勢，至７天和１０天時與非損傷組有明顯差異，１４天時，與非損傷組相比呈現(xiàn)升??高趨勢但無統(tǒng)計學差異。以上結(jié)果表明：ＵＰＲ在急性肌損傷過程中可活化，且??隨著再生修復過程的完成而逐漸減退。??２２－?■?ＡＴＦ４??Ｏｄａｙ?４ｄａｙ?７ｄａｙ?ｌＯｄａｙ?＜?９?ＡＴＦ６??


本文編號：3099009