體外嗜堿性粒細(xì)胞激活試驗(yàn)法的建立
發(fā)布時(shí)間:2021-02-26 05:25
目的建立基于流式細(xì)胞儀檢測(cè)的體外嗜堿性粒細(xì)胞激活試驗(yàn)(human basophil activation test,h-BAT)方法,并探索該方法用于Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)檢查的可行性。方法利用人源白血病嗜堿性粒細(xì)胞KU812在Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)過程中經(jīng)陽(yáng)性劑激活后,細(xì)胞特異性表面抗原CD63和CD203表達(dá)特異性增強(qiáng)的原理建立體外Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)模型,并同步用人組胺酶聯(lián)免疫法進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果確定以終濃度為2μg·mL-1的N-甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸為陽(yáng)性劑,孵育2 h作為流式方法檢測(cè)嗜堿性粒細(xì)胞激活的陽(yáng)性成立條件,細(xì)胞相對(duì)組胺釋放百分比增高結(jié)果進(jìn)一步確認(rèn)了陽(yáng)性成立條件。結(jié)論 h-BAT法有測(cè)試簡(jiǎn)便、評(píng)價(jià)客觀等優(yōu)點(diǎn),是一種較好的過敏反應(yīng)細(xì)胞模型,可以用于現(xiàn)有豚鼠試驗(yàn)的替代。
【文章來(lái)源】:中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué). 2020,37(08)北大核心
【文章頁(yè)數(shù)】:4 頁(yè)
【文章目錄】:
1 儀器和材料
1.1 儀器
1.2 細(xì)胞株
1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
2 方法
2.1 體外模型的建立
2.2 組胺相對(duì)釋放量測(cè)定
2.3 數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果
3.1 通過組胺釋放量選擇陽(yáng)性劑
3.2 確定細(xì)胞模型的特異表面標(biāo)志物
3.3 確定KU812細(xì)胞模型fMLP陽(yáng)性劑的孵育時(shí)間和孵育濃度
3.4 嗜堿性粒細(xì)胞激活試驗(yàn)流程
4 討論
本文編號(hào):3052118
【文章來(lái)源】:中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué). 2020,37(08)北大核心
【文章頁(yè)數(shù)】:4 頁(yè)
【文章目錄】:
1 儀器和材料
1.1 儀器
1.2 細(xì)胞株
1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
2 方法
2.1 體外模型的建立
2.2 組胺相對(duì)釋放量測(cè)定
2.3 數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果
3.1 通過組胺釋放量選擇陽(yáng)性劑
3.2 確定細(xì)胞模型的特異表面標(biāo)志物
3.3 確定KU812細(xì)胞模型fMLP陽(yáng)性劑的孵育時(shí)間和孵育濃度
3.4 嗜堿性粒細(xì)胞激活試驗(yàn)流程
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