目的:本研究通過對牙源性細胞轉(zhuǎn)染突變EDA1,探討突變EDA1對牙源性上皮細胞（LS8細胞）及牙髓干細胞（DPSCs）增殖和細胞周期的影響,為進一步闡明突變EDA1導致先天缺牙的致病機制提供理論依據(jù)。方法:LS8細胞及DPSCs常規(guī)傳代培養(yǎng)于含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基中,0.25%胰酶+EDTA消化細胞傳代。轉(zhuǎn)染野生型及突變型EDA1質(zhì)粒及空載體質(zhì)粒,將實驗分組為:野生型EDA1組（Wt）、單純型突變EDA1各組（A259H、R334H和S374R）、綜合征型突變EDA1組（XLHED）和空載體pCR3對照組（pCR3）。MTT法檢測LS8細胞及DPSCs各組細胞的增殖活性。流式細胞術(shù)檢測LS8細胞及DPSCs各組的細胞周期分布。應用SPSS 21.0軟件進行統(tǒng)計分析,單因素方差分析檢驗各組之間的差異,P值設定為0.05。結(jié)果:1.MTT實驗中,Wt組LS8細胞增殖活性升高;第72小時,與pCR3組比較,差異具有顯著性（P<0.05）;第96小時,與XLHED組及pCR3組比較,差異具有顯著性（分別為P<0.05;P<0.01）。單純型突變EDA1各組（A259... 

【文章來源】：河北醫(yī)科大學河北省

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

載體質(zhì)粒Fig.1Plasmidvectormap

pCR3-Flag（pCR3）。野生型 EDA1 質(zhì)粒（見圖 2）：pCR3-Flag-EDA1-Wt（EDA1-Wt）。綜合征型突變 EDA1 質(zhì)粒（EDA1-XLHED）（見圖 2）：pCR3-Flag-EDA1-H252L（EDA1-H252L）。上述質(zhì)粒均由 Pascal Schneider 教授惠贈（Department of Biochemistry,University of Lausanne, Switzerland），由本實驗室保存。單純型突變 EDA1 質(zhì)粒（EDA1-NSTA）（見圖 2）：pCR3-Flag-EDA1-A259E（EDA1-A259E）；pCR3-Flag-EDA1-R334H（EDA1-R334H）；pCR3-Flag-EDA1-S374R（EDA1-S374R）。上述質(zhì)粒均由馮海蘭教授惠贈（北京大學口腔醫(yī)院修復科），由本實驗室保存。

圖 7 EDAR 信號通路模式圖[30].7 Proposed model for the EDAR signalling pate ligand EDA1 to the TNF-receptor EDAR results ining EDARADD, TRAF6, TAB2 and TAK1. TAK1 directly or via activation of NIK, which in turn ph IKK complex leads to ubiquitination and proteasomalns IκB and to the release of the NF-κB transcriptthe nucleus where it activates the transcription of target EDAR pathway is CYLD, possibly by deubiquitin h處，Wt組與XLHED組比較，Wt組細胞增殖


本文編號：2950565