目的:本研究通過對牙源性細(xì)胞轉(zhuǎn)染突變EDA1,探討突變EDA1對牙源性上皮細(xì)胞（LS8細(xì)胞）及牙髓干細(xì)胞（DPSCs）增殖和細(xì)胞周期的影響,為進(jìn)一步闡明突變EDA1導(dǎo)致先天缺牙的致病機(jī)制提供理論依據(jù)。方法:LS8細(xì)胞及DPSCs常規(guī)傳代培養(yǎng)于含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基中,0.25%胰酶+EDTA消化細(xì)胞傳代。轉(zhuǎn)染野生型及突變型EDA1質(zhì)粒及空載體質(zhì)粒,將實(shí)驗(yàn)分組為:野生型EDA1組（Wt）、單純型突變EDA1各組（A259H、R334H和S374R）、綜合征型突變EDA1組（XLHED）和空載體pCR3對照組（pCR3）。MTT法檢測LS8細(xì)胞及DPSCs各組細(xì)胞的增殖活性。流式細(xì)胞術(shù)檢測LS8細(xì)胞及DPSCs各組的細(xì)胞周期分布。應(yīng)用SPSS 21.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,單因素方差分析檢驗(yàn)各組之間的差異,P值設(shè)定為0.05。結(jié)果:1.MTT實(shí)驗(yàn)中,Wt組LS8細(xì)胞增殖活性升高;第72小時(shí),與pCR3組比較,差異具有顯著性（P<0.05）;第96小時(shí),與XLHED組及pCR3組比較,差異具有顯著性（分別為P<0.05;P<0.01）。單純型突變EDA1各組（A259... 

【文章來源】：河北醫(yī)科大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

載體質(zhì)粒Fig.1Plasmidvectormap

pCR3-Flag（pCR3）。野生型 EDA1 質(zhì)粒（見圖 2）：pCR3-Flag-EDA1-Wt（EDA1-Wt）。綜合征型突變 EDA1 質(zhì)粒（EDA1-XLHED）（見圖 2）：pCR3-Flag-EDA1-H252L（EDA1-H252L）。上述質(zhì)粒均由 Pascal Schneider 教授惠贈(zèng)（Department of Biochemistry,University of Lausanne, Switzerland），由本實(shí)驗(yàn)室保存。單純型突變 EDA1 質(zhì)粒（EDA1-NSTA）（見圖 2）：pCR3-Flag-EDA1-A259E（EDA1-A259E）；pCR3-Flag-EDA1-R334H（EDA1-R334H）；pCR3-Flag-EDA1-S374R（EDA1-S374R）。上述質(zhì)粒均由馮海蘭教授惠贈(zèng)（北京大學(xué)口腔醫(yī)院修復(fù)科），由本實(shí)驗(yàn)室保存。

圖 7 EDAR 信號(hào)通路模式圖[30].7 Proposed model for the EDAR signalling pate ligand EDA1 to the TNF-receptor EDAR results ining EDARADD, TRAF6, TAB2 and TAK1. TAK1 directly or via activation of NIK, which in turn ph IKK complex leads to ubiquitination and proteasomalns IκB and to the release of the NF-κB transcriptthe nucleus where it activates the transcription of target EDAR pathway is CYLD, possibly by deubiquitin h處，Wt組與XLHED組比較，Wt組細(xì)胞增殖


本文編號(hào)：2950565