細胞膜去極化可促進某些細胞包括肌衛(wèi)星細胞的增殖,但去極化對于肌母細胞的作用還不清楚.本文通過培養(yǎng)基中高濃度的鉀離子（K⁺）引發(fā)小鼠原代肌母細胞膜的去極化,采用直接計數(shù)法評估細胞的增殖能力.結(jié)果顯示,在K⁺濃度為25 mmol/L的培養(yǎng)基中培養(yǎng)24 h后,肌母細胞數(shù)量較常規(guī)培養(yǎng)基（5 mmol/L K⁺）明顯增加,但K⁺高至50 mmol/L和100 mmol/L時對細胞增殖沒有促進作用.通過流式細胞技術(shù)進行細胞周期分析顯示,25 mmol/L K⁺處理使G1期的細胞數(shù)量減少,S期的細胞數(shù)量增加.免疫熒光染色和Western blot研究發(fā)現(xiàn),25 mmol/L K⁺處理后,對肌母細胞的肌分化能力沒有影響.進一步研究發(fā)現(xiàn),25 mmol/L K⁺明顯促進了肌母細胞MAPK信號通路（ERK1/2）的激活,并與其促進細胞增殖的效應(yīng)相關(guān). MEK1/ERK1/2的兩種抑制劑U0126和PD98059均可減弱細胞膜去極化引起的細胞增殖促進效應(yīng).... 

【文章來源】：南京師大學(xué)報(自然科學(xué)版). 2020年01期 北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

細胞膜去極化處理不影響細胞的肌分化能力

常規(guī)細胞培養(yǎng)基中含K+濃度約為5 mmol/L,通常動物細胞內(nèi)K+濃度高于細胞外,K+外流以維持細胞的靜息膜電位. 而細胞外K+濃度高于5 mmol/L時,則K+外流被抑制,使細胞質(zhì)膜處于去極化狀態(tài). 文獻中通常以10 mmol/L～100 mmol/L K+處理形成細胞膜的去極化[9,16]. 本文以含K+濃度為5 mmol/L(對照組,CTR)、25 mmol/L、50 mmol/L和100 mmol/L的GM培養(yǎng)細胞,在培養(yǎng)后24 h和48 h后收集細胞計數(shù). 結(jié)果發(fā)現(xiàn)(圖1),24 h和48 h后,25 mmol/L K+濃度組細胞數(shù)量都明顯高于對照(24 h:10.5±1.02×104 vs 6.81±0.91×104,P<0.05;48 h:18±2.26×104 vs 13.1±2.8×104),與增殖比率(細胞增加的數(shù)量相對于接種時的細胞數(shù)量)的結(jié)果一致(24 h:1.42±0.18 vs 0.58±0.19,P<0.05;48 h:3.20±0.55 vs 2.03±0.62,P<0.05). 但當(dāng)K+濃度高至50 mmol/L和100 mmol/L時,對細胞生長無顯著促進作用,反被抑制,結(jié)果如圖1所示. 以上研究表明,細胞外高濃度K+形成的細胞膜去極化可明顯促進小鼠原代肌母細胞的增殖,但過高濃度的K+則顯示抑制作用.2.2 細胞膜去極化影響原代肌母細胞的周期

以上結(jié)果表明細胞膜去極化可促進細胞的增殖. 為了研究細胞膜去極化對于細胞增殖的調(diào)節(jié)特征,實驗用流式細胞技術(shù)進行了細胞周期測定. 結(jié)果發(fā)現(xiàn)(圖2),與對照相比,25 mmol/L K+培養(yǎng)基處理后G1期的細胞數(shù)量明顯降低(51±4.4% vs 61±1.2%,P<0.05),而S期的細胞數(shù)量則增加(40±6.3% vs 31±1.2%,P<0.05). 當(dāng)K+濃度高至50 mmol/L和100 mmol/L時,S期的細胞數(shù)量又是減少的,較對照組無顯著變化. 這一結(jié)果與以上細胞計數(shù)結(jié)果一致.2.3 細胞膜去極化處理不影響原代肌母細胞的肌分化能力


本文編號：2924689