目的建立MDCK細(xì)胞的主細(xì)胞庫(kù)及工作細(xì)胞庫(kù),并進(jìn)行檢定,同時(shí)評(píng)價(jià)其生物學(xué)特性。方法從歐洲細(xì)胞保藏中心(European Collection of Authenticated Cell Culture,ECACC)引進(jìn)1株MDCK細(xì)胞,經(jīng)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)后,分別建立主庫(kù)及工作細(xì)胞庫(kù)。按照《中國(guó)藥典》三部(2015版)規(guī)定的方法對(duì)細(xì)胞庫(kù)進(jìn)行細(xì)胞活力、細(xì)胞形態(tài)、無(wú)菌、支原體及細(xì)胞內(nèi)外源病毒因子檢查,并對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀況、傳代穩(wěn)定性、流感病毒敏感性進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果建立的MDCK細(xì)胞主種子庫(kù)及工作種子庫(kù)細(xì)胞形態(tài)呈不規(guī)則的上皮樣細(xì)胞狀,生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞活率分別為96. 0%和95. 5%,無(wú)菌、支原體及細(xì)胞內(nèi)外源病毒因子檢查結(jié)果均合格。MDCK細(xì)胞生長(zhǎng)曲線均呈S型,培養(yǎng)48～96 h進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,隨后進(jìn)入平臺(tái)期。連續(xù)傳10代48 h細(xì)胞活率在93. 0%～95. 5%之間,較穩(wěn)定。MDCK細(xì)胞對(duì)流感病毒較敏感,對(duì)B型流感病毒的敏感性高于A型流感病毒。結(jié)論建立的主細(xì)胞庫(kù)及工作細(xì)胞庫(kù)各項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果均符合《中國(guó)藥典》規(guī)定,具有良好的傳代穩(wěn)定性及流感病毒敏感性。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2020年04期

【文章頁(yè)數(shù)】：4 頁(yè)

【部分圖文】：

MDCK細(xì)胞形態(tài)的鏡下觀察（×10)

MDCK細(xì)胞及CCL-34細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線均呈S型，前期生長(zhǎng)速度較慢，0～48 h為細(xì)胞的停滯期，隨著細(xì)胞數(shù)的增多，48～96 h進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，隨后進(jìn)入平臺(tái)期，直至細(xì)胞密度降低為止。MDCK細(xì)胞于96 h后生長(zhǎng)速度加快，細(xì)胞密度高于CCL-34細(xì)胞。見(jiàn)圖2。2.3 MDCK細(xì)胞的傳代穩(wěn)定性

連續(xù)傳10代，48 h細(xì)胞活率在93.0%～95.5%之間，較穩(wěn)定；從P3代開(kāi)始，傳代過(guò)程中細(xì)胞密度處于較穩(wěn)定的范圍內(nèi)，表明細(xì)胞傳代過(guò)程中生長(zhǎng)較穩(wěn)定，見(jiàn)圖3。2.4 MDCK細(xì)胞對(duì)流感病毒的敏感性

【參考文獻(xiàn)】：
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