目的研究銅綠假單胞菌(Pa)重組外膜脂蛋白A(OmlA)抗原的免疫功能,并初步探討不同佐劑對(duì)其免疫效果的影響。方法將OmlA抗原分別與佐劑IL-17和氫氧化鋁進(jìn)行混合吸附。然后將OmlA抗原以及吸附好佐劑的OmlA抗原分別在0、2、4周時(shí)注射到4～5周齡C57BL/6小鼠的腹腔進(jìn)行免疫,同時(shí)設(shè)立IL-17、氫氧化鋁和PBS免疫組為對(duì)照。檢測(cè)免疫小鼠血清中IgA、IgM、IgG、IgG1以及IgG2a的水平。采用ELISA檢測(cè)免疫小鼠脾組織上清中Th1/Th17型細(xì)胞因子IFN-γ、IL-2以及Th2型細(xì)胞因子IL-4、IL-6的含量。采用MTT法檢測(cè)不同組小鼠脾細(xì)胞增殖的情況。最后一次免疫2周后使用致死量Pa鼻內(nèi)感染小鼠,10 d后檢測(cè)小鼠肺組織中Pa載量和統(tǒng)計(jì)小鼠死亡數(shù)量并計(jì)算各組小鼠的死亡率。結(jié)果 ELISA結(jié)果證明OmlA、OmlA-AH和OmlA-IL-17組免疫小鼠血清中IgA、IgM、IgG以及IgG亞類(IgG1和IgG2a)的含量明顯比各對(duì)照組高。OmlA-AH組中IgG2a/IgG1的比值小于1,且AH能提高脾組織中IL-4和IL-6的量,但I(xiàn)FN-γ和IL-2水平不變。OmlA-IL-17組中IgG2a/IgG1的比值大于1,且IL-17能提高小鼠脾細(xì)胞中IFN-γ和IL-2的量,但不影響IL-4、IL-6的表達(dá)。AH和IL-17能增強(qiáng)OlmA刺激導(dǎo)致的淋巴細(xì)胞增值。與對(duì)照組相比OmlA、OmlA-AH和OmlA-IL-17組能夠減少小鼠肺組織中Pa載量和小鼠死亡率。結(jié)論 Pa OmlA蛋白具有良好的免疫保護(hù)作用,且AH和IL-17能夠增強(qiáng)其免疫效果。
【部分圖文】：

脾組織上清中IL-4和IL-6的水平

小鼠肺組織的Pa載量

為進(jìn)一步確定OmlA蛋白以及加入AH和IL-17佐劑后誘導(dǎo)體液免疫應(yīng)答的情況，進(jìn)一步測(cè)定小鼠血清中IgG亞類IgG1和IgG2a的含量。測(cè)定結(jié)果（圖2）發(fā)現(xiàn)AH和IL-17都能夠有效增強(qiáng)OmlA蛋白的免疫原性，小鼠免疫血清中IgG1和IgG2a的含量都高于OmlA組，OmlA-AH組中IgG2a/IgG1的比值小于1,OmlA-IL-17組中IgG2a/IgG1的值大于1。通常情況下IgG1參與Th1型應(yīng)答，IgG2a是誘導(dǎo)Th2型應(yīng)答，故提示AH佐劑誘導(dǎo)OmlA蛋白產(chǎn)生Th2型應(yīng)答，但是IL-17可能增強(qiáng)Th1型應(yīng)答。圖2 免疫血清中IgG1和IgG2a的水平
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本文編號(hào)：2880833