目的:探討腸道與肺中固有淋巴細(xì)胞2(innate lymphoid cell2,ILC2)的不同免疫反應(yīng)特性。方法 :使用real-time PCR檢測腸道和肺中ILC2細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子及細(xì)胞因子的表達(dá);EdU方法檢測腸道和肺中ILC2細(xì)胞對不同細(xì)胞因子刺激的增殖反應(yīng);觀察Notch信號抑制劑GSI對腸道和肺中ILC2細(xì)胞體外增殖的影響。結(jié)果:與肺ILC2細(xì)胞相比,腸道ILC2細(xì)胞IL-13、IL-17、IFN-γ及IL-25受體IL17RB表達(dá)顯著升高,而IL-5、IL-33受體IL1RL1顯著降低。IL-25能顯著提高腸道ILC2體外增殖能力;GSI抑制Notch信號后顯著降低IL-25促進(jìn)腸道ILC2體外增殖能力。結(jié)論:腸道與肺中ILC2表達(dá)不同的細(xì)胞因子,依賴于IL-25的腸道ILC2增殖能力受Notch信號影響。
【部分圖文】：

腸ILC2細(xì)胞與肺ILC2細(xì)胞相比，IL-13 mRNA(3.47±0.73 vs 0.97±0.17）及IFN-γmRNA(2.45±0.74 vs1.08±0.25）表達(dá)顯著升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05);IL-17 mRNA(1.46±0.90）在腸ILC2中高表達(dá)而在肺ILC2中不表達(dá)，但I(xiàn)L-5 mRNA(0.38±0.12 vs0.98±0.17）表達(dá)顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；腸ILC2轉(zhuǎn)錄因子GATA3 mRNA表達(dá)量升高（1.19±0.23），但與肺ILC2(0.98±0.17）的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見圖1。以上結(jié)果提示腸和肺中ILC2表達(dá)的細(xì)胞因子和轉(zhuǎn)錄因子差異巨大。2.2 IL-25對腸和肺ILC2細(xì)胞體外增殖及活化的影響

EdU檢測結(jié)果顯示，腸ILC2在IL-25刺激下，與肺相比，體外增殖提高約8倍（43.50±14.89 vs5.47±2.17），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（圖2A);IL-25刺激后腸ILC2 IL-5 mRNA(3.20±0.91）和IL-13 mRNA(15.88±8.28）表達(dá)水平分別顯著高于肺ILC2(1.00±0.26）、（0.82±0.10），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（圖2B）。以上結(jié)果提示IL-25可以促進(jìn)腸ILC2的活化和增殖。2.3 腸和肺ILC2 IL-25受體表達(dá)及IL-25對ILC2體內(nèi)增殖的影響

腸ILC2與肺ILC2細(xì)胞相比，IL17RB(IL-25受體）mRNA(85.25±22.16 vs 1.43±0.17）表達(dá)水平顯著升高，而傳統(tǒng)ILC2活化IL1RL1(IL-33受體）mRNA(0.02±0.01 vs1.07±0.18）表達(dá)水平顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（圖3A）。分別用IL-33(500 ng/d）、IL-25(500 ng/d）腹腔注射C57BL/6小鼠3天后，EdU檢測結(jié)果顯示，IL-25刺激后腸內(nèi)ILC2細(xì)胞增殖顯著增加，而IL-33刺激后肺中ILC2細(xì)胞增殖顯著增加，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（圖3B）。以上結(jié)果提示腸ILC2高表達(dá)IL-25受體IL17RB，而肺ILC2高表達(dá)IL-33受體IL1RL1，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)IL-25是腸ILC2增殖和活化的刺激劑。2.4 Notch信號對IL-25介導(dǎo)的腸ILC2體外增殖的影響
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