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電針脊髓損傷模型大鼠“足三里”與“伏兔”穴神經(jīng)細胞凋亡因子Caspase-3的表達

發(fā)布時間:2020-10-30 11:19
   背景:中醫(yī)自《內(nèi)經(jīng)》開始就提出了"治痿獨取陽明"之理論,但是有關(guān)電針干預(yù)足陽明胃經(jīng)治療脊髓損傷的報道相對較少。目的:探討電針刺激"足三里""伏兔"穴對脊髓損傷大鼠受損節(jié)段Caspase-3表達的影響。方法:將64只SPF級SD雌性大鼠隨機分為4組,即對照組、預(yù)標記組、損傷后標記組和電針干預(yù)組,每組16只。對照組及預(yù)標記在操作前給予Brdu(50mg/kg)連續(xù)10d腹腔注射標記細胞,對照組于第11天給予咬除椎板,并不損傷脊髓,預(yù)標記組第11天給予制作脊髓損傷模型;損傷后標記組及電針組在制作脊髓損傷后連續(xù)10 d腹腔注射Brdu標記細胞,其中損傷后標記組不給予干預(yù)措施,電針組造模后第3天開始針刺足三里、伏兔穴。各組分別于損傷后3,10,17,24 d取脊髓組織,運用蘇木精-伊紅染色觀察神經(jīng)元數(shù)量的變化;免疫組織化學(xué)染色觀察Brdu陽性細胞表達;q RT-PCR技術(shù)檢測Caspase-3mRNA的變化;Western blot檢測Caspase-3蛋白表達的變化。實驗方案經(jīng)廣西醫(yī)科大學(xué)動物實驗倫理委員會批準(批準號201712001)。結(jié)果與結(jié)論:①脊髓損傷以后Caspase-3的mRNA及蛋白表達均高于脊髓沒有受到損傷的對照組,脊髓損傷后神經(jīng)元的數(shù)量明顯較對照組少;隨著時間的推移,預(yù)標記組、損傷后標記組及電針干預(yù)組Caspase-3mRNA及蛋白表達先升高后降低,而電針組的Caspase-3表達明顯減少,與預(yù)標記組及損傷后標記組比較差異有顯著性意義(P0.05);②蘇木精-伊紅染色顯示隨著時間的推移電針組的神經(jīng)元數(shù)量明顯比未經(jīng)干預(yù)的預(yù)標記組、損傷后標記組高,在第24天時逐漸接近對照組的神經(jīng)元數(shù)量;③免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示電針組陽性蛋白表達呈先升高后降低的趨勢,17 d升至最高,24 d降至最低,整體陽性蛋白表達高于其他組(P 0.05);④結(jié)果說明,電針刺激"足三里""伏兔"穴可以減少Caspase-3 mRNA及蛋白表達,減少神經(jīng)細胞的凋亡,同時可以促進神經(jīng)元數(shù)量的增加,從而促進神經(jīng)細胞的再生修復(fù)。
【部分圖文】:

形態(tài)圖,脊髓,蘇木,伊紅


總之,電針刺激“足三里”與“伏兔”穴可以通過降低Caspase-3的m RNA及蛋白的表達,抑制細胞凋亡加速脊髓神經(jīng)元的神經(jīng)功能康復(fù)的機制已然明了,但是電針刺激“足三里”與“伏兔”如何來調(diào)控Caspase-3的表達的生理病理機制目前尚未分明,這也是該課題組下一步的研究計劃。圖2 各組大鼠脊髓組織Brdu蛋白的表達(免疫組織化學(xué)染色,×400)

脊髓,組織化學(xué),蛋白,脊髓損傷


各組大鼠脊髓組織Brdu蛋白的表達(免疫組織化學(xué)染色,×400)

脊髓損傷,蛋白,部位,組織化學(xué)


各組大鼠脊髓損傷部位Caspase3的mRNA及蛋白表達
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10 殷先君;電針對大鼠急性脊髓損傷Caspase-3表達的影響[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2009年



本文編號:2862399

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