正骨髓組織富含鈣鹽,故制片前需要脫鈣處理,脫鈣不全或脫鈣過(guò)度均可影響骨髓組織切片的H-E染色或免疫組織化學(xué)染色效果,降低病理診斷的準(zhǔn)確率。筆者前期配制了一種適合骨髓組織脫鈣的改良EDTA脫鈣液,可在24h內(nèi)使骨髓組織脫鈣完全,有利于提高骨髓疾病診斷的準(zhǔn)確性[1]。為提高工作效率,同時(shí)避免人工操作誤差,使脫鈣過(guò)程穩(wěn)定,本研究嘗試將MYR SS-30全自動(dòng)染色機(jī)改造應(yīng)用于骨髓組織的EDTA脫鈣處理中,并探討最佳的EDTA脫鈣程序和脫鈣時(shí)間,以便使后期臨床工作流程標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化。
【部分圖文】：

改造前后染色架

切片行常規(guī)H-E染色,免疫組織化學(xué)染色采用EnVision兩步法。由兩名高級(jí)職稱(chēng)病理醫(yī)師閱片判定H-E染色及免疫組織化學(xué)染色效果。表1 MYR SS-30染色機(jī)脫鈣程序(16 h)Tab 1 Decalcification procedure of MYR SS-30 staining machine (16 h) 步驟 缸位 試劑 時(shí)間(min∶s) 抖動(dòng)(s) 上下震蕩(次) 1 1,2 10%中性福爾馬林(裝載) 30∶00(×2) 1(×2) 10(×2) 2 3,4 蒸餾水 30∶00(×2) 1(×2) 10(×2) 3 5 EDTA 59∶59 1 10 4 10 空白缸 00∶01 0 0 5 5,6 EDTA 59∶59(×2) 1(×2) 10(×2) 6 10 空白缸 00∶01 0 0 7 6,7 EDTA 59∶59(×2) 1(×2) 10(×2) 8 10 空白缸 00∶01 0 0 9 7,8 EDTA 59∶59(×2) 1(×2) 10(×2) 10 10 空白缸 00∶01 0 0 11 8,9 EDTA 59∶59(×2) 1(×2) 10(×2) 12 10 空白缸 00∶01 0 0 13 9,11 EDTA 59∶59(×2) 1(×2) 10(×2) 14 10 空白缸 00∶01 0 0 15 11,12 EDTA 59∶59(×2) 1(×2) 10(×2) 16 10 空白缸 00∶01 0 0 17 12,13 EDTA 59∶59(×2) 1(×2) 10(×2) 18 10 空白缸 00∶01 0 0 19 13 EDTA 59∶59 1 10 20 14 蒸餾水 15∶00 1 10 21 15,16 70%酒精(卸載) 00∶01 0 0

經(jīng)手工EDTA脫鈣及全自動(dòng)染色機(jī)EDTA脫鈣骨髓組織免疫組織化學(xué)染色陽(yáng)性定位準(zhǔn)確(圖4);經(jīng)手工EDTA脫鈣與全自動(dòng)染色機(jī)EDTA脫鈣時(shí)間分別為16,18,20及22 h骨髓組織相比,Kappa,Ki-67,Lambda和MPO 4個(gè)抗體表達(dá)陽(yáng)性率差別均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05,表2);經(jīng)全自動(dòng)染色機(jī)EDTA不同脫鈣時(shí)間骨髓組織在上述指標(biāo)免疫組織化學(xué)表達(dá)差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05,表3)。表2 不同脫鈣處理骨髓免疫組織化學(xué)染色Tab 2 Immunohistochemical expression under different decalcification procedures 染色機(jī)EDTA脫鈣(16 h) 手工EDTA脫鈣 高表達(dá) 低表達(dá) Kappa 高表達(dá) 25 4 低表達(dá) 1 0 Ki-67 高表達(dá) 25 3 低表達(dá) 1 1 Lambda 高表達(dá) 25 1 低表達(dá) 0 4 MPO 高表達(dá) 27 1 低表達(dá) 0 2
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1 傅春燕,陳晨,周慶,沈明;介紹一種骨髓組織脫鈣新方法[J];臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志;2003年06期

2 夏勤;夏娟;李林豐;劉智;羅啟翅;梁海橋;;介紹一種簡(jiǎn)易快速的骨髓組織脫鈣法[J];實(shí)用醫(yī)技雜志;2013年02期

本文編號(hào)：2850858