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阿加曲班對(duì)MCAO大鼠不同時(shí)間點(diǎn)血小板功能的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-10-21 23:45
   建立大腦中動(dòng)脈閉塞(model of middle cerebral artery occlusion, MCAO)大鼠模型,研究阿加曲班對(duì)大鼠不同時(shí)間腦缺血再灌注損傷血小板功能的影響。將120只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham)、模型組(Model)和阿加曲班給藥組(Argatroban),其中Argatroban組分為4組:Argatroban+30 min組、Argatroban+1 h組、Argatroban+3 h組和Argatroban+7 h組,Sham組和Model組40只,其余各組每組10只。線栓法制備大鼠MCAO模型,術(shù)中輸注Argatroban,劑量為0.3μg·kg-1·min-1,完成手術(shù)前5 min停止輸注。手術(shù)完成后,Sham組和Model組分別于術(shù)后30 min、1 h、3 h和7 h處死10只取樣;Argatroban給藥組5個(gè)時(shí)間點(diǎn)處死取樣。檢測(cè)大鼠血漿血細(xì)胞數(shù)量,并計(jì)數(shù)骨髓有核細(xì)胞數(shù)的變化。采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)血小板-白細(xì)胞聚集體(platelet-leukocyte aggregates, PLA)表達(dá)水平,觀察活化部分凝血活酶時(shí)間(activated partial thromboplastin time, APTT)、血小板計(jì)數(shù)變化,ELISA檢測(cè)血漿D-二聚體和TAT。結(jié)果顯示,與Sham組相比,Model組大鼠的紅細(xì)胞(RBC)、白細(xì)胞(WBC)、血紅蛋白含量(HGB)和中性粒細(xì)胞(GR)數(shù)都顯著升高(p0.05),且與給藥組沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。Sham組、Model組和Argatroban給藥組的骨髓有核細(xì)胞數(shù)也沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。與Sham組相比,Model組PLA表達(dá)水平極顯著升高(p0.01),Argatroban+30 min組PLA表達(dá)水平卻低于Sham組,但沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,Argatroban+1 h組高于Sham組和Argatroban+30 min組(p0.05),Argatroban+3 h組和Argatroban+7 h組高于Argatroban+1 h組低于Sham組。術(shù)后各組的血小板計(jì)數(shù)均高于Sham組(p0.05),Argatroban各組的血小板計(jì)數(shù)要低于Model組(p0.05),并在30 min時(shí)達(dá)到最低,30 min以后血小板升高,但是1 h以后血小板不再升高,趨于穩(wěn)定。Argatroban各組PT和APTT雖略有降低,但是與Sham組和Model組并沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。造模后各組TAT、D-二聚體水平顯著升高,Argatroban各組TAT水平較模型組明顯降低(p0.05),Argatroban+30 min組水平最低。MCAO模型大鼠血液呈現(xiàn)高凝狀態(tài),凝血功能和纖維蛋白溶解功能亢進(jìn),血小板活化增強(qiáng),阿加曲班可對(duì)此起到改善作用。
【部分圖文】:

骨髓,細(xì)胞,血小板,觀測(cè)時(shí)間


Model組的PLA表達(dá)水平與Sham比較顯著升高(p>0.05),而Argatroban給藥組的PLA表達(dá)水平顯著性降低(p<0.05),其中Argatroban+1 h組PLA的表達(dá)水平顯著性低于其它Argatroban給藥組。Argatroban+3 h組和Argatroban+7 h組PLA表達(dá)水平?jīng)]有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(各組均取10只大鼠)(圖2)。1.3 各組大鼠血漿APTT觀測(cè)時(shí)間和血小板計(jì)數(shù)結(jié)果比較

血漿,時(shí)間點(diǎn),血小板,統(tǒng)計(jì)學(xué)


各組大鼠血漿APTT分別觀測(cè)30 min、1 h、3 h和7 h時(shí)ATPP值和血小板計(jì)數(shù)。從結(jié)果中可以看出Sham組的血小板計(jì)數(shù)為(430±69.3),而ATPP值為(32.71±9.31),它們之間并沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(圖3)。同理,Model、Argatroban+30 min、Argatroban+1 h、Argatroban+3 h和Argatroban+7 h均沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(各組均取10只大鼠)。1.4 各組大鼠血漿TAT及D-二聚體含量

血漿,二聚體,血小板,觀測(cè)時(shí)間


對(duì)各組大鼠血漿TAT及D-二聚體含量的測(cè)量結(jié)果表明(表2),與Sham組相比,Model組及各Argatroban給藥組血漿TAT及D-二聚體含量水平均顯著升高,表明差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);與Mode組相比,Argatroban給藥組血漿TAT量水平均降低(p<0.05),但Model組與Argatroban+3 h組和Argatroban+7 h組D-二聚體含量沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;各給藥組之間TAT比較,Argatroban+1 h組的TAT含量最低(p<0.05),而Argatroban+3 h組和Argatroban+7 h組之間TAT含量沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,1 h后大鼠血漿TAT含量開(kāi)始升高,Argatroban+3 h組和Argatroban+7 h組TAT含量明顯高于Argatroban+30 min組。各給藥組之間D-二聚體比較,Argatroban+30 min組和Argatroban+1 h組D-二聚體含量最低(p<0.05),但這兩組之間沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,Argatroban+3 h組和Argatroban+7 h組D-二聚體含量也沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,但是高于Argatroban+30 min組和Argatroban+1 h組(p<0.05)(表2)。2 討論
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