目的探討線粒體融合蛋白2(Mfn2)在氯化錳(MnCl2)誘導(dǎo)的耳蝸毛細胞(HE1-OC1)氧化應(yīng)激、增殖和凋亡中的作用機制。方法采用不同濃度(0、1、3、5、10μmol/L)的MnCl2染毒培養(yǎng)的HEI-OC1細胞,建立錳中毒細胞模型;MnCl2染毒培養(yǎng)HEI-OC1細胞同時加入抗氧化劑N-乙酰半胱氨酸(NAC)或si-Mfn2干擾細胞中Mfn2蛋白表達,甲基噻唑基四唑(MTT)法檢測細胞增殖;Western blot檢測細胞中總Caspase-3、總Caspase-9、Mfn2蛋白表達水平;流式檢測細胞中活性氧(ROS)、細胞凋亡。結(jié)果與0μmol/L MnCl2組比較,3、5、10μmol/L MnCl2染毒培養(yǎng)顯著抑制HEI-OC1細胞的增殖、促進細胞中活性氧的產(chǎn)生、總Caspase-3、總Caspase-9、Mfn2蛋白表達以及細胞凋亡,并呈劑量依賴性。與5μmol/L MnCl2染毒培養(yǎng)組比較,干擾Mfn2表達組和NAC處理組細胞的增殖能力顯著增強,而細胞中活性氧的含量,總Caspase-3、總Caspase-9蛋白表達水平以及細胞凋亡比例均顯著下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論干擾Mfn2蛋白表達可以減輕MnCl2對HEI-OC1細胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激、細胞增殖抑制以及凋亡促進作用。
【部分圖文】：

與0μmol/L MnCl2組比較，1μmol/L MnCl2染毒培養(yǎng)組HEI-OC1細胞中總Caspase-3、總Caspase-9、Mfn2蛋白相對表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；而3、5、10μmol/L MnCl2染毒培養(yǎng)組HEI-OC1細胞中總Caspase-3、總Caspase-9、Mfn2蛋白相對表達均顯著增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），并呈劑量依賴性，MnCl2濃度越高，蛋白相對表達增加越顯著，見圖3。圖2 不同濃度的MnCl2對HEI-OC1細胞中ROS相對含量的影響

不同濃度的MnCl2對HEI-OC1細胞中ROS相對含量的影響

上述實驗結(jié)果表明，5μmol/L MnCl2可以顯著抑制HEI-OC1細胞增殖，促進細胞中活性氧的產(chǎn)生以及Mfn2蛋白相對表達。因此，選用5μmol/L進行后續(xù)實驗。與5μmol/L MnCl2染毒培養(yǎng)組比較，培養(yǎng)48、72 h后，MnCl2+si-Mfn2組和MnCl2+NAC組細胞增殖能力顯著增強，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；但MnCl2+siMfn2組細胞增殖能力仍低于MnCl2+NAC組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見圖5。2.6 干擾Mfn2蛋白表達和NAC處理對MnCl2染毒培養(yǎng)的HEI-OC1細胞中ROS相對含量的影響
【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李美如，劉鴻先，王以柔;細胞氧化應(yīng)激機制與植物抗冷性機理的研究[J];生命科學(xué);1996年04期

2 夏滬彬;陳超;李輝;張運超;王平;莊金龍;安澈;魯軍;;磷酸三(1,3-二氯-2-丙基)酯對L-02肝細胞氧化應(yīng)激及凋亡損傷機制[J];生態(tài)毒理學(xué)報;2018年05期

3 吳希美;一氧化氮與肝細胞氧化應(yīng)激[J];國外醫(yī)學(xué)(生理、病理科學(xué)與臨床分冊);1997年03期

4 于孟飛;王文璐;易建明;;siRNA沉默DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶1基因干擾胎牛成纖維細胞增殖和凋亡（英文）[J];中南民族大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2018年02期

5 唐曦灜;;神經(jīng)細胞氧化應(yīng)激檢測方法的研究進展[J];科技展望;2016年35期

6 薛麗君,金中初;真核細胞氧化應(yīng)激及其適應(yīng)機制[J];國外醫(yī)學(xué)(衛(wèi)生學(xué)分冊);1997年04期

7 宋小英;景鵬偉;熊麗溶;賈道勇;王亞平;王璐;;骨髓基質(zhì)細胞衰老對造血細胞氧化應(yīng)激的影響[J];解剖學(xué)報;2015年06期

8 陳小琳;徐焱成;蔡小莉;雷幼蓉;;Mfn2基因shRNA質(zhì)粒的構(gòu)建及其流體力學(xué)轉(zhuǎn)染技術(shù)的實驗研究[J];生物醫(yī)學(xué)工程研究;2009年02期

9 陳瑗，周玫;氧化應(yīng)激與原核基因表達的調(diào)控[J];生命的化學(xué)(中國生物化學(xué)會通訊);1994年06期

10 侯美伊;桑楠;;NO_2吸入暴露對大鼠心肌線粒體融合蛋白Mfn1和Mfn2表達的影響[J];山西大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2015年01期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前4條

1 肖軍;氧化應(yīng)激通過親環(huán)蛋白A促進人巨細胞病毒復(fù)制的研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2016年

2 王若曦;OGG1在氧化應(yīng)激引起的細胞死亡中的作用及機制研究[D];東北師范大學(xué);2018年

3 鐘嘉泳;大腸桿菌快速適應(yīng)氧化應(yīng)激中tRNA介導(dǎo)的翻譯調(diào)控機制研究[D];暨南大學(xué);2018年

4 黃玉軍;緩解氧化應(yīng)激Lactobacillus fermentum L8的篩選及益生機制研究[D];揚州大學(xué);2016年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 時穎;七鰓鰻PHB2增強細胞氧化應(yīng)激耐受性的機制研究[D];遼寧師范大學(xué);2018年

2 韓雪琳;熱休克蛋白90在HepG2細胞氧化應(yīng)激與適應(yīng)中的作用研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2006年

3 陳西銳;小鼠Mfn2基因在卵母細胞成熟過程中的作用研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

4 張夢可;黑曲霉cpeB和catA基因?qū)ρ趸瘧?yīng)激和果實致病性的調(diào)控機制研究[D];合肥工業(yè)大學(xué);2019年

5 文茂羽;BmFoxO在家蠶（Bombyx mori）應(yīng)對高溫脅迫損傷中的功能研究[D];西南大學(xué);2019年

6 李永保;鐵蛋白在維持家蠅氧化還原平衡中的作用[D];河北大學(xué);2019年

7 羅新;基于氧化應(yīng)激探討Omi/HtrA2對大腦皮質(zhì)的作用[D];吉林大學(xué);2018年

8 趙健翔;MarvelD1敲除型小鼠氧化應(yīng)激狀態(tài)下的血清代謝組學(xué)研究[D];哈爾濱工業(yè)大學(xué);2018年

9 黃道奇;衰老小鼠睪丸睪酮合成功能障礙的機制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2017年

10 秦富;PP2A甲基化調(diào)控在細胞氧化應(yīng)激中的作用研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2016年

本文編號：2850958