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酒精灼燒致青腳麻雞股骨頭壞死造模方法的可行性分析

發(fā)布時(shí)間:2020-10-21 14:51
   背景:目前股骨頭壞死的病理機(jī)制尚不明確,且當(dāng)前的股骨頭壞死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型均有其不足之處。目的:使用青腳麻雞建立一個(gè)簡單、可靠、穩(wěn)定并接近人體生物力學(xué)特征的股骨頭壞死的動(dòng)物模型。方法:成年青腳麻雞24只,隨機(jī)平均分成實(shí)驗(yàn)組和對照組。對青腳麻雞任意選擇一側(cè)股骨頭進(jìn)行中心鉆孔,其中實(shí)驗(yàn)組使用乙醇灼燒鉆孔內(nèi)骨組織后將原骨植入;對照組鉆孔后直接將原骨植入;其對側(cè)為未處理組不作手術(shù)處理。術(shù)后1個(gè)月行X射線檢查和CT掃描檢查,隨后取股骨頭進(jìn)行大體觀察,顯微CT觀察及病理切片染色觀察。實(shí)驗(yàn)方案經(jīng)徐州醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(批準(zhǔn)號(hào)為AEC2018-020)。結(jié)果與結(jié)論:(1)所有青腳麻雞均未出現(xiàn)異常死亡,術(shù)后1-3 d均能直立行走,無明顯跛行;(2)X射線和CT顯示實(shí)驗(yàn)組股骨頭骨小梁不清晰且股骨頭有塌陷,大體標(biāo)本可見實(shí)驗(yàn)組股骨頭表面不光滑且有股骨頭塌陷,(3)microC T顯示與對照組和未處理組相比,造模后實(shí)驗(yàn)組的骨小梁增粗,骨小梁數(shù)量減少,骨小梁間距增加,骨體積分?jǐn)?shù)增加,差異均有顯著性意義(P 0.05);(4)病理切片染色顯示對照組和未處理組形態(tài)接近,未有明顯壞死征,但對照組軟骨下血管數(shù)量較少,而實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞排列紊亂,可見空骨陷窩等明顯壞死征象;(5)結(jié)果說明,使用乙醇灼燒青腳麻雞股骨頭內(nèi)骨組織可以用于建立典型股骨頭壞死的動(dòng)物模型,與人的股骨頭壞死的病理特征接近。
【部分圖文】:

過程圖,股骨頭壞死,麻雞,過程


目前已有學(xué)者使用其他動(dòng)物建立了股骨頭壞死的模型,但均有優(yōu)缺點(diǎn)。OKAZAKI等[14]通過給雄性Wistar大鼠喂食含有體積分?jǐn)?shù)5%乙醇的液體飲食模擬人酗酒的行為,僅在1周后便有部分大鼠出現(xiàn)了股骨頭壞死,該方法雖然可以在一定程度上模擬人酗酒狀態(tài)下股骨頭的病理生理進(jìn)程,但壞死率不高,且均為早期骨壞死表現(xiàn),不適用于晚期股骨頭壞死的研究[15]。陳東等[10]使用骨穿針套管將無水乙醇注入到新西蘭兔的股骨頭中心,6周時(shí)出現(xiàn)了關(guān)節(jié)面塌陷,新月體形成,成功建立了兔股骨頭壞死的模型,然而由于新西蘭兔長期處于蹲臥位,日常下肢基本不負(fù)重,這與人類下肢的負(fù)重情況差距甚大。ZHU等[16]直接將無水乙醇注入到山羊的雙側(cè)股骨頭中央,并在25周時(shí)觀察到了明顯的股骨頭破壞征象,成功誘導(dǎo)了山羊股骨頭壞死模型。MOTOMURA等[17]同樣將無水乙醇注入綿羊股骨頭中心,最終羊股骨頭中心出現(xiàn)了壞死。WANG等[18]使用同樣方法對成年犬股骨頭中心注射無水乙醇成功建立犬的股骨頭壞死模型。ZHU,MOTOMURA和WANG由于實(shí)驗(yàn)本身的操作限制,因此這3位學(xué)者均選擇大型哺乳類動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn),但是這些哺乳動(dòng)物均屬于四足負(fù)重的動(dòng)物,與人類的生物力學(xué)特征不相符,無法完全模擬人類股骨頭壞死后在雙足負(fù)重狀態(tài)下的股骨頭壞死和修復(fù)情況。范猛等[19]對成年鴯鹋股骨頭中心局部注射無水乙醇并成功觀察到骨壞死和骨修復(fù)反應(yīng),鴯鹋為雙足負(fù)重動(dòng)物,符合人類的生物力學(xué)特性,且該實(shí)驗(yàn)結(jié)果符合預(yù)期。但是鴯鹋體積大,價(jià)格貴,飼養(yǎng)要求高等[20],無法滿足大多數(shù)科研的需求。圖3 造模后青腳麻雞一般情況

技術(shù)路線圖,技術(shù)路線,方法,筋脈


技術(shù)路線見圖1。造模前8 h禁飲禁食,造模開始前完全隨機(jī)挑選1只青腳麻雞,稱質(zhì)量并記錄,將雞固定好后從其一側(cè)的翅根筋脈緩慢注射3%的戊巴比妥鈉誘導(dǎo)麻醉(圖2A),麻藥量為(體質(zhì)量×1.2)mL,可視麻醉效果適當(dāng)增減,當(dāng)用鑷子夾持一側(cè)跖骨墊而雞無明顯抵抗反應(yīng)時(shí)則表明麻醉成功。此時(shí)隨機(jī)選取一側(cè)作為手術(shù)側(cè),將雞擺成側(cè)臥位且手術(shù)側(cè)朝上,將手術(shù)側(cè)髖部股骨頭中心周圍5 cm范圍內(nèi)進(jìn)行脫毛和備皮處理。

麻雞,股骨頭壞死,情況,過程圖


造模后青腳麻雞一般情況
【參考文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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