【背景】隨著西尼羅熱在全球范圍內(nèi)廣泛流行,西尼羅熱傳入我國(guó)的風(fēng)險(xiǎn)加大。研究西尼羅病毒的快速檢測(cè)方法,為西尼羅病毒檢測(cè)建立方法儲(chǔ)備�！灸康摹拷⑽髂崃_病毒逆轉(zhuǎn)錄重組酶介導(dǎo)擴(kuò)增(reverse transcription recombinase aided amplification,RT-RAA)檢測(cè)方法�！痉椒ā扛鶕�(jù)西尼羅病毒基因保守區(qū)序列設(shè)計(jì)引物和探針,建立西尼羅病毒RT-RAA檢測(cè)方法,并評(píng)價(jià)該方法的重復(fù)性、特異性和靈敏度�！窘Y(jié)果】RT-RAA方法的整個(gè)擴(kuò)增反應(yīng)過(guò)程溫度恒定,反應(yīng)溫度為39°C,檢測(cè)時(shí)間較短(20 min內(nèi)),并且檢測(cè)限可達(dá)10 copies,與基孔肯雅病毒、登革病毒、乙型腦炎病毒、黃熱病毒等蚊媒病毒無(wú)交叉反應(yīng),具有良好的特異性,樣本檢測(cè)符合預(yù)期�！窘Y(jié)論】建立的西尼羅病毒RT-RAA方法具有快速、特異以及靈敏的特點(diǎn),可用于西尼羅病毒的口岸快速檢測(cè)和流行病學(xué)監(jiān)測(cè)。
【部分圖文】：

西尼羅病毒RT-RAA重復(fù)性試驗(yàn)

CAP提供的西尼羅病毒滅活樣本(20例出入境體檢陰性血清樣本和14例入境口岸發(fā)熱人員血清樣本)采用本研究建立的西尼羅病毒RT-RAA檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)圖4。可見(jiàn)CAP提供的樣本可用本方法擴(kuò)增，檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性；20例出入境體檢血清樣本均為陰性，符合實(shí)驗(yàn)預(yù)期；14例入境口岸發(fā)熱人員血清樣本檢測(cè)結(jié)果也為陰性。3 討論與結(jié)論

配制好3管相同濃度(1.0×105 copies/μL)的西尼羅病毒質(zhì)粒DNA和1管陰性對(duì)照放入恒溫核酸擴(kuò)增檢測(cè)儀中進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果如圖3所示。結(jié)果顯示擴(kuò)增反應(yīng)起峰時(shí)間一致，曲線形態(tài)接近，具有良好的重復(fù)性。圖2 西尼羅病毒RT-RAA敏感性試驗(yàn)
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前8條

1 鄭小龍;朱來(lái)華;王群;孫濤;孫明君;鄧明俊;張曉文;;西尼羅病毒病診斷技術(shù)研究進(jìn)展[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2014年03期

2 余蓓蓓;盧亦愚;謝鑫友;徐昌平;張鈞;;雙重?zé)晒舛縋CR檢測(cè)西尼羅病毒和基孔肯雅病毒[J];臨床檢驗(yàn)雜志;2013年06期

3 邱璐;李小林;蔣靜;王艷;周小俊;;實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)西尼羅病毒方法的建立[J];畜牧與獸醫(yī);2012年09期

4 呂喆;于亞洲;胡桂學(xué);趙哲;;西尼羅河病毒病的研究進(jìn)展[J];經(jīng)濟(jì)動(dòng)物學(xué)報(bào);2012年01期

5 呂蓓;程海榮;嚴(yán)慶豐;黃震巨;李軼女;羅達(dá);沈桂芳;張志芳;鄧子新;林敏;程奇;;體外核酸快速擴(kuò)增技術(shù)的發(fā)展和不斷創(chuàng)新[J];中國(guó)生物工程雜志;2011年03期

6 呂蓓;程海榮;嚴(yán)慶豐;黃震巨;沈桂芳;張志芳;李軼女;鄧子新;林敏;程奇;;用重組酶介導(dǎo)擴(kuò)增技術(shù)快速擴(kuò)增核酸[J];中國(guó)科學(xué):生命科學(xué);2010年10期

7 李淑華;鹿文英;曹廣文;;利用環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)檢測(cè)西尼羅病毒[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2010年06期

8 宋捷;唐泰山;田玲玲;張常印;雷治海;孫旭輝;陳國(guó)強(qiáng);趙建;王凱民;姜焱;;西尼羅病毒套式RT-PCR檢測(cè)方法的建立[J];中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào);2008年12期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 鄭文斌;吳耀東;馬劍鋼;朱興全;周東輝;;重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)及其在寄生蟲(chóng)檢測(cè)中的應(yīng)用[J];中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志;2015年05期

2 吳忠華;羅鵬;呂沁風(fēng);鄭偉;;多重實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR法快速檢測(cè)3種蚊媒病毒[J];中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志;2015年12期

3 吳忠華;秦秀英;羅鵬;;基孔肯雅病毒檢測(cè)方法及進(jìn)展[J];生物技術(shù)通訊;2014年06期

4 張海冰;段曉冬;沈丹;鄭麗蘭;楊穗娟;譚諾;張海明;;廣東從化無(wú)規(guī)定馬屬動(dòng)物疫病區(qū)野鳥(niǎo)和蚊子分布及其西尼羅病毒感染情況調(diào)查[J];中國(guó)動(dòng)物檢疫;2014年11期

5 王玉春;邵強(qiáng);張麗萍;甄維;吳學(xué)敏;馬雪征;趙勇;胡孔新;;利用入境人員血清盤(pán)評(píng)價(jià)西尼羅病毒IgG抗體檢測(cè)試劑盒[J];病毒學(xué)報(bào);2014年05期

6 趙學(xué)峰;王格;周萬(wàn)軍;;四重TaqMan實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)α地中海貧血——~(SEA)、—α~(3.7)和—α~(4.2)缺失[J];臨床檢驗(yàn)雜志;2014年06期

7 鄭小龍;朱來(lái)華;王群;孫濤;孫明君;鄧明俊;張曉文;;西尼羅病毒病診斷技術(shù)研究進(jìn)展[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2014年03期

8 龔甜;熊英;;LAMP技術(shù)及在人類(lèi)病毒性傳染病檢測(cè)中的應(yīng)用[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2012年05期

9 劉國(guó)憲;呂蓓;程奇;李路;;DNA載體的數(shù)據(jù)分類(lèi)及查詢(xún)系統(tǒng)的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用[J];生物技術(shù)通報(bào);2011年08期

10 呂蓓;程海榮;嚴(yán)慶豐;黃震巨;李軼女;羅達(dá);沈桂芳;張志芳;鄧子新;林敏;程奇;;體外核酸快速擴(kuò)增技術(shù)的發(fā)展和不斷創(chuàng)新[J];中國(guó)生物工程雜志;2011年03期

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 余蓓蓓;盧亦愚;謝鑫友;徐昌平;張鈞;;雙重?zé)晒舛縋CR檢測(cè)西尼羅病毒和基孔肯雅病毒[J];臨床檢驗(yàn)雜志;2013年06期

2 李林海;陳麗丹;廖楊;陳建蕓;石玉玲;;西尼羅河病毒實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)方法的建立及其應(yīng)用研究[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2012年19期

3 邱璐;李小林;蔣靜;王艷;周小俊;;實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)西尼羅病毒方法的建立[J];畜牧與獸醫(yī);2012年09期

4 徐煥洲;平芮巾;季汝武;王琳;楊鵬飛;張麗萍;岳啟安;胡孔新;;應(yīng)用DPO引物技術(shù)同時(shí)檢測(cè)5種蚊媒病毒的多重RT-PCR方法[J];中國(guó)國(guó)境衛(wèi)生檢疫雜志;2012年02期

5 呂喆;于亞洲;胡桂學(xué);趙哲;;西尼羅河病毒病的研究進(jìn)展[J];經(jīng)濟(jì)動(dòng)物學(xué)報(bào);2012年01期

6 楊宇;白琳;胡健萍;姚李四;魏蓮;楊志紅;王靜;;基孔肯雅病毒熒光定量PCR檢測(cè)方法的建立[J];中國(guó)媒介生物學(xué)及控制雜志;2012年01期

7 付鈺廣;任巧云;羅建勛;殷宏;;西尼羅病毒診斷的研究進(jìn)展[J];中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào);2011年08期

8 吳崢;張文炳;黎誠(chéng)耀;朱利;張玲;趙衛(wèi);;西尼羅病毒PCR檢測(cè)方法的建立[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2010年20期

9 呂蓓;程海榮;嚴(yán)慶豐;黃震巨;沈桂芳;張志芳;李軼女;鄧子新;林敏;程奇;;用重組酶介導(dǎo)擴(kuò)增技術(shù)快速擴(kuò)增核酸[J];中國(guó)科學(xué):生命科學(xué);2010年10期

10 李淑華;鹿文英;曹廣文;;利用環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)檢測(cè)西尼羅病毒[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2010年06期

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陳惠鵬,羅貴民,李惟,程玉華;棕色固氮菌含鐵超氧化物歧化酶重組研究[J];生物化學(xué)雜志;1989年05期

2 劉冬虹;王德蓮;郭燕華;聶炎炎;吳環(huán);曾國(guó)權(quán);;重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)的研究進(jìn)展[J];檢驗(yàn)檢疫學(xué)刊;2016年05期

3 孫國(guó)鳳;;Novo公司在美國(guó)開(kāi)始生產(chǎn)重組酶[J];生物技術(shù)通報(bào);1991年09期

4 林福玉;楊曉;;條件基因打靶研究存在的主要問(wèn)題及對(duì)策[J];遺傳;2011年05期

5 夏立亮;侯巍;王保學(xué);劉華;高偉;蔣琴;李鑫;于源華;;陰道毛滴蟲(chóng)蛋氨酸裂解酶的基因克隆及重組酶性質(zhì)分析[J];中國(guó)生物工程雜志;2010年05期

6 周銀;王躍駒;王瑛;;新型定點(diǎn)重組酶系統(tǒng)在植物基因轉(zhuǎn)化和基因疊加中的應(yīng)用前景[J];遺傳;2008年02期

7 楊東生;張研;張建會(huì);楊春;;Cre/Loxp重組酶系統(tǒng)與轉(zhuǎn)基因[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年08期

8 張霖;趙國(guó)屏;丁曉明;;位點(diǎn)特異性重組系統(tǒng)的機(jī)理和應(yīng)用[J];中國(guó)科學(xué):生命科學(xué);2010年12期

9 王立霞,王勇,胡鳶雷,高音,林忠平;Cre重組酶結(jié)構(gòu)與功能的研究進(jìn)展[J];生物工程學(xué)報(bào);2002年05期

10 陶麗梅，胡皆漢，程國(guó)寶，許永廷;銅鋅超氧化物歧化酶的金屬重組酶的活性部位與組氨酸的相互作用[J];結(jié)構(gòu)化學(xué);1996年01期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 劉輝;STELLA-CRE重組酶轉(zhuǎn)基因小鼠的建立與特征鑒定[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

2 鄭敬民;基于重組酶作用的小鼠ES細(xì)胞HPRT基因位點(diǎn)轉(zhuǎn)基因定點(diǎn)整合系統(tǒng)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2001年

3 李鵬;利用體細(xì)胞核移植制備腎臟特異性表達(dá)Cre重組酶的轉(zhuǎn)基因工具豬[D];吉林大學(xué);2015年

4 陳立梅;誘導(dǎo)性表達(dá)Cre重組酶轉(zhuǎn)基因豬的建立[D];吉林大學(xué);2010年

5 韓銘海;彈性蛋白酶在畢赤酵母中表達(dá)及N-糖基化位點(diǎn)突變對(duì)重組酶的影響[D];江南大學(xué);2013年

6 李莉;檢測(cè)Cre重組酶活性的轉(zhuǎn)基因報(bào)告豬的建立[D];吉林大學(xué);2009年

7 劉志國(guó);西尼羅病毒多表位疫苗研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2007年

8 李曉峰;西尼羅病毒Chin-01株5’非編碼區(qū)與病毒復(fù)制相關(guān)蛋白的相互作用研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2008年

9 胡太蛟;基于分子刪除策略的新型安全轉(zhuǎn)基因水稻培育技術(shù)[D];福建農(nóng)林大學(xué);2013年

10 雒偉偉;肺臟特異性表達(dá)Cre重組酶轉(zhuǎn)基因小型豬的建立[D];吉林大學(xué);2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 戎軍輝;重組酶的設(shè)計(jì)合成、分離純化及固定化[D];江蘇大學(xué);2019年

2 孫益榮;Humicola insolens角質(zhì)酶在Escherichia coli中的重組表達(dá)、發(fā)酵優(yōu)化及其應(yīng)用[D];江南大學(xué);2018年

3 劉導(dǎo)志;人源CYP3A4和CYP2J2重組酶表達(dá)及其相關(guān)代謝研究[D];華東師范大學(xué);2017年

4 李生;基于Phi29 DNA聚合酶和Cre重組酶的環(huán)狀DNA分子等溫?cái)U(kuò)增[D];天津大學(xué);2017年

5 汪亮;重組酶刪除載體的構(gòu)建及其在動(dòng)物細(xì)胞中的應(yīng)用[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

6 周小玲;粗糙脈孢菌一種新植酸酶基因的克隆、鑒定和重組酶的生化特性[D];江南大學(xué);2004年

7 胥珊;幾種不同NLS對(duì)重組酶刪除效率影響的初步研究[D];西南大學(xué);2009年

8 楊麗華;四環(huán)素誘導(dǎo)的Cre重組酶表達(dá)載體的構(gòu)建及其體外表達(dá)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2009年

9 楊春;肝特異性表達(dá)Cre重組酶載體和轉(zhuǎn)基因豬成纖維細(xì)胞的構(gòu)建[D];吉林大學(xué);2008年

10 張鵬程;微桿菌Microbacterium sp.ZZJ4-1尿酸氧化酶基因的克隆表達(dá)及重組酶性質(zhì)的研究[D];浙江大學(xué);2012年

本文編號(hào)：2850015