目的探討雙特異性磷酸酶1(dual specificity phosphatase-1, DUSP1)在缺氧小鼠RAW264.7巨噬細胞中的表達情況及其在缺氧誘導(dǎo)的RAW264.7巨噬細胞炎癥免疫反應(yīng)中的調(diào)控作用。方法將RAW264.7細胞分別在缺氧(1%O_2)條件下培養(yǎng)不同時間(12、24和36 h),常氧組在常氧(21%O_2)條件下培養(yǎng);采用RNA干擾技術(shù)干擾RAW264.7細胞中Dusp1表達并進行缺氧暴露24 h。收集各對應(yīng)時間點細胞培養(yǎng)上清液和細胞標本,提取細胞總RNA和總蛋白。使用qRT-PCR檢測Dusp1、Il1b、Il10和Tnfa的mRNA表達,采用Western blot檢測DUSP1的蛋白表達,采用ELISA檢測細胞培養(yǎng)上清液中IL-1β、IL-10和TNF-α的分泌水平。結(jié)果與常氧組(缺氧0 h)相比,缺氧暴露后RAW264.7細胞中DUSP1的mRNA和蛋白表達水平均顯著升高(P0.05),蛋白表達在缺氧暴露24 h時達到峰值;缺氧暴露24 h和36 h Il1b、Il10 mRNA表達均顯著升高(P0.05);缺氧暴露12 h時Tnfa mRNA表達明顯降低(P0.05);缺氧暴露12、24 h和36 h RAW264.7細胞IL-1β的分泌水平明顯增加(P0.05)。與干擾序列對照組相比,干擾Dusp1表達后,缺氧暴露24 h RAW264.7細胞中IL-1β的mRNA表達和分泌水平明顯增加(P0.05),IL-10的分泌水平明顯增加(P0.05),而TNF-α的mRNA表達和分泌水平明顯降低(P0.05)。結(jié)論缺氧能夠誘導(dǎo)RAW264.7巨噬細胞中DUSP1表達上調(diào),DUSP1通過調(diào)節(jié)IL-1β、IL-10和TNF-α的表達和/或分泌參與調(diào)控缺氧誘導(dǎo)的RAW264.7巨噬細胞炎癥免疫反應(yīng)。
【部分圖文】：

缺氧上調(diào) RAW264.7 細胞中DUSP1的表達

缺氧對RAW264.7細胞中Il1b、Il10和Tnfa mRNA表達的影響

圖2 缺氧對RAW264.7細胞中Il1b、Il10和Tnfa mRNA表達的影響2.5 DUSP1對缺氧RAW264.7細胞IL-1β、IL-10和TNF-α分泌水平的影響
【參考文獻】

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1 彭華志;DUSP1在人正常及骨關(guān)節(jié)炎滑膜細胞中的表達及對骨關(guān)節(jié)炎的保護作用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2017年

【共引文獻】

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1 時宗庭;中醫(yī)外治法干預(yù)膝骨關(guān)節(jié)炎臨床研究及其對滑膜炎癥免疫應(yīng)答機制[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2018年

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1 喬運成;黃諳非;田國平;劉曉輝;袁中華;;脂肪分化相關(guān)蛋白促進RAW264.7細胞內(nèi)�；o酶A∶膽固醇�；D(zhuǎn)移酶1高表達[J];中國動脈硬化雜志;2009年08期

2 龐戰(zhàn)軍,周玫,陳瑗;巨噬細胞集落刺激因子對RAW264.7細胞谷胱甘肽過氧化物酶活性及其基因表達的影響[J];中國動脈硬化雜志;2000年02期

3 姬文婕;胡道川;陳雪芬;馬永強;盧芮伊;周欣;魏路清;;干擾鹽皮質(zhì)激素受體基因?qū)AW264.7細胞增殖和凋亡的影響[J];中國病理生理雜志;2012年12期

4 康朦夢;朱航;林培政;羅炳德;;高溫和內(nèi)毒素聯(lián)合對RAW264.7細胞凋亡影響[J];中國公共衛(wèi)生;2011年02期

5 王春;許燦新;嚴鵬科;陳琳玲;李凱;廖端芳;;巨噬細胞集落刺激因子對RAW264.7細胞基質(zhì)金屬蛋白酶9分泌的影響[J];中國動脈硬化雜志;2006年02期

6 張林;黃俊琪;;2型登革病毒誘導(dǎo)RAW264.7細胞凋亡的機制及凋亡對病毒復(fù)制的影響[J];中國病理生理雜志;2013年12期

7 李衛(wèi)萍;趙正保;;脂多糖對RAW264.7細胞生長的影響[J];中外醫(yī)療;2012年15期

8 張麗;姜麗燕;張良巖;孫彩霞;欒炳國;陸詩清;隋國良;;CTGF對破骨前體細胞RAW264.7增殖及碳酸酐酶Ⅱ分化的影響[J];中國骨質(zhì)疏松雜志;2014年02期

9 許丹;律穎;朱小語;陳曉文;馮金秋;范愛琴;許雅君;;小鼠單核巨噬細胞白血病細胞(RAW264.7)的培養(yǎng)及其在誘導(dǎo)破骨細胞中的應(yīng)用[J];中國骨質(zhì)疏松雜志;2016年10期

10 方瑤;潘靜;李倩;顧江;唐彬;張衛(wèi)軍;毛旭虎;;類鼻疽伯克霍爾德氏菌感染RAW264.7細胞模型的建立[J];中國人獸共患病學(xué)報;2013年03期

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1 欒弘;泛福舒通過TLR4和TLR2介導(dǎo)的ERK1/2/NF-κB通路上調(diào)RAW264.7細胞炎癥因子的表達[D];華中科技大學(xué);2014年

2 徐佳;VISA菌株11Y耐藥特征解析及其對RAW264.7巨噬細胞自噬和炎癥反應(yīng)的調(diào)控機制研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2019年

3 王曉慧;1.抑制糖皮質(zhì)激素受體表達導(dǎo)致小鼠巨噬細胞系RAW264.7增殖加快的分子機制　2.非基因毒應(yīng)激對RhoB的誘導(dǎo)作用及其生物學(xué)意義[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2005年

4 徐嘉瑩;Calpain及抑制劑對小鼠RAW264.7細胞RANKL-RANK通路誘導(dǎo)的破骨細胞形成機制的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2010年

5 毛英杰;EphB4/ephrinB2逆向信號抑制RANKL誘導(dǎo)的Raw264.7破骨細胞分化的機制研究[D];浙江大學(xué);2011年

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1 郭峰;血管緊張素Ⅱ1型受體在RAW264.7巨噬細胞中的表達及其在炎癥介質(zhì)產(chǎn)生中的作用[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2009年

2 聶建巍;γ-干擾素增強RAW264.7巨噬細胞吞噬、殺傷阿薩希毛孢子菌的實驗研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2012年

3 李忱煒;肺炎鏈球菌溶血素對細菌毒力的影響及誘導(dǎo)RAW264.7細胞凋亡的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

4 蔡衛(wèi)衛(wèi);IL-1β在BCG誘導(dǎo)小鼠巨噬細胞RAW264.7凋亡中的調(diào)控作用研究[D];寧夏大學(xué);2019年

5 盧敬敬;嗜肺軍團菌重組蛋白IP、MOMP及PILE調(diào)控RAW264.7巨噬細胞功能的初步研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2017年

6 蔣建軍;丙咪嗪經(jīng)酸性鞘磷脂酶/神經(jīng)酰胺通路抑制LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細胞NLRP3炎癥小體的激活[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2019年

7 胡光磊;GAS對巨噬細胞株RAW264.7功能的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2009年

8 吳麗媛;TAK1介導(dǎo)的小鼠巨噬細胞RAW264.7凋亡的實驗研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2012年

9 喬靜;葫蘆素E對脂多糖誘導(dǎo)的小鼠巨噬細胞RAW264.7炎癥反應(yīng)的抑制作用及其機制研究[D];暨南大學(xué);2013年

10 劉超;抗菌肽hCAP-18/LL-37基因轉(zhuǎn)染對巨噬細胞RAW264.7活化功能的影響[D];吉林大學(xué);2010年

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