發(fā)布時間：2020-10-17 22:01

　　 目的:研究miR-152-3p對血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)的作用及機(jī)制。方法:使用ox-LDL刺激血管平滑肌細(xì)胞,用ApoE基因敲除小鼠建立動脈粥樣硬化動物模型。使用qRT-PCR檢測miR-152-3p和轉(zhuǎn)化生長因子-B2(TGFB2 Mrna)表達(dá)水平。分別使用CCK-8實驗、transwell實驗和TUNEL實驗檢測VSMCs增殖、遷移和凋亡。通過生物信息分析預(yù)測miR-152-3p的下游靶點。MiR-152-3p和TGFB2之間的相互作用通過雙熒光素酶實驗、qRT-PCR和Western blot進(jìn)行驗證。結(jié)果:在動脈粥樣硬化小鼠主動脈平滑肌細(xì)胞和受到ox-LDL處理的VSMCs中miR-152-3p表達(dá)水平顯著下調(diào),并表現(xiàn)出濃度和時間依賴特性。過表達(dá)miR-152-3p顯著抑制了VSMCs的增殖和遷移,誘導(dǎo)了細(xì)胞凋亡。從機(jī)制上來看,miR-152-3p通過靶向作用于TGFB2發(fā)揮作用。結(jié)論:miR-152-3p通過靶向抑制TGFB2抑制VSMCs的異常增殖和遷移。
【文章目錄】：
1 資料與方法
    1.1 實驗材料
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染和分組
        1.2.2 AS小鼠的構(gòu)建
        1.2.3 miR-152-3p和TGFB2mRNA的檢測
        1.2.4 TGFB2表達(dá)檢測
        1.2.5 雙熒光素酶實驗驗證miR-152-3p和TGFB2的相互結(jié)合關(guān)系
        1.2.6 CCK-8實驗檢測VSMCs增殖活性
        1.2.7 Transwell實驗檢測VSMCs遷移能力
        1.2.8 TUNEL檢測VSMCs凋亡情況
    1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 miR-152-3p在AS小鼠和受到ox-LDL刺激的VSMCs中的表達(dá)
    2.2 miR-152-3p對VSMCs增殖、遷移和凋亡的影響
    2.3 miR-152-3p靶向調(diào)控TGFB2
    2.4 過表達(dá)TGFB2對miR-152-3p作用的逆轉(zhuǎn)
    2.5 miR-152-3p在小鼠體內(nèi)對TGFB2的影響
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本文編號：2845360