神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)具有多向分化潛能,能分化成神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞。其中,少突膠質(zhì)細(xì)胞在中樞神經(jīng)系統(tǒng)軸突髓鞘化中起重要作用,其分化異�；騺G失會導(dǎo)致多發(fā)性硬化癥、腦白質(zhì)營養(yǎng)不良和創(chuàng)傷性脊髓損傷等脫髓鞘疾病。少突膠質(zhì)細(xì)胞的分化成熟是通過遺傳和表觀遺傳等內(nèi)在因素及外在因素在多水平上進(jìn)行調(diào)控的,生長因子、神經(jīng)營養(yǎng)因子、轉(zhuǎn)錄因子和microRNA等都對少突膠質(zhì)細(xì)胞的分化和成熟具有不同的調(diào)節(jié)作用。最近的研究表明,長非編碼RNA與少突膠質(zhì)細(xì)胞的分化和成熟有關(guān),但它們在少突膠質(zhì)細(xì)胞分化中的作用及機制尚不完全清楚。在前期工作中,我們對小鼠側(cè)腦室細(xì)胞進(jìn)行單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組分析,發(fā)現(xiàn)了一個新的長鏈非編碼RNA Lnc784。在本論文中,我們對Lnc784的表達(dá)及功能進(jìn)行了研究。編碼能力檢測顯示,Lnc784沒有蛋白編碼能力。RT-qPCR實驗和原位雜交結(jié)果表明,Lnc784在小鼠各腦區(qū)中普遍表達(dá),且在不同腦區(qū)中的表達(dá)具有差異;Lnc784在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核均有分布,表明其在轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后水平都能發(fā)揮功能。Lnc784是TCF7L2基因的反義RNA,可能通過調(diào)控靶基因TCF7L2的表達(dá)行使其生物學(xué)功能。在神經(jīng)干細(xì)胞中上調(diào)Lnc784的表達(dá)后,其靶基因TCF7L2的表達(dá)水平相對下降,與少突膠質(zhì)細(xì)胞分化相關(guān)的基因表達(dá)降低,少突膠質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量減少。在神經(jīng)干細(xì)胞中下調(diào)Lnc784后,其靶基因TCF7L2的表達(dá)水平相對上升,與少突膠質(zhì)細(xì)胞分化相關(guān)的基因表達(dá)上調(diào),少突膠質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量明顯增加。上述結(jié)果表明,Lnc784通過調(diào)控靶基因TCF7L2的表達(dá),影響神經(jīng)干細(xì)胞向少突膠質(zhì)細(xì)胞的分化。我們的研究結(jié)果豐富了人們對少突膠質(zhì)細(xì)胞分化和髓鞘形成調(diào)控機制的認(rèn)識,為中樞神經(jīng)系統(tǒng)脫髓鞘疾病和神經(jīng)損傷修復(fù)的治療方案提供一種新的人工干預(yù)的靶位點。
【學(xué)位單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R338
【部分圖文】：

19]，后二者均能募集如組蛋白去乙�；福℉DACs）的共抑制因子到 Wnt 靶基因的啟動子上,從而抑制 Wnt 靶基因的轉(zhuǎn)錄（圖.1A）。Wnt 糖蛋白作為配體通過跨膜結(jié)構(gòu)域卷曲受體（Frizzled）和低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白 5 和 6（LRP5/6）的共同受體發(fā)揮其作用。當(dāng)受體結(jié)合后，Wnt 信號通過 Wnt 受體和 Dvl 之間的關(guān)聯(lián)傳遞，此時 APC、Axin、GSK-3 和β-cat 組成的復(fù)合物解體，因此可以防止β-cat 的降解。而β-cat 隨后進(jìn)入到細(xì)胞核與 TCF 形成β-cat/TCF 復(fù)合物，并激活復(fù)合物下游的靶基因（圖.1B）。盡管 TCF 家族蛋白最初是以淋巴轉(zhuǎn)錄因子被發(fā)現(xiàn)的[20]，但其成員現(xiàn)在已被證實是許多發(fā)育過程中的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，并且在生物體各種細(xì)胞譜系和器官中起作用[21]。在發(fā)現(xiàn)第一個 TCF 家族蛋白 TCF7/TCF-1 之后的第二年，Castrop 等人[1]分離出了 TCF7L1 和 TCF7L2 的 cDNA,當(dāng)時它們分別被叫做 TCF3 和 TCF4。由于它們的高遷移率族盒（HMG-box）序列與 TCF7 序列表現(xiàn)出驚人的相似性

Fig.4.3 In situ hybridization results of Lnc784 in mouse brain regions (arrows indicate signalpoints)4.2 NPC 原代培養(yǎng)

NPC 細(xì)胞來驗證 Lnc784 與 TCF7L2 基因之間的關(guān)系以及 L 12.5 天胎鼠全腦獲得 NPC 細(xì)胞并原代培養(yǎng)，期間取細(xì)胞培養(yǎng)體污染，結(jié)果顯示所取原代細(xì)胞并無支原體污染（圖 4.4），可Marker S1 S2 + -

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 Li He;Q.Richard Lu;;Coordinated control of oligodendrocyte development by extrinsic and intrinsic signaling cues[J];Neuroscience Bulletin;2013年02期

本文編號：2820023