【摘要】：背景:弓形蟲(chóng)是一種專(zhuān)性細(xì)胞內(nèi)寄生原蟲(chóng),可以感染所有的有核細(xì)胞。據(jù)調(diào)查,世界人群的弓形蟲(chóng)感染率約為30%,我國(guó)這一比率為5%~20%。因此,弓形蟲(chóng)病是一種嚴(yán)重危害公共健康的疾病,研究弓形蟲(chóng)的致病機(jī)理可以為更好的防控弓形蟲(chóng)病提供科學(xué)依據(jù)。弓形蟲(chóng)完成在宿主細(xì)胞的生活過(guò)程需要入侵、復(fù)制和逸出三個(gè)階段。而逸出階段是蟲(chóng)體破壞宿主細(xì)胞的主要階段。我們?cè)诠蜗x(chóng)基因組中發(fā)現(xiàn)細(xì)菌溶血素蛋白的同源物,并提出假說(shuō),弓形蟲(chóng)三型溶血素可以介導(dǎo)蟲(chóng)體從感染細(xì)胞中逸出。目的:探究弓形蟲(chóng)三型溶血素介導(dǎo)蟲(chóng)體從細(xì)胞內(nèi)逸出的作用及其分子機(jī)制方法:用在線(xiàn)生物信息學(xué)分析軟件分析弓形蟲(chóng)三型溶血素的進(jìn)化和蛋白結(jié)構(gòu);用大腸桿菌外源表達(dá)弓形蟲(chóng)三型溶血素;用外源表達(dá)的弓形蟲(chóng)三型溶血素蛋白孵育感染弓形蟲(chóng)的宿主細(xì)胞,用流式細(xì)胞儀對(duì)逸出蟲(chóng)體進(jìn)行計(jì)數(shù);用免疫印跡的方法檢測(cè)宿主細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)水平變化。結(jié)果:弓形蟲(chóng)三型溶血素蛋白序列與瘧原蟲(chóng)溶血素、蠟樣芽孢桿菌的三型溶血素高度保守,是一種跨膜蛋白。外源表達(dá)的弓形蟲(chóng)三型溶血素蛋白與預(yù)測(cè)蛋白大小一致,并且能誘導(dǎo)弓形蟲(chóng)從感染的宿主細(xì)胞逸出。此類(lèi)逸出依賴(lài)蟲(chóng)體在宿主細(xì)胞的發(fā)育水平、蟲(chóng)體內(nèi)鈣離子、以及蟲(chóng)體的運(yùn)動(dòng)能力。同時(shí),經(jīng)過(guò)弓形蟲(chóng)三型溶血素蛋白孵育的宿主細(xì)胞的凋亡相關(guān)的蛋白的表達(dá)水平和磷酸化水平升高,可能介導(dǎo)蟲(chóng)體逸出。逸出的蟲(chóng)體在毒力和生長(zhǎng)速度上與對(duì)照組無(wú)顯著性差異。結(jié)論:弓形蟲(chóng)三型溶血素蛋白可以誘導(dǎo)蟲(chóng)體從宿主細(xì)胞逸出,并且依賴(lài)蟲(chóng)體運(yùn)動(dòng)能力、鈣離子和宿主凋亡途徑。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R382.5
【圖文】：

TgHly-III蛋白的生物信息學(xué)分析（A，B左）和蛋白表達(dá)（B右）

TgHly-III蛋白的生物信息學(xué)分析（A，B左）和蛋白表達(dá)（B右）

圖 2 TgHly-III 蛋白誘導(dǎo)弓形蟲(chóng)逸出以及與鈣離子、蟲(chóng)體運(yùn)動(dòng)能力的關(guān)系檢測(cè)A：檢測(cè)系統(tǒng)；B： TgHly-III 蛋白誘導(dǎo)弓形蟲(chóng)逸出（與 TgHlyIII 0 min 組比較：*P< 0.05） C、D：TgHly-III 蛋白誘導(dǎo)弓形蟲(chóng)逸出與蟲(chóng)體運(yùn)動(dòng)能力、鈣離子的關(guān)系（與 Ctrl組比較：*P< 0.05；與 TgHlyIII 組比較：#P < 0.05）。Fig 2. TgHly-III could induce egress of T. gondii fron infected HFFs and thiskind of egress depended on intraprasitic calcium availability and parasitic mobility.A: egress assay system; B: TgHly-III-induced egress of T. gondii (compared to 0 min,*P<0.05); C: the relationship of TgHly-III-induced egress with calcium and parasitemovement (compared to Ctrl, *P<0.05; compared to TgHly-III, #P<0.05).

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本文編號(hào)：2790782