發(fā)布時間：2020-08-12 16:50

【摘要】：背景:弓形蟲是一種專性細胞內(nèi)寄生原蟲,可以感染所有的有核細胞。據(jù)調(diào)查,世界人群的弓形蟲感染率約為30%,我國這一比率為5%~20%。因此,弓形蟲病是一種嚴重危害公共健康的疾病,研究弓形蟲的致病機理可以為更好的防控弓形蟲病提供科學依據(jù)。弓形蟲完成在宿主細胞的生活過程需要入侵、復制和逸出三個階段。而逸出階段是蟲體破壞宿主細胞的主要階段。我們在弓形蟲基因組中發(fā)現(xiàn)細菌溶血素蛋白的同源物,并提出假說,弓形蟲三型溶血素可以介導蟲體從感染細胞中逸出。目的:探究弓形蟲三型溶血素介導蟲體從細胞內(nèi)逸出的作用及其分子機制方法:用在線生物信息學分析軟件分析弓形蟲三型溶血素的進化和蛋白結(jié)構(gòu);用大腸桿菌外源表達弓形蟲三型溶血素;用外源表達的弓形蟲三型溶血素蛋白孵育感染弓形蟲的宿主細胞,用流式細胞儀對逸出蟲體進行計數(shù);用免疫印跡的方法檢測宿主細胞凋亡相關(guān)蛋白表達水平變化。結(jié)果:弓形蟲三型溶血素蛋白序列與瘧原蟲溶血素、蠟樣芽孢桿菌的三型溶血素高度保守,是一種跨膜蛋白。外源表達的弓形蟲三型溶血素蛋白與預測蛋白大小一致,并且能誘導弓形蟲從感染的宿主細胞逸出。此類逸出依賴蟲體在宿主細胞的發(fā)育水平、蟲體內(nèi)鈣離子、以及蟲體的運動能力。同時,經(jīng)過弓形蟲三型溶血素蛋白孵育的宿主細胞的凋亡相關(guān)的蛋白的表達水平和磷酸化水平升高,可能介導蟲體逸出。逸出的蟲體在毒力和生長速度上與對照組無顯著性差異。結(jié)論:弓形蟲三型溶血素蛋白可以誘導蟲體從宿主細胞逸出,并且依賴蟲體運動能力、鈣離子和宿主凋亡途徑。
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R382.5
【圖文】：

TgHly-III蛋白的生物信息學分析（A，B左）和蛋白表達（B右）

TgHly-III蛋白的生物信息學分析（A，B左）和蛋白表達（B右）

圖 2 TgHly-III 蛋白誘導弓形蟲逸出以及與鈣離子、蟲體運動能力的關(guān)系檢測A：檢測系統(tǒng)；B： TgHly-III 蛋白誘導弓形蟲逸出（與 TgHlyIII 0 min 組比較：*P< 0.05） C、D：TgHly-III 蛋白誘導弓形蟲逸出與蟲體運動能力、鈣離子的關(guān)系（與 Ctrl組比較：*P< 0.05；與 TgHlyIII 組比較：#P < 0.05）。Fig 2. TgHly-III could induce egress of T. gondii fron infected HFFs and thiskind of egress depended on intraprasitic calcium availability and parasitic mobility.A: egress assay system; B: TgHly-III-induced egress of T. gondii (compared to 0 min,*P<0.05); C: the relationship of TgHly-III-induced egress with calcium and parasitemovement (compared to Ctrl, *P<0.05; compared to TgHly-III, #P<0.05).

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本文編號：2790782