【摘要】：目的探討肺炎克雷伯菌轉(zhuǎn)錄調(diào)控子RcsAB對菌株超粘性和生物膜形成能力的影響,通過構(gòu)建肺炎克雷伯菌rcsA、rcs B及rcsAB基因缺失的無痕突變株和對應(yīng)的回補株,對其菌株超粘性和生物膜表型進行測定,期間以野生株作為對照,分析RcsAB在菌株超粘性和生物膜形成中的功能。方法首先構(gòu)建突變株Δrcs A、ΔrcsB和ΔrcsAB,PCR擴增rcsA、rcsB基因上下游同源臂片段,克隆到質(zhì)粒p KO3-Km上,將重組質(zhì)粒導(dǎo)入肺炎克雷伯菌NTUH-K2044中,經(jīng)同源重組后篩選得到無痕突變株。然后構(gòu)建回補株,擴增rcsA、rcsB基因片段,克隆到質(zhì)粒pBAD33上,將重組質(zhì)粒導(dǎo)入相應(yīng)突變株,得到回補株。粘度實驗測定野生株、突變株、回補株的超粘性。用結(jié)晶紫染色的方法測定菌體生物膜形成能力。結(jié)果成功構(gòu)建rcsA、rcsB基因缺失的無痕突變株Δrcs A、ΔrcsB、ΔrcsAB和回補株C-ΔrcsA、C-ΔrcsB、C-rcsA-ΔrcsAB、C-rcsB-ΔrcsAB。與野生株相比,突變株超粘性和生物膜形成能力均減弱�；匮a株C-ΔrcsB回補表型介于野生株突變株之間,其他回補表型不明顯。結(jié)論轉(zhuǎn)錄調(diào)控子RcsAB對肺炎克雷伯菌超粘性和生物膜形成具有正向調(diào)控作用。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R378

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本文編號：2750509