【摘要】：目的:觀察單純CIH條件下及CB_(1R)拮抗劑利莫那班干預(yù)后CIH條件下大鼠腎組織病理改變,通過檢測(cè)腎組織中銜接蛋白p66Shc的表達(dá),探討p66Shc和內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)在CIH導(dǎo)致腎損傷中的可能作用機(jī)制;初步探討p66Shc與內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)之間有無相關(guān)性。方法:選取30只健康的成年Wistar雄性大鼠,將之隨機(jī)分配為5組,分別為:正常對(duì)照組、間歇低氧IH4周組、IH6周組、IH+干預(yù)4周組、IH+干預(yù)6周組,干預(yù)組予大鼠腹腔內(nèi)按1.5mg/kg/d計(jì)量注射CB_(1R)拮抗劑利莫那班。單純低氧組及干預(yù)低氧組在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行到第4周時(shí)隨機(jī)抽取一半大鼠處死,剩余大鼠于第6周處死,處死后留取腎臟組織,光學(xué)顯微鏡下觀察各組大鼠腎組織形態(tài)學(xué)變化,免疫組織化學(xué)方法通過測(cè)定灰度值代表各組大鼠腎臟中銜接蛋白p66Shc的表達(dá),采用SPSS25軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。結(jié)果:1.各組大鼠腎組織HE染色形態(tài):(1)對(duì)照組腎組織的結(jié)構(gòu)正常,各結(jié)構(gòu)間界限清晰,著色亦均勻;(2)IH組大鼠腎小球腫脹,系膜輕度增生,腎小管上皮細(xì)胞明顯腫脹,管腔變狹窄,刷狀緣減少或消失,其中6周組較4周組管腔狹窄更明顯;(3)IH+干預(yù)組較單純低氧組損傷有減輕。2.p66Shc免疫組化中的表達(dá):(1)在各組大鼠腎組織中,腎小球及小管中均可見褐色胞漿,以腎小管表達(dá)為主,尤其是在近端腎小管;(2)對(duì)照組顏色較單純低氧組均淺,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);(3)單純低氧組陽性表達(dá)顯著,其中6周IH組表達(dá)最強(qiáng),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);(4)4、6周干預(yù)組較4、6周單純低氧組顏色變淺,干預(yù)組p66Shc陽性表達(dá)降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。結(jié)論:1.CIH可致腎損傷,且損傷程度與間歇低氧時(shí)間成正比;2.CIH腎組織尤其是近端腎小管中銜接蛋白p66Shc表達(dá)增加,提示其可能在CIH所致的腎損傷中起重要作用;3.CB_(1R)拮抗劑利莫那班干預(yù)可改善腎損傷,提示ECs參與CIH腎損傷;4.CB_(1R)拮抗劑利莫那班干預(yù)后,銜接蛋白p66Shc表達(dá)下調(diào),提示內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)可能是p66Shc上游的調(diào)節(jié)系統(tǒng)。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R740;R56;R-332
【圖文】：

圖 1-13 留取標(biāo)本、制備蠟塊、切片第 4 時(shí)分別從 B、C 動(dòng)物箱中隨機(jī)取一半大鼠，用 10%水合氯醛腹腔側(cè)腎臟，第 6 周將剩余大鼠處死，見圖 1-2；將標(biāo)本用預(yù)冷生理鹽性福爾馬林浸泡 24h 固定；再經(jīng)乙醇脫水、二甲苯透明后用液體石轉(zhuǎn)式切片機(jī)不間斷切片，每張切片厚度大概為 4um。

正常組 HE×200 倍 正常組 HE×400IH4 周組 HE×200 倍 IH6 周組 HE×200 倍IH+干預(yù) 4 周組 HE×200 倍 IH+干預(yù) 6 周組 HE×200 倍圖 2-1 各組大鼠腎組織 HE 染色形態(tài)

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本文編號(hào)：2741835