【摘要】：研究背景和目的:臨床中跨區(qū)切取皮瓣常常引起皮瓣遠(yuǎn)端壞死。本研究旨在構(gòu)建一種新的三血管體遠(yuǎn)端潛在區(qū)非生理性增壓模型。并探討潛在區(qū)存活機(jī)制。同時(shí)將其與超引流技術(shù)進(jìn)行比較。從而明確手術(shù)優(yōu)選方式,提高手術(shù)安全性,降低穿支皮瓣遠(yuǎn)端壞死率。方法:1.對(duì)6只大鼠進(jìn)行顯微鏡下胸背靜脈(TDV)和旋髂深靜脈(DCIV)解剖、測(cè)量,并以臨床靜脈留置針內(nèi)芯作為鏡下參照,對(duì)比兩者鏡下管徑直徑。予以統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,明確兩者管徑大小對(duì)比情況。以大鼠背部一側(cè)三血管體穿支皮瓣模型為基礎(chǔ),設(shè)計(jì)旋髂深血管(DCIA/DCIV)為蒂,皮瓣向大鼠頭部擴(kuò)展至肋間血管(ICA/ICV)區(qū)和胸背血管(TDA/TDV)區(qū)。設(shè)計(jì)胸背血管(TDA/TDV)為蒂,皮瓣向大鼠頭部擴(kuò)展至肋間血管(ICA/ICV)區(qū)和旋髂深血管(DCIA/DCIV)區(qū)。12只大鼠隨機(jī)分成兩組,A組以胸背動(dòng)脈(TDA/TDV)穿支為蒂,B組:以旋髂深動(dòng)脈(DCIA/DCIV)穿支為蒂。術(shù)后測(cè)量皮瓣成活率并進(jìn)行組間比較。激光多普勒血流檢測(cè)血流顯影情況和明膠-氧化鉛動(dòng)脈造影顯示血管形態(tài)情況。比較兩種模型后期用于增壓實(shí)驗(yàn)的優(yōu)劣。2.以大鼠背部一側(cè)三血管體穿支皮瓣模型為基礎(chǔ),設(shè)計(jì)胸背血管(TDA/TDV)為蒂,皮瓣向大鼠頭部擴(kuò)展至肋間血管時(shí)CA/ICV)區(qū)和旋髂深血管(DCIA/DCIV)區(qū)。分離并保留旋髂深靜脈(DCIV)。分離鼠尾動(dòng)脈。12只實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分成兩組:A組為對(duì)照組,不做吻合鼠尾動(dòng)脈吻合,于血管旋轉(zhuǎn)點(diǎn)處將鼠尾離斷、結(jié)扎血管;B組為皮瓣遠(yuǎn)端非生理性增壓組,將鼠尾動(dòng)脈分離后,經(jīng)皮下隧道與旋氃深靜脈(DCIV)吻合。術(shù)后測(cè)量皮瓣成活率并進(jìn)行組間比較。進(jìn)行激光多普勒血流檢測(cè)血流顯影情況和明膠-氧化鉛動(dòng)脈造影顯示血管形態(tài)情況。比較兩者差異。3.96只大鼠隨機(jī)分為兩組,皮瓣設(shè)計(jì)同第二部分。分別于術(shù)后1h、3h、6h、12h、1d、3d、5d和7d進(jìn)行激光多普勒血流檢測(cè)。觀察皮瓣choke vessel區(qū)有無(wú)血流信號(hào)阻礙現(xiàn)象,及其持續(xù)、解除時(shí)間。以上述時(shí)間點(diǎn)大鼠行明膠-氧化鉛造影,觀察皮瓣血管形態(tài)變化和choke vessel區(qū)血管形態(tài)變化時(shí)間。對(duì)比兩組有無(wú)差異。4.以第三部分大鼠激光多普勒血流檢測(cè)儀檢測(cè)圖片為研究對(duì)象。分組遵循第三部分。利用moorLDI Review V6.1軟件,分析激光多普勒血流檢測(cè)圖,測(cè)量皮瓣術(shù)后1h,3h,6h,12h,1d,3d,5d及7d血量情況。對(duì)比組內(nèi)相鄰時(shí)間點(diǎn)choke vessel Ⅱ區(qū)/Ⅰ區(qū)情況,和DICA、ICA血流量變化情況。檢測(cè)結(jié)果將兩組間潛在區(qū)、動(dòng)力區(qū)的血流量分別除以解剖區(qū)的血流量,得出相應(yīng)比值進(jìn)行組間各時(shí)間點(diǎn)的對(duì)應(yīng)比較。同時(shí)對(duì)比各時(shí)間點(diǎn)兩組間choke vessel Ⅱ區(qū)/Ⅰ區(qū)情況。并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。明確非生理性增壓對(duì)于皮瓣各區(qū)血流量,特別是早期皮瓣血流量的影響。5.皮瓣模型同第二部分。24只大鼠隨機(jī)分為兩組,分組情況同第二部分。利用蘇木素-伊紅(HE)對(duì)皮瓣進(jìn)行染色觀察。觀察潛在區(qū)微細(xì)結(jié)構(gòu),同時(shí)對(duì)choke vessel Ⅱ區(qū)進(jìn)行血管計(jì)數(shù),比較增壓與否對(duì)皮瓣遠(yuǎn)端微細(xì)結(jié)構(gòu)和choke vessel Ⅱ區(qū)血管新生的影響。并對(duì)兩組皮瓣choke vessel Ⅱ區(qū)進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色和Western blotting檢測(cè)。分析兩組VEGF的表達(dá)情況。從而從分子水平評(píng)價(jià)大鼠皮瓣遠(yuǎn)端增壓與否對(duì)組織血管新生情況的影響。6.以大鼠18只,作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,皮瓣模型在第二部分基礎(chǔ)上保留旋髂深靜脈(DCIV),作為遠(yuǎn)端增壓靜脈。術(shù)后7天,對(duì)其進(jìn)行皮瓣大體觀察及成活率檢測(cè)、利用激光多普勒血流檢測(cè)儀和明膠-氧化鉛血管造影明確壞死區(qū)域。同時(shí)進(jìn)行蘇木素-伊紅(HE)染色并檢測(cè)血管密度,免疫組織化學(xué)(IHC)染色和Western blotting檢測(cè),明確VEGF表達(dá)情況。結(jié)合之前部分?jǐn)?shù)據(jù),對(duì)比其與皮瓣遠(yuǎn)端非生理性增壓技術(shù)對(duì)三血管體穿支皮瓣遠(yuǎn)端存活影響的差異。結(jié)果:1.鏡下檢測(cè)TDA管徑直徑為0.427±0.10,DCIV管徑直徑為0.632±0.06,p=0.002,兩者間差異具有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。A組皮瓣成活率為(81.2±6.3)%,B組皮瓣成活率為(88.8±5.3)%,兩組間成活率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.047)。激光多普勒血流顯影圖和明膠-氧化鉛造影均顯示兩組遠(yuǎn)端缺血性改變。2.A組皮瓣成活率為(81.9±5.4)%,B組皮瓣成活率為100%。兩者比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.001)。激光多普勒血流顯影圖和明膠-氧化鉛造影均顯示A組遠(yuǎn)端缺血性改變,而B組遠(yuǎn)端血流正常、血管顯影良好。3.激光多普勒血流檢測(cè)示A組可見choke vessel I區(qū)出現(xiàn)血流阻礙現(xiàn)象,阻礙現(xiàn)象在6-12h后消失。choke vessel Ⅱ區(qū)血流3d才通過(guò)。B組可見choke vessel Ⅰ區(qū)出現(xiàn)血流阻礙現(xiàn)象,阻礙現(xiàn)象在6-12h后消失。而choke vessel Ⅱ區(qū)非生理性增壓后,術(shù)后1d內(nèi)潛在區(qū)血流信號(hào)較弱。1d后血流已通過(guò)choke vessel Ⅱ區(qū),隨著時(shí)間推移,血流信號(hào)明顯增強(qiáng)。明膠-氧化鉛血管造影顯示A組術(shù)后3小時(shí)choke vessel Ⅰ區(qū)血管以choke vessel相連為主,其間含少量細(xì)小真性吻合,其后至1天時(shí)間內(nèi)皮瓣氧化鉛造影均表現(xiàn)為細(xì)小真性吻合為主,其間出現(xiàn)大量纖細(xì)血管結(jié)構(gòu)。3-7天內(nèi)出現(xiàn)粗大真性吻合,纖細(xì)血管逐漸消失。B組術(shù)后choke vessel Ⅰ區(qū)血管明膠氧化鉛造影顯示與A組基本相同。A組術(shù)后choke vessel Ⅱ區(qū)主要為choke vessel血管,12h出現(xiàn)少許細(xì)小真性吻合,1d時(shí)出現(xiàn)較多細(xì)小真性吻合,并持續(xù)至7d。B組術(shù)后3h內(nèi),第二血管體和第三血管體間choke vesselⅡ區(qū)血管表現(xiàn)為choke vessel。術(shù)后6h時(shí),出現(xiàn)細(xì)小真性吻合,12h時(shí)轉(zhuǎn)為以大量的細(xì)小真性吻合。術(shù)后1d、3d、5d和7d出現(xiàn)以少量的粗大真性吻合血管連接兩個(gè)血管體間。4.通過(guò)兩組組內(nèi)各個(gè)時(shí)間點(diǎn)choke vessel Ⅱ區(qū)/Ⅰ區(qū)血流量對(duì)比發(fā)現(xiàn),兩組均呈增長(zhǎng)趨勢(shì)。但增長(zhǎng)趨勢(shì)存在差異。A組12h內(nèi)增長(zhǎng)平緩,12h和1d間增長(zhǎng)存在差異(p0.05),而3d至7d,增長(zhǎng)趨于平緩。B組1h和3h間存在顯著差異(p0.01),12h至1d,相鄰各組間血流量對(duì)比無(wú)明顯差異。而1d和3d間存在顯著差異(pp0.01),其后增長(zhǎng)趨于平緩。其他相鄰時(shí)間間比較未見差異。通過(guò)組內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)血流量的曲線圖觀察發(fā)現(xiàn),A組和B組各個(gè)血管體區(qū)域內(nèi)血流量均呈上升趨勢(shì)。并于3d-7d增長(zhǎng)區(qū)域平穩(wěn)。而A組DCIA血管體增長(zhǎng)緩慢。A組ICA區(qū)3h和6h間、12h和1d、1d和3d間存在顯著差異(p0.01),其余各區(qū)相鄰時(shí)間點(diǎn)間未見明顯差異。B組TDA相鄰時(shí)間點(diǎn)間未見明顯差異。ICA區(qū)3h和6h間、12h和1d、1d和3d間存在顯著差異(pp0.01),其余相鄰時(shí)間點(diǎn)間未見明顯差異。DCIA區(qū)1h和3h、6h和12h、12h和1d、1d和3d間均存在顯著差異(p0.01)。其余相鄰時(shí)間點(diǎn)間未見明顯差異。通過(guò)兩組組間各個(gè)時(shí)間點(diǎn)choke vesse1 Ⅱ區(qū)/Ⅰ區(qū)血流量對(duì)比發(fā)現(xiàn),B組1h至3d內(nèi)各個(gè)點(diǎn)血流量比值均明顯高于A組(p0.01)。5d和7d B組仍高于A組(p0.05)。通過(guò)兩組皮瓣ICA區(qū)/TDA區(qū)各時(shí)間點(diǎn)對(duì)比柱狀圖發(fā)現(xiàn),B組ICA區(qū)/TDA區(qū)于1h、3h、6h和12h時(shí)均高于A組,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。1d后兩組間差異無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而兩組皮瓣DCIA區(qū)/TDA區(qū)各時(shí)間點(diǎn)對(duì)比柱狀圖發(fā)現(xiàn),DCIA區(qū)/TDA區(qū)各時(shí)間點(diǎn)均高于A組,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(pp0.05)。5.HE染色示A組和B組新生血管計(jì)數(shù)分別為(25.83±5.62)/mm和(54.88±7.80)/mm,組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.001)。免疫組織化學(xué)(IHC)染色及Western blotting檢測(cè)顯示B組皮瓣VEGF表達(dá)較A組高(p0.001)。6.皮瓣成活率檢測(cè),C組皮瓣成活率為(92.8±4.1)%,其與A組(81.9±5.4)%和B組(100%)分別進(jìn)行比較,兩者差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。激光多普勒血流顯影圖和明膠-氧化鉛造影均顯示A組、C組遠(yuǎn)端缺血性改變,而B組遠(yuǎn)端血流正常、血管顯影良好。HE染色示新生血管計(jì)數(shù)為(37.14±7.49)/mm2,與 A 組(25.83±5.62)/mm2和 B 組(54.88±7.80)/mm2分別比較,兩組間均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。免疫組織化學(xué)(IHC)染色和Western blotting檢測(cè)證實(shí)C組皮瓣中VEGF的表達(dá)水平較A組顯著高;B組中VEGF的表達(dá)較C組上調(diào)。結(jié)論:以TDA為蒂時(shí),DICV更為粗大、適于吻合,加之遠(yuǎn)端壞死面積更大,便于觀察,其更適合作為大鼠背部三血管體穿支遠(yuǎn)端非生理性增壓模型。該模型構(gòu)建后證實(shí),這種非生理性增壓方式能改善穿支跨區(qū)皮瓣遠(yuǎn)端血運(yùn),促進(jìn)其存活。本組實(shí)驗(yàn)證實(shí),潛在區(qū)內(nèi)靜脈在動(dòng)脈化增壓后,choke vessel Ⅰ區(qū)的形態(tài)變化未因增壓作用而發(fā)生明顯的形態(tài)學(xué)變化。而choke vessel Ⅱ區(qū)粗大的真性吻合較對(duì)照組出現(xiàn)時(shí)間明顯提前。通過(guò)非生理性增壓方式,choke vessel Ⅱ區(qū)12h才緩慢開放,動(dòng)力區(qū)與潛在區(qū)建立血流信號(hào)連接,3天后潛在區(qū)的血流量才與近端趨于平衡。前期潛在區(qū)仍處于低灌注的狀態(tài)。特別是1天內(nèi)激光多普勒血流檢測(cè)及氧化鉛造影均證實(shí)choke vessel Ⅱ區(qū)血流灌注不佳。而通過(guò)激光多普勒血流量測(cè)量可發(fā)現(xiàn),盡管潛在區(qū)血流量較近端兩區(qū)血流量要低,但仍能明顯的改善皮瓣遠(yuǎn)端血流量。同時(shí)3h時(shí)choke vessel Ⅱ區(qū)即有明顯的血流增加�？梢娡ㄟ^(guò)開放部分細(xì)小血管即可使?jié)撛趨^(qū)增壓后血液得到回流,從解決了早期皮瓣臃腫情況、緩解皮瓣的血流瘀滯。促進(jìn)皮瓣的早期存活。這種增壓方式亦能通過(guò)血管新生,結(jié)合choke區(qū)血管重塑、擴(kuò)張,有效改善皮瓣整體血供。在這種情況下,即使增壓血管閉塞,仍能有效的維持皮瓣遠(yuǎn)端血運(yùn)。這成為皮瓣遠(yuǎn)期存活的重要機(jī)制。通過(guò)比較發(fā)現(xiàn)超引流能部分改善潛在區(qū)血流灌注,超引流能促進(jìn)皮瓣遠(yuǎn)端潛在區(qū)單一血管體內(nèi)一定區(qū)域范圍的皮瓣組織血流灌注改善,存進(jìn)一定范圍的皮瓣存活。單非整個(gè)血管體。而相較下,通過(guò)實(shí)驗(yàn)證實(shí),對(duì)皮瓣遠(yuǎn)端潛在區(qū)內(nèi)穿支靜脈的伴行靜脈進(jìn)行非生理性增壓,能獲得整個(gè)穿支體的存活。臨床工作中,其可作為存進(jìn)遠(yuǎn)端灌注的優(yōu)選術(shù)式。
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R687;R-332
【圖文】：

逑計(jì)算血管外徑寬度。即測(cè)量血管外徑寬度＋測(cè)量留置針內(nèi)芯寬度。血管測(cè)量寬度逡逑平面定于血管最擴(kuò)張?zhí)幫鈴�。（見圖１）。逡逑ＴＤＶ邐ＤＣＩＶ逡逑圖１胸背靜脈和旋髂深靜脈顯微鏡下以留置針為對(duì)照觀察（比例尺＝ｌｃｍ）逡逑１．邋１．邋３皮瓣模型制作與分組逡逑Ａ組：以胸背動(dòng)脈（ＴＤＡ／ＴＤＶ）穿支為蒂（ｎ＝６）；Ｂ組：以旋髂深動(dòng)脈（ＤＣＩＡ／ＤＣＩＶ）逡逑穿支為蒂（ｎ＝６）。隨機(jī)取健康的ＳＤ大鼠，麻醉后俯臥位固定，脫毛，消毒，鋪逡逑巾。以背部后正中線為內(nèi)側(cè)界線；旁開２．邋５ｃｍ做平行線為外側(cè)界線；兩側(cè)髂脊連逡逑線為下界線；兩側(cè)肩胛下角連線為上界線。結(jié)扎旋髂深動(dòng)靜脈（ＤＣＩＡ／ＤＣＩＶ）或逡逑胸背動(dòng)靜脈（ＴＤＡ／ＴＤＶ）及肋間動(dòng)靜脈（ＩＣＡ／ＩＣＶ），以胸背血管體（ＴＤＡ／ＴＤＶ）或逡逑旋髂深血管體（ＤＣＩＡ／ＤＣＩＶ）為蒂，分離蒂部以外組織。結(jié)扎其他血管，徹底止血。逡逑在大鼠背部形成一約１１邋Ｘ２．邋５ｃｍ大小單一血管蒂的軸型穿支皮瓣。以４－０醫(yī)用慕逡逑絲縫線，將皮瓣原位縫合。創(chuàng)面涂抹金霉素軟膏，預(yù)防術(shù)后感染。腹腔內(nèi)注射生逡逑理鹽水５０ｍｌ／ｋｇ抗休克治療。術(shù)后實(shí)驗(yàn)大鼠單籠喂養(yǎng)。逡逑１．邋１．邋４皮瓣的大體觀察逡逑術(shù)后１－７天，肉眼觀察皮瓣存活情況，包括皮瓣的顏色、組織張力、毛細(xì)血逡逑管反應(yīng)及水腫情況。逡逑１．１．５皮瓣壞死的標(biāo)準(zhǔn)及其成活率的計(jì)算逡逑皮瓣的壞死標(biāo)準(zhǔn)包括：皮瓣膚色變黑、結(jié)黑痂、質(zhì)地變硬、無(wú)明顯毛細(xì)血管逡逑反應(yīng)及切緣無(wú)明顯出血。將大鼠麻醉后，用數(shù)碼相機(jī)（佳能５Ｄ－ＩＩ、佳能ＥＦ邋２４－７０ｍｍ逡逑ｆ／２．８Ｌ邋ＵＳＭ邋鏡頭）拍攝皮瓣全面積

１．２．１鏡下ＴＤＶ和ＤＣＩＶ血管外徑與留置針內(nèi)芯比值的大小比較逡逑鏡下檢測(cè)邋ＴＤＶ邋比值為邋０．４２７±０．邋１０，ＤＣＩＶ邋比值為邋０．邋６３２±０．邋０６，邋；？＝０．邋００２，逡逑兩者間差異具有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。（見圖２）逡逑１９逡逑

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8 陳忠勇;葉祥柏;王錫華;夏來(lái)啟;沈運(yùn)彪;李金璽;;腓腸神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)血管皮瓣的臨床應(yīng)用體會(huì)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)整形外科學(xué)分會(huì)第十一次全國(guó)會(huì)議、中國(guó)人民解放軍整形外科學(xué)專業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)交流會(huì)、中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)美容專業(yè)委員會(huì)全國(guó)會(huì)議論文集[C];2011年

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10 邵洪波;姚月明;張慶富;馮建科;白永強(qiáng);王車江;李娟;;隨意皮瓣血流動(dòng)態(tài)變化的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)燒傷外科學(xué)分會(huì)2009年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 林大木;一種新的大鼠背部穿支皮瓣遠(yuǎn)端增壓模型及其與超引流作用的比較[D];山東大學(xué);2019年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前6條

1 郝麗文;帶蒂轉(zhuǎn)移穿支皮瓣遠(yuǎn)端壞死原因的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2007年

2 尹剛;堿性成纖維細(xì)胞因子促進(jìn)真皮下血管網(wǎng)皮瓣成活影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2007年

3 劉柳;負(fù)壓吸引法在靜脈淤血皮瓣動(dòng)物模型中的實(shí)驗(yàn)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2012年

4 張瑾;擴(kuò)張后胸三角皮瓣修復(fù)面頸部軟組織缺損的臨床研究[D];蘭州大學(xué);2016年

5 劉翠萍;擴(kuò)張后皮瓣縫合張力對(duì)其成活的影響[D];佳木斯大學(xué);2009年

6 劉永紅;不同位置的負(fù)壓吸引法對(duì)靜脈淤血皮瓣微血管的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

本文編號(hào)：2741931