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益氣養(yǎng)血活血法干預(yù)COPD模型大鼠的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2020-07-02 18:45
【摘要】:目的:本課題通過煙熏加脂多糖(LPS)氣管內(nèi)滴注的聯(lián)合方法復(fù)制COPD大鼠模型,以益氣養(yǎng)血活血法為指導(dǎo),選擇傳統(tǒng)方藥,分時(shí)間段對COPD大鼠模型進(jìn)行中藥干預(yù)后,檢測并分析藥物干預(yù)后各組的病理形態(tài)學(xué)變化,及肺組織勻漿中MMP-9/TIMP-1、TGF-β1、VEGF的差異,旨在進(jìn)一步探討益氣養(yǎng)血活血法及云南名中醫(yī)驗(yàn)方在不同時(shí)間段實(shí)施干預(yù)后,在改善或延緩COPD氣道重塑病理變化的作用,并闡述其機(jī)理,為益氣養(yǎng)血活血法防治COPD氣道重塑提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論依據(jù),更好的指導(dǎo)臨床防治本病。方法:1.分組:正常對照組、模型組、中藥干預(yù)組(益氣養(yǎng)血活血高、中、低劑量組、益氣活血組高、中、低劑量組、益氣養(yǎng)血組高、中、低劑量組)在0周段、4周段、8周段、12周段各有一組;陽性藥物組在4周段、8周段、12周段各有一組,共47組,每組10只大鼠,共470只大鼠。2.復(fù)制COPD大鼠模型:采用熏煙加氣管內(nèi)滴入脂多糖(LPS)的聯(lián)合方法復(fù)制COPD大鼠模型,大鼠模型復(fù)制時(shí)間分別是:0周段為28天;4周段為56天;8周段為84天;12周段為112天。3.藥物干預(yù):根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)分不同時(shí)段給予不同組別藥物干預(yù),大鼠開始給藥時(shí)間分別是:0周段從第2天開始;4周段從第29天開始;8周段從第57天開始;12周段從第85天開始。各時(shí)間段連續(xù)給藥均為28天。4.指標(biāo)檢測:(1)觀察各實(shí)驗(yàn)組大鼠的行為學(xué)變化。(2)制作肺組織病理切片,觀察鏡下肺內(nèi)細(xì)支氣管及血管周圍炎性浸潤及氣道壁結(jié)構(gòu)改變狀況等。(3)應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法,檢測COPD大鼠肺組織中MMP-9/TIMP-1、VEGF、 TGF-β1的變化。結(jié)果:1.不同時(shí)間段模型組與正常對照組大鼠各檢測指標(biāo)的變化:MMP-9/TIMP-1比值,模型組低于正常對照組;VEGF、TGF-β1濃度,模型組高于正常對照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.中藥干預(yù)COPD大鼠后各指標(biāo)的變化:2.1中藥干預(yù)COPD大鼠后MMP-9的變化:0周段、4周段、8周段中藥干預(yù)組高于模型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。12周段中藥干預(yù)組高于模型組,但YQYXHXG、YQYXG兩組與模型組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.2.中藥干預(yù)COPD大鼠后TIMP-1的變化:0周段、8周段、12周段中藥干預(yù)組高于模型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);4周段中藥干預(yù)組高于模型組,但YQHXG組與模型組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其余各組與模型組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.3中藥干預(yù)COPD大鼠后MMP-9/TIMP-1的變化:0周段、4周段、8周段、12周段各中藥干預(yù)組與模型組比較,中藥干預(yù)組MMP-9/TIMP-1比值隨著中藥劑量的降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.4中藥干預(yù)COPD大鼠后TGF-β1的變化:8周段、12周段中藥干預(yù)組高于模型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);0周段中藥干預(yù)組高于模型組,但YQYXHXG、YQYXHXZ、YQYXG、YQYXZ、YQHXG五組與模型組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其余各組與模型組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);4周段中藥干預(yù)組高于模型組,但YQYXHXG、YQYXHXZ. YQYXG、YQHXG四組與模型組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其余各組與模型組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.5中藥干預(yù)COPD大鼠后VEGF的變化:0周段、8周段、12周段中藥干預(yù)組高于模型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);4周段中藥干預(yù)組高于模型組,但YQYXHXG組與模型組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其余各組與模型組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.益氣養(yǎng)血活血法、益氣養(yǎng)血法、益氣活血法三種方法均能夠改善COPD的病變,糾正肺病變微環(huán)境中MMP-9/TIMP-1比值的偏移狀態(tài);降低TGF-β1、VEGF的濃度,減緩COPD氣道重塑病變的進(jìn)程。2.益氣養(yǎng)血活血法及云南名中醫(yī)驗(yàn)方及不同藥組的低劑量對COPD模型大鼠的干預(yù)效果更明顯,提示臨床等效劑量可有效緩解COPD氣道重塑病變的進(jìn)程;通過對四個(gè)時(shí)間段三種中藥組干預(yù)后的COPD模型大鼠各項(xiàng)指標(biāo)的統(tǒng)計(jì),并未發(fā)現(xiàn)中藥的干預(yù)效果在四個(gè)時(shí)間段上有明顯的差別。3.本研究為臨床通過益氣養(yǎng)血活血法治療COPD提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)和診療思路。
【學(xué)位授予單位】:云南中醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R259;R-332

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