【摘要】：許多實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明,表皮生長因子(EGF)信號通路在髓鞘發(fā)育以及髓鞘損傷后的修復(fù)中扮演著重要的角色,但是對其在少突膠質(zhì)細(xì)胞(OLs)的早期生成和分化中的生物學(xué)作用還不明確。在這項研究中,我們通過EGF對分離得到的限制性膠質(zhì)前體細(xì)胞(GRP)細(xì)胞的作用,來研究EGF對OLs早期發(fā)育的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)EGF可以與血小板衍生生長因子-AA(PDGFaa)共同促進(jìn)GRP細(xì)胞的存活和自我更新,但是從培養(yǎng)體系中去除血小板衍生生長因子-AA(PDGFaa)的情況下,GRP細(xì)胞則傾向于分化為O4陰性的早期少突膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞(OPCs)。而在OPCs階段,EGF與PDGFaa共同存在時可以維持細(xì)胞的O4陰性抗原表型。當(dāng)去除PDGFaa以后,EGF通過減少細(xì)胞的凋亡和擴(kuò)增成熟OLs的數(shù)量來達(dá)到促進(jìn)OPCs終末分化的作用。綜上所述,EGF對少突膠質(zhì)細(xì)胞的發(fā)育起著重要的作用。
【學(xué)位授予單位】：杭州師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R329.2
【圖文】：

14來自 E13.5 脊髓 A2B5 陽性細(xì)胞的抗原表型。（A-P）分別用 PDGFRα，表皮EGFR），Olig2 和 Nestin 抗體免疫染色 A2B5+細(xì)胞，并通過 Western 印跡確H,L,P）。（Q）陽性細(xì)胞百分比統(tǒng)計圖。們對從 E13.5 胎鼠脊髓組織分離得到的細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光和蛋白分析，檢測了 GRP 細(xì)胞標(biāo)志物包括 PDGFRa、Olig2 和 Nestin，以物 neurofilament（NF-1）和星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物 GFAP 的蛋白表了確定細(xì)胞是否能夠?qū)?EGF 產(chǎn)生響應(yīng)，同時還檢測了 EGFR。疫熒光和蛋白質(zhì)印跡法的結(jié)果顯示，分離得到的 A2B5 陽性的細(xì)

GF 對 A2B5+細(xì)胞的影響。（A）不同劑量 EGF 對 A2B5+增殖的影響。（B,C 法分析在不同因子組合下 A2B5+細(xì)胞的增殖和凋亡情況。（D）細(xì)胞培養(yǎng)在 和 EGF+PDGFaa 不同體系中次級克隆產(chǎn)生的數(shù)量。統(tǒng)計分析以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)5, P < 0.01。我們培養(yǎng) A2B5 陽性細(xì)胞 7 天時，發(fā)現(xiàn) EGF 與堿性成纖維細(xì)胞生F）一樣有效地促進(jìn)細(xì)胞增殖和存活的能力，而且 EGF 組中 d3 和性細(xì)胞的百分比高于 bFGF 組。當(dāng)用 EGF 和 Erlotinib HCl（EG同時處理 GRP 細(xì)胞時，EGF 對促進(jìn)分裂和存活的能力和空白對照異。對照組相比 T3 并沒有表現(xiàn)出促進(jìn) A2B5 陽性細(xì)胞的增殖的能力，細(xì)胞的凋亡，這種效果可能是通過促進(jìn)細(xì)胞向 OLs 分化達(dá)到的。結(jié)果，可以發(fā)現(xiàn) EGF 在促進(jìn) GRP 細(xì)胞增殖的同時可以減少其凋亡a 共同存在時這種效果會更加明顯。

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