【摘要】：第一部分沙利度胺對系統(tǒng)性硬化病模型小鼠炎癥及纖維化病理改變的影響目的:研究沙利度胺(Thal)對系統(tǒng)性硬化病(SSc)模型小鼠皮膚及肺組織炎癥和纖維化等病理改變的影響。方法:將80只雌性BALB/c小鼠隨機(jī)分為14天組和28天組(n=40),采用博來霉素(BLM)皮下注射方法誘導(dǎo)SSc小鼠模型,分別以10、20、30mg/kg/d劑量的Thal灌胃治療,各組小鼠在灌胃第14、28天進(jìn)行取材檢測。HE和Masson’s染色觀察小鼠背部注射部位皮膚、肺炎癥和纖維化評分,并測定羥脯氨酸(HYP)的含量;Rt-PCR法及免疫組化法檢測皮膚、肺組織I型膠原的表達(dá)情況。結(jié)果:(1)14天組和28天組Thal均能不同程度降低SSc小鼠模型皮膚、肺組織的炎癥評分,其中14天組皮膚F值=23.867,P0.05、肺組織F值=47.811,P0.05,28天組皮膚F值=34.412,P0.05、肺組織F值=45.953,P0.05;(2)14天組和28天組Thal均能不同程度降低SSc小鼠模型皮膚、肺組織的纖維化程度,其中14天組皮膚F值=37.698,P0.05、肺組織F值=65.500,28天組皮膚F值=72.906,P0.05、肺組織F值=35.498,P0.5;(3)14天組和28天組Thal均能不同程度降低SSc小鼠模型皮膚、肺組織的羥脯氨酸含量,其中14天組皮膚F值=5.834,肺組織F值=3.986,P0.05P0.05,28天組皮膚F值=3.631,P=0.045,肺組織F值=6.631,P=0.007;(4)14天組和28天組組間比較發(fā)現(xiàn)皮膚厚度、炎癥評分在10mg/Kg/d Thal灌胃治療時(shí)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.039),而肺纖維化程度、炎癥評分差異僅在30mg/Kg/d Thal灌胃治療時(shí)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.022);(5)28天組Thal能夠以劑量依賴性的方式降低肺組織I型膠原m RN A的表達(dá),而Thal 20、30(mg/kg/d)治療時(shí)能夠降低皮膚I型膠原m RN A表達(dá)(P0.01);(6)28天組Thal能夠以劑量依賴性的方式降低皮膚和肺組織I型膠原蛋白的表達(dá),但在Thal20、30(mg/kg/d)治療劑量下下調(diào)作用更強(qiáng)(P0.05)。結(jié)論:Thal治療能夠有效減輕SSc小鼠模型皮膚和肺組織炎癥、纖維化病變,并能夠降低皮膚和肺組織中羥脯氨酸的含量,抑制皮膚和肺組織I型膠原的表達(dá)。因此,我們推測Thal可能是治療SSc患者的一種經(jīng)濟(jì)、安全有效的藥物。第二部分沙利度胺對系統(tǒng)性硬化病模型小鼠CD4+Th細(xì)胞以及TGF-β1/Smad3通路的影響目的:觀察不同劑量沙利度胺(Thal)治療前后對系統(tǒng)性硬化病(SSc)小鼠模型Th1細(xì)胞、Th2細(xì)胞、Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞以及相關(guān)因子水平和TGF-β1/Smad3通路的影響。方法:將80只雌性BALB/c小鼠隨機(jī)分為14天組和28天組(n=40),采用博來霉素(BLM)皮下注射方法誘導(dǎo)SSc小鼠模型,分別以10、20、30mg/kg/d劑量的Thal灌胃治療,各組小鼠在灌胃第14、28天進(jìn)行取材檢測。流式細(xì)胞術(shù)檢測小鼠脾組織CD4+IL-4+(Th1)細(xì)胞、CD4+IFN-γ+(Th2)細(xì)胞、CD4+IL-17+(Th17)細(xì)胞以及CD4+CD25+Foxp3+(Treg)細(xì)胞的比例;RT-PCR、免疫組化、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等方法檢測外周血、皮膚、肺組織中白介素(IL-)17A、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)-β1、叉頭狀轉(zhuǎn)錄因子(Foxp3)、磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)因子3(p-Smad3)表達(dá)情況,進(jìn)而評估SSc模型小鼠炎癥、纖維化病變的發(fā)生機(jī)制;蛋白免疫印跡方法檢測TGF-β1/Smad3信號通路蛋白表達(dá)及磷酸化水平,并分析與Th17、Treg及其相關(guān)細(xì)胞因子的相關(guān)性。結(jié)果:(1)14天組和28天組中Thal均能下調(diào)脾臟Th17細(xì)胞,上調(diào)Treg細(xì)胞(均P0.05),其中28天組中Thal 30(mg/kg/d)劑量治療下能夠?qū)h17細(xì)胞比例降低到NC組水平;(2)14天組和28天組中Thal均能以劑量依賴性的方式下調(diào)皮膚和肺組織細(xì)胞因子IL-17Am RNA的表達(dá)(均P0.05),上調(diào)轉(zhuǎn)錄因子Foxp3m RNA的表達(dá)(均P0.05);(3)14天和28天組組間對比發(fā)現(xiàn)皮膚、肺Foxp3 m RNA表達(dá)量、皮膚IL-17A m RNA表達(dá)量在30mg/Kg/d Thal灌胃治療時(shí)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.035,P=0.009,P=0.022),而肺IL-17A m RNA表達(dá)量在20mg/Kg/d Thal灌胃治療時(shí)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.005);(4)Thal以劑量依賴性的方式上調(diào)CD4+IL-4+(Th1)細(xì)胞以及細(xì)胞因子IFN-γm RNA細(xì)胞的表達(dá)(均P0.05),下調(diào)CD4+IFN-γ(Th2)細(xì)胞的表達(dá)(P0.05);(5)Thal以劑量依賴性的方式降低皮膚和肺組織IL-23R m RNA和RORgt m RNA的表達(dá),相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)皮膚中IL-23R m RNA和RORgt m RNA以及肺RORgt m RNA水平與Th17呈正相關(guān)(r=0.9502,0.5664和0.7564,P0.05);(6)Thal能夠抑制TGF-β1/Smad3通路中TGF-β1、p-Smad3蛋白及TGF-β1 m RNA、p-Smad3 m RNA的表達(dá)(均P0.05);(7)相關(guān)性分析表明TGF-β1 m RNA與皮膚和肺組織IL-17A m RNA及IL-17A蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)(r值分別為0.7280、0.6408,均P0.01),而與肺組織Foxp3 m RNA呈負(fù)相關(guān)(r=-0.3110,P=0.014);皮膚、肺組織以及血清中TGF-β1蛋白表達(dá)水平與IL-17A蛋白表達(dá)水平呈正相關(guān)(r值分別為0.8153、0.7187,均P0.01);血清中TGF-β1含量與脾臟中Th17/Treg呈正相關(guān)(r=0.6366,P=0.0107);結(jié)論:(1)Thal能夠下調(diào)Th17細(xì)胞比例及細(xì)胞因子IL-17A的表達(dá),上調(diào)Treg細(xì)胞比例及其轉(zhuǎn)錄因子Foxp3的表達(dá),降低Th17/Treg比值;(2)Thal處理可上調(diào)Foxp3的表達(dá),促進(jìn)其與RORgt的結(jié)合,從而抑制Th17細(xì)胞的增殖和功能;(3)Thal處理可以增加Th1細(xì)胞及細(xì)胞因子IFN-γ水平,但減少Th2細(xì)胞水平;(4)Thal治療可以抑制TGF-β1/Smad3信號通路的激活,從而預(yù)防纖維化病變。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R593.2;R-332
【圖文】：

.4Thal 對 BLM 誘導(dǎo)的 SSc 模型小鼠皮膚、肺組織 I 型膠原蛋白含量的影響通過采用免疫組化法對 28 天組皮膚和肺組織 I 型膠原蛋白表達(dá)情況進(jìn)分析，研究結(jié)果顯示 Thal 能夠以劑量依賴性的方式下調(diào)皮膚和肺組織 I膠原的表達(dá)，但在 20、30（mg/kg/d）Thal 劑量下下調(diào)作用更強(qiáng)（圖 2-4， P＜0.05）NC BLM BLM+Thal(10) BLM+Thal(20) BLM+Thal(30)ANC BLM BLM+Thal(10) BLM+Thal(20) BLM+Thal(30)

9屆碩士研究生學(xué)位論文 沙利度胺對系統(tǒng)性硬化病模型小鼠炎癥及纖維化病變 染色(原始放大倍數(shù)*200)；B ：Masson 染色(原始放大倍數(shù)*200)。igure 3-1 Effect of Thal on pathological manifestations of the skin and lung in a mouse model of the end of the treatment, the skin and lung tissues were taken for HE & Masson staining.HE staining (original magnification × 200); B: Masson staining (original magnification × 200)。

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陳明明;;沙利度胺在腫瘤治療中的應(yīng)用及進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐;2019年12期

2 楊海青;邱發(fā)麒;;沙利度胺對老年急性髓系白血病患者血清堿性成纖維細(xì)胞生長因子、血管內(nèi)皮生長因子水平的影響[J];中國老年學(xué)雜志;2018年24期

3 楊麗萍;侯俊德;劉凌凌;馬建彩;王玉紅;孟慧芳;;沙利度胺對宮頸癌裸鼠移植瘤的放療增敏作用及其機(jī)制研究[J];浙江醫(yī)學(xué);2019年09期

4 步云文;;三氧化二砷聯(lián)合沙利度胺治療中危-1型骨髓增生異常綜合征療效觀察[J];濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2016年04期

5 黃海寧;張雁芳;龍超良;李春悅;龍學(xué)輝;崔文玉;張浩;汪海;;一種用于篩選具有抗腫瘤活性的沙利度胺衍生物分子平臺(tái)的建立[J];國際藥學(xué)研究雜志;2015年02期

6 張一卓;李睿;;沙利度胺治療腫瘤相關(guān)厭食癥的臨床研究[J];菏澤醫(yī)學(xué)�？茖W(xué)校學(xué)報(bào);2015年03期

7 黃娟娟;;沙利度胺的好壞與對錯(cuò)[J];中南藥學(xué)(用藥與健康);2017年06期

8 陳公琰;王磊;;沙利度胺—絕境逢生的科學(xué)故事[J];腫瘤代謝與營養(yǎng)電子雜志;2014年02期

9 趙洪波;崔鶴仙;李焱;索曉慧;;小劑量沙利度胺聯(lián)合治療骨髓增生異常綜合征療效觀察[J];中國誤診學(xué)雜志;2012年03期

10 阮力;聞維;向群;;沙利度胺治療難治性多發(fā)性骨髓瘤1例并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2012年15期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 趙曉萌;李艷;;烏苯美司聯(lián)合沙利度胺治療復(fù)發(fā)難治性多發(fā)性骨髓瘤的療效觀察[A];全國中西醫(yī)結(jié)合血液學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

2 壽黎紅;張慧英;曹丹;;小劑量沙利度胺、吡柔比星和地塞米松治療老年初發(fā)多發(fā)性骨髓瘤[A];2012年浙江省血液病學(xué)年會(huì)論文集[C];2012年

3 王雨娟;李新宇;鄭家潤;;沙利度胺作用機(jī)制探討[A];中國制藥工業(yè)藥理學(xué)會(huì)20周年學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2002年

4 楊文博;孔佩艷;;沙利度胺的作用機(jī)制研究進(jìn)展[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國血液學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

5 吳樹瀅;;沙利度胺治療白塞氏病的新進(jìn)展[A];2015全國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2015年

6 王玲;;口服沙利度胺引起泌乳1例[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

7 代杰文;趙彥;陳啟銘;沈國芳;;沙利度胺導(dǎo)致兔胚胎面部出血及繼發(fā)下頜骨發(fā)育不足的病理學(xué)觀察[A];2018全國口腔生物醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2018年

8 李玉富;張艷莉;徐本玲;杜建偉;張麗娜;岳寒;左文麗;朱興虎;呂璐璐;房伯俊;呂曉東;魏旭東;宋永平;;沙利度胺在血液腫瘤的機(jī)制和臨床應(yīng)用[A];第十次全國淋巴瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

9 劉少君;劉林湘;萬鼎銘;王桂菊;劉延芳;謝新生;;沙利度胺治療難治性多發(fā)性骨髓瘤的臨床觀察[A];第一屆全國難治性淋巴瘤學(xué)術(shù)研討會(huì)暨第二屆全國多發(fā)性骨髓瘤學(xué)術(shù)研討會(huì)（國家級血液系統(tǒng)惡性腫瘤繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育學(xué)習(xí)班）繼續(xù)教育集[C];2007年

10 王琳;黃瑛;周穎;梁英杰;;沙利度胺治療兒童克羅恩病的臨床療效及機(jī)制研究[A];第十屆全國兒童消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2014年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 山東大學(xué)齊魯醫(yī)院血液科 馬驥 彭軍 侯明;免疫性血小板減少癥 沙利度胺可以用[N];健康報(bào);2013年

2 編譯 許關(guān)煜 李敏華;沙利度胺的重生和來世[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2013年

3 安明榜;老藥掘金[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2009年

4 李勇　譯;研究證實(shí)沙利度胺可用于治療出血性血管疾病[N];中國醫(yī)藥報(bào);2010年

5 陳立慧邋李電東;沙利度胺及其衍生物重放異彩[N];中國醫(yī)藥報(bào);2007年

6 雷諾島;沙利度胺“縮水”,硼替佐米“躍升”[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2011年

7 陶春祥;沙利度胺治療多發(fā)性骨髓瘤[N];中國醫(yī)藥報(bào);2004年

8 Ben Adams 編譯 邵建國;新基涉嫌違法營銷沙利/來那度胺[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2014年

9 雷諾島;老藥新用：意料中的驚喜[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2014年

10 Annika Breidthardt　編譯 王迪;受害方：道歉太少太遲[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2012年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 宋家凜;腹腔注射沙利度胺通過抑制小鼠血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)可緩解早期骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)展[D];南方醫(yī)科大學(xué);2018年

2 王根和;沙利度胺逆轉(zhuǎn)晚期非小細(xì)胞肺癌一代EGFR-TKI獲得性耐藥的臨床研究及機(jī)制探討[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2018年

3 安倩;沙利度胺對角質(zhì)形成細(xì)胞OSMR相關(guān)通路干預(yù)作用的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2018年

4 盧潔;人MDS荷瘤小鼠模型的建立及砷劑、沙利度胺在荷瘤小鼠體內(nèi)抗瘤作用與機(jī)制的研究[D];浙江大學(xué);2005年

5 王雨娟;沙利度胺等非經(jīng)典抗炎藥物作用機(jī)制研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2003年

6 劉愛京;沙利度胺對膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎大鼠VEGF、TNF-α表達(dá)及紅細(xì)胞生成的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2007年

7 王婧;茶多酚抗肺癌效應(yīng)及抗肺癌血管生成相關(guān)信號通路研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2013年

8 霍愛紅;穩(wěn)定的CPS11衍生物的臨床前預(yù)研究[D];天津大學(xué);2012年

9 鄧書會(huì);多發(fā)性骨髓瘤伴髓外病變臨床研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

10 鄭文利;難治少見惡性血液�。ǜ呶９撬柙錾惓＞C合征：淋巴瘤并中樞性尿崩癥）的個(gè)體化診斷及治療研究[D];中南大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 魯伊;沙利度胺對系統(tǒng)性硬化病模型小鼠炎癥和纖維化病變的影響[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2019年

2 方棟;沙利度胺對體外培養(yǎng)的人紅系細(xì)胞γ-珠蛋白基因表達(dá)的作用及調(diào)控機(jī)制的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2019年

3 李云雙;中間型β地貧治療現(xiàn)狀和沙利度胺治療臨床觀察[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2018年

4 許陽;沙利度胺聯(lián)合EGFR酪氨酸激酶抑制劑—埃克替尼協(xié)同抑制非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的體內(nèi)外研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2018年

5 高紅亮;沙利度胺抗LPS誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞損傷效應(yīng)及其初步機(jī)制[D];皖南醫(yī)學(xué)院;2018年

6 賀棟;低劑量沙利度胺聯(lián)合方案治療多發(fā)性骨髓瘤的臨床療效分析及沙利度胺維持治療自體造血干細(xì)胞移植后多發(fā)性骨髓瘤的Meta分析[D];南昌大學(xué);2018年

7 王鵬程;沙利度胺聯(lián)合抗組胺藥物及外用藥治療難治性濕疹的療效觀察[D];青海大學(xué);2018年

8 孫倩倩;沙利度胺聯(lián)合化療治療惡性胸腹腔積液的療效及安全性的Meta分析[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2018年

9 高超;糖尿病腎病轉(zhuǎn)錄水平基因表達(dá)特征以及沙利度胺的干預(yù)作用研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2018年

10 趙亮;沙利度胺聯(lián)合地塞米松治療系統(tǒng)性輕鏈淀粉樣變性的療效[D];南京大學(xué);2017年

本文編號：2727509