【摘要】：先天免疫是保護(hù)宿主細(xì)胞遠(yuǎn)離病原微生物的第一道防線。目前已知三種模式識(shí)別受體PRRs(pattern recognition receptors)能識(shí)別微生物及病毒組分,包括NLRs(NOD like receptors)、RLRs(RIG-I like receptors)和TLRs(Toll like receptors)。其中,RLRs是識(shí)別病毒RNA的重要胞漿受體。病毒感染細(xì)胞后,RIG-I(retinoic acid-induced gene I)識(shí)別病毒RNA,導(dǎo)致RIG-I受體自身構(gòu)象變化而活化,活化的RIG-I結(jié)合下游重要的接頭蛋白VISA(Virus-induced signaling adaptor),轉(zhuǎn)導(dǎo)下游的抗病毒先天免疫信號(hào)。VISA一方面可以通過(guò)激活I(lǐng)KKα/β/γ(inhibitor of nuclear factor kappa-B kinaseα/β/γ)來(lái)介導(dǎo)NF-κB(nuclear factor kappa B)的激活,另一方面通過(guò)自身的TRAF結(jié)合域,與轉(zhuǎn)位到線粒體上的TRAF(tumor necrosis factor receptor-associated factor)蛋白結(jié)合形成VISA-TRAF復(fù)合物,隨后招募TBK1(TANK-binding kinase 1)和IKKε(IkB kinase-ε)來(lái)促進(jìn)IRF3(interferon regulatory factor 3)和IRF7(interferon regulatory factor 7)的磷酸化。磷酸化的IRF3和IRF7因?yàn)樽陨淼耐炊刍饔棉D(zhuǎn)位進(jìn)入細(xì)胞核并分別與IFN-β(interferon-β)和IFN-α(interferon-α)的啟動(dòng)子特定區(qū)域結(jié)合來(lái)激起I型干擾素表達(dá)。VISA介導(dǎo)的I型干擾素產(chǎn)生在抗病毒先天免疫中起至關(guān)重要的作用,但是關(guān)于VISA介導(dǎo)的抗病毒調(diào)控仍有許多未知之處。我們的研究證實(shí)在293T細(xì)胞中過(guò)表達(dá)RACK1能夠抑制RIG-I、VISA和TBK1介導(dǎo)的IRF3轉(zhuǎn)錄因子活化,抑制仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)的IFN-β啟動(dòng)子、ISRE及NF-κB的激活。而siRNA敲減RACK1的表達(dá)增強(qiáng)RIG-I/VISA介導(dǎo)和病毒誘導(dǎo)的這種抗病毒信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,RACK1特異性地與VISA相互作用,過(guò)表達(dá)RACK1遏制VISA-TRAF2、VISA-TRAF3和VISA-TRAF6復(fù)合物的形成。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),RACK1能增強(qiáng)VISA K48-linked泛素化,減弱其K63-linked泛素化,負(fù)調(diào)控VISA介導(dǎo)的抗病毒信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。這些結(jié)果共同表明,RACK1通過(guò)與VISA相互作用,調(diào)節(jié)VISA的泛素化修飾,阻礙VISA招募下游不同TRAF蛋白,抑制病毒誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄因子IRF3的活化,負(fù)調(diào)控病毒誘導(dǎo)的I型干擾素IFN-β的產(chǎn)生。
【圖文】：

故而命名為視黃酸誘導(dǎo)基因 Ⅰ，只是當(dāng)時(shí)人們并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)其具備識(shí)別病毒雙鏈 RNA 的功能，直到后來(lái)，日本的研究者闡明了 RIG-I 的結(jié)構(gòu)，研究證實(shí) RIG-I 是一個(gè)胞質(zhì)受體，能夠激活 I 型干擾素的產(chǎn)生。RIG-I 蛋白全長(zhǎng)由 925 個(gè)氨基酸組成，C 端是 RNA 結(jié)合結(jié)構(gòu)域 (C-terminal domain，CTD)和抑制結(jié)構(gòu)域 (repressor domain，RD)，N 端有兩個(gè) CARD 結(jié)構(gòu)域，中間是DECH-box 解旋酶結(jié)構(gòu)域 (見(jiàn)圖 1-1)。無(wú)病毒感染狀態(tài)下，DECH-box 解旋酶結(jié)構(gòu)域被掩蓋而沒(méi)有活性。在無(wú)病毒 dsRNA 激活的情況下，RIG-I 樣受體中串聯(lián)的 CARD 域與其解旋酶結(jié)構(gòu)域和 CTD 接觸，維持 RIG-I 的自動(dòng)抑制狀態(tài)，這種構(gòu)象在空間上阻止 CARD 與多聚泛素蛋白或其他分子結(jié)合。當(dāng)細(xì)胞受到病毒感染后，，RIG-I 的 CTD 將識(shí)別并結(jié)合病毒 RNA, 導(dǎo)致 RIG-I 空間構(gòu)象發(fā)生改變，使 DECH-box 解旋酶結(jié)構(gòu)域暴露，從而結(jié)合并水解 ATP, 增強(qiáng)RIG-I 結(jié)合病毒 RNA 的能力。同時(shí)，RIG-I 發(fā)生二聚化或寡聚化使活化的CARD 結(jié)構(gòu)域發(fā)揮效應(yīng)，與同型結(jié)構(gòu)域產(chǎn)生相互作用招募下游接頭蛋白激活信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)[17]。

碩士學(xué)位論文能相類似，能夠誘導(dǎo) I 型干擾素的產(chǎn)生。但不同的是，RIG-I 的 C 端的 735 到925 位氨基酸序列部分是 RD 區(qū)域，在沒(méi)有病毒的情況下抑制 RIG-I 的激活，而 MDA5 的 C 端沒(méi)有這段抑制功能的區(qū)間[19]。LGP2 全長(zhǎng)有 678 個(gè)氨基酸，結(jié)構(gòu)上來(lái)看，它完全沒(méi)有 CARD 結(jié)構(gòu)域，只有 RNA 解旋酶結(jié)構(gòu)域和 RNA 結(jié)合結(jié)構(gòu)域。一般認(rèn)為，LGP2 能顯著負(fù)調(diào)控 RIG-I/MDA5 介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，但是關(guān)于 LGP2 是識(shí)別病毒入侵的研究仍舊較少，相關(guān)功能也有待進(jìn)一步研究[20]。
【學(xué)位授予單位】：江西師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R392

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 謝韜;RACK1通過(guò)靶定VISA負(fù)調(diào)控RLR-VISA抗病毒信號(hào)通路[D];江西師范大學(xué);2019年

2 何天生;HAUS8通過(guò)靶定VISA正調(diào)控RLR-VISA抗病毒信號(hào)通路[D];江西師范大學(xué);2017年

本文編號(hào)：2695870