【摘要】：造血系統(tǒng)發(fā)育是胚胎發(fā)育的重要環(huán)節(jié),其發(fā)育異常會(huì)導(dǎo)致造血功能紊亂,人類許多疾病的發(fā)生與造血系統(tǒng)發(fā)育異常密切相關(guān)。血細(xì)胞來(lái)源于血液祖細(xì)胞,后者起源于胚胎發(fā)育階段的中胚層,其進(jìn)一步發(fā)育可產(chǎn)生原始血細(xì)胞與造血干細(xì)胞。原始血細(xì)胞參與初級(jí)造血,造血干細(xì)胞則調(diào)控定向造血分化產(chǎn)生成熟的各系血細(xì)胞。造血系統(tǒng)的正常發(fā)育依賴于一個(gè)復(fù)雜的分子信號(hào)調(diào)控網(wǎng)絡(luò),這其中任何關(guān)鍵分子出現(xiàn)調(diào)控異常都可能導(dǎo)致嚴(yán)重的發(fā)育缺陷。研究相關(guān)分子的具體作用和調(diào)控機(jī)制對(duì)于理解血液發(fā)育過(guò)程的分子信號(hào)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)十分重要,也可為深入了解造血系統(tǒng)發(fā)育異常所導(dǎo)致的相關(guān)疾病發(fā)病機(jī)制、探究有效的治療方案提供新的分子靶點(diǎn)。第一部分Cul4a促進(jìn)斑馬魚初級(jí)造血紅系發(fā)育斑馬魚是研究造血系統(tǒng)發(fā)育的理想模型。為探究Cul4a在造血系統(tǒng)發(fā)育中的作用,我們首先分析了 Cul4a在斑馬魚胚胎發(fā)育早期的時(shí)空表達(dá)譜,并利用Morpholino和CRISPR/Cas9技術(shù)在胚胎中敲低或敲除cul4a基因,初步探究cul4a對(duì)初級(jí)造血紅系、髓系發(fā)育及定向造血的影響,取得了以下研究結(jié)果:(1)收取受精后不同時(shí)間點(diǎn)(單細(xì)胞期、胚盾期、6體節(jié)期、受精后24小時(shí)及受精后48小時(shí))的斑馬魚胚胎,采用整胚原位雜交(whole-mount situ hybridization,WISH)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)cul4a在胚胎發(fā)育早期全身廣泛性表達(dá),且在初級(jí)造血發(fā)育的關(guān)鍵部位——受精后12小時(shí)(12 hours post fertilization,12 hpf)的胚胎后部側(cè)板中胚層(posterior lateral plate mesoderm,PLPM)及 24 hpf 的中間細(xì)胞團(tuán)(Intermediate cell mass,ICM)有明顯高表達(dá),這為cul4a參與調(diào)控初級(jí)造血系統(tǒng)發(fā)育提供了必要前提,提示cul4a可能在斑馬魚胚胎初級(jí)造血系統(tǒng)的發(fā)育中發(fā)揮重要功能。(2)本課題組前期已經(jīng)明確斑馬魚cul4在進(jìn)化上高度保守,敲低cwl4a基因?qū)е滦呐K及胸鰭發(fā)育異常,而cul4b基因不具有明確的生物學(xué)功能。為明確cul4a是否在造血系統(tǒng)尤其是初級(jí)造血中發(fā)揮作用,我們采用Morpholino技術(shù)敲低cul4a基因表達(dá),分析其功能喪失條件下在斑馬魚胚胎早期造血系統(tǒng)發(fā)育的表型。普通光學(xué)顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn),敲低cul4a的胚胎胸前循環(huán)區(qū)的血細(xì)胞較對(duì)照數(shù)目明顯減少。鄰聯(lián)茴香胺(o-dianisidine)染色顯示敲低cul4a后血紅蛋白表達(dá)明顯減少,WISH 及實(shí)時(shí)熒光定量 PCR(quantative real-time PCR,qRT-PCR)結(jié)果顯示紅細(xì)胞特異性標(biāo)記物hbbe3表達(dá)量也顯著降低。拯救實(shí)驗(yàn)表明cul4a mRNA能夠有效拯救這種異常表型,說(shuō)明紅細(xì)胞減少確實(shí)是由敲低cul4a導(dǎo)致的特異性表型。接下來(lái),WISH、qRT-PCR檢測(cè)基因表達(dá)以及Tg(gata1:EGFP)轉(zhuǎn)基因斑馬魚在體熒光實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)紅系前體細(xì)胞標(biāo)記物gatal隨著cul4a敲低而表達(dá)降低。外源性gata1 mRNA能夠有效拯救cul4a敲低導(dǎo)致的上述異常表型。另一方面,WISH及qRT-PCR檢測(cè)初級(jí)造血髓系標(biāo)記物pw.1、mpo及定向造血標(biāo)記物runx1、cmyb的表達(dá)情況,發(fā)現(xiàn)它們均不受cul4a敲低影響。這說(shuō)明敲低cul4a會(huì)導(dǎo)致斑馬魚胚胎紅細(xì)胞數(shù)目明顯減少,初級(jí)造血紅系發(fā)育缺陷,但不影響初級(jí)造血髓系發(fā)育及定向造血。由于Morpholino會(huì)引起細(xì)胞凋亡等非特異性表型,且斑馬魚抗體匱乏導(dǎo)致其監(jiān)測(cè)手段的局限性,我們應(yīng)用CRISPR/Cas9技術(shù)對(duì)斑馬魚cul4a及cul4b基因做了敲除。采用優(yōu)化的四條高效sgRNA聯(lián)合共注射的方法得到cul4a、cul4b單敲及cul4a/cul4b雙敲的基因突變純合子胚胎,分析cul4a及cul4b對(duì)斑馬魚胚胎早期造血系統(tǒng)發(fā)育的影響。o-dianisidine染色檢測(cè)顯示cul4a單敲或者cul4a/cul4b雙敲均導(dǎo)致血紅蛋白表達(dá)明顯減少,WISH及qRT-PCR結(jié)果顯示紅細(xì)胞特異性標(biāo)記物hbbe3表達(dá)量也顯著降低。拯救實(shí)驗(yàn)顯示這種異常表型能夠被cul4a mRNA有效拯救,說(shuō)明敲除cul4a基因?qū)е铝松鲜鎏禺愋员硇�。與此同時(shí),cul4a、cul4b單敲及cul4a/cul4b雙敲均不影響pu.1及runx1表達(dá)。該體系中,cul4b基因單敲的斑馬魚胚胎沒(méi)有出現(xiàn)明顯異常表型。綜上,本部分結(jié)果表明Cul4a對(duì)紅系前體細(xì)胞標(biāo)記基因gata1存在調(diào)控作用,參與調(diào)節(jié)斑馬魚初級(jí)造血紅系發(fā)育,但對(duì)初級(jí)造血髓系發(fā)育及定向造血沒(méi)有影響。此外,與之前研究成果相一致,斑馬魚cul4b在胚胎造血系統(tǒng)發(fā)育過(guò)程中沒(méi)有表現(xiàn)出明確的生物學(xué)功能,也不能代償cul4a功能。第二部分 Cul4a調(diào)控血液祖細(xì)胞正常分化第一部分的研究結(jié)果說(shuō)明Cul4a對(duì)于斑馬魚初級(jí)造血紅系發(fā)育至關(guān)重要,敲低cul4a導(dǎo)致紅細(xì)胞顯著減少。那么,Cul4a特異性調(diào)控初級(jí)造血紅系發(fā)育的具體機(jī)制是什么?為何對(duì)髓系發(fā)育及定向造血沒(méi)有影響?為了回答這些問(wèn)題,結(jié)合紅細(xì)胞分化發(fā)育過(guò)程,我們從三方面對(duì)Cul4a參與調(diào)控初級(jí)造血紅系發(fā)育的可能機(jī)制進(jìn)行了分析:(1)利用磷酸化組蛋白H3特異性抗體進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色,結(jié)果發(fā)現(xiàn)cul4a敲低組胚胎ICM區(qū)域的增殖細(xì)胞數(shù)目與對(duì)照相比沒(méi)有顯著性差異,這說(shuō)明敲低cul4a對(duì)紅系發(fā)育的影響可能不是通過(guò)影響初級(jí)造血細(xì)胞的增殖;(2)有文獻(xiàn)報(bào)道,注射Morpholino會(huì)激活斑馬魚中的p53通路,誘發(fā)細(xì)胞凋亡。為了排除這種非特異性因素的干擾,我們首先用Western Blot和qRT-PCR檢測(cè)cul4a-MO注射組與CoMO注射組胚胎的p53表達(dá)量,發(fā)現(xiàn)其在蛋白及RNA水平表達(dá)無(wú)差異。接著利用TUNEL染色對(duì)胚胎細(xì)胞凋亡情況進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)ICM區(qū)的細(xì)胞凋亡數(shù)目在cul4a敲低組與CoMO對(duì)照組之間沒(méi)有顯著性差異,這說(shuō)明敲低cul4a不影響初級(jí)造血細(xì)胞的凋亡水平;(3)造血系統(tǒng)發(fā)育過(guò)程中血液祖細(xì)胞具有多向分化潛能,既然cul4a不影響紅系細(xì)胞的增殖及凋亡水平,那么是否影響了血液祖細(xì)胞的分化?cul4a基因表達(dá)水平的變化是否影響血液祖細(xì)胞內(nèi)部決定不同命運(yùn)轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)?我們首先利用WISH及qRT-PCR檢測(cè)初級(jí)造血細(xì)胞形成的最早標(biāo)記物scl,結(jié)果發(fā)現(xiàn)敲低cul4a導(dǎo)致scl在胚胎6體節(jié)期及24 hpf的ICM區(qū)表達(dá)量均顯著降低。這說(shuō)明敲低cul4a導(dǎo)致初級(jí)造血細(xì)胞分化起始便出現(xiàn)了異常。同時(shí),另一血液祖細(xì)胞標(biāo)記物lmo2也隨cul4a敲低而表達(dá)降低。有文獻(xiàn)報(bào)道scl兩個(gè)轉(zhuǎn)錄本scl-α與scl-β在初級(jí)造血及定向造血發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮不同功能。由于敲低cul4a表現(xiàn)出紅系特異性表型,我們用qRT-PCR方法檢測(cè)敲低cul4a后斑馬魚胚胎scl-α及scl-β表達(dá)水平變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)注射cul4a-MO后scl-α mRNA水平明顯降低,而scl-β mRNA水平?jīng)]有變化,這提示我們Cul4a可能特異性影響scl-α轉(zhuǎn)錄本表達(dá)。接著我們用外源性scl-α及scl-β mRNA對(duì)cul4a敲低異常表型進(jìn)行拯救。WISH及qRT-PCR檢測(cè)血紅蛋白及紅系標(biāo)記物hbbe3表達(dá)量,發(fā)現(xiàn)只有scl-αmRNA能夠明顯恢復(fù)其表達(dá)水平,而scl-β沒(méi)有拯救功能,這說(shuō)明Cwl4a對(duì)scl-α有特異性調(diào)控作用。在cul4a單敲及cul4a/cul4b雙敲胚胎中我們也發(fā)現(xiàn)scl及l(fā)mo2表達(dá)量均顯著降低,而在cul4b單敲胚胎中表達(dá)沒(méi)有變化。有意思的是,我們還發(fā)現(xiàn)lmo2在cul4a敲低后表現(xiàn)的表達(dá)下調(diào)同樣能夠被scl-α mRNA有效拯救。本部分結(jié)果說(shuō)明在斑馬魚初級(jí)造血系統(tǒng)發(fā)育的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中,cul4a處于早期造血標(biāo)記物scl上游,cul4a通過(guò)特異性調(diào)控scl-α影響初級(jí)造血祖細(xì)胞的正常分化,進(jìn)而參與紅系發(fā)育過(guò)程的調(diào)控。第三部分Cul4a調(diào)控scl和gata1基因表達(dá)的分子機(jī)制本課題組前期研究顯示Cul4a可以直接結(jié)合于Tbx5基因的啟動(dòng)子區(qū)域?qū)崿F(xiàn)對(duì)其表達(dá)的調(diào)控。為明確Cul4a調(diào)控scl-α表達(dá)的分子機(jī)制,我們利用斑馬魚整胚染色質(zhì)免疫共沉淀(whole embryos chromatin immunoprecipitation,E-ChIP)方法分析Cul4a在%scl--α啟動(dòng)子區(qū)的結(jié)合情況。我們?cè)趕cl-α轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游-2000 bp～+200 bp之間設(shè)計(jì)了 6對(duì)引物,利用Cul4a抗體進(jìn)行了 E-ChIP實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)Cul4a可以結(jié)合于scl-α轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游-1643 bp～-1143 bp區(qū)域,同時(shí)該區(qū)域三甲基化修飾的組蛋白H3K4(H3K4me3)明顯富集,并且當(dāng)cwl4a低表達(dá)時(shí)H3K4me3水平也隨之明顯降低。這些結(jié)果說(shuō)明Cul4a結(jié)合在scl-α基因啟動(dòng)子區(qū)域,可能通過(guò)促進(jìn)H3K4三甲基化修飾對(duì)scl-α基因發(fā)揮轉(zhuǎn)錄激活功能,進(jìn)而調(diào)控初級(jí)造血紅系發(fā)育。敲低cwl4a導(dǎo)致scl及gata1表達(dá)量降低,而pu.1表達(dá)沒(méi)有變化。Cul4a表現(xiàn)出對(duì)紅系的特異性調(diào)控功能。為確定cwl而是否直接調(diào)控紅系特異性轉(zhuǎn)錄因子gata1,我們?cè)趃ata1轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游-2000 bp～+200 bp之間設(shè)計(jì)了 7對(duì)引物,利用Cul4a及H3K4me3抗體進(jìn)行了 E-ChIP實(shí)驗(yàn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)Cul4a可以結(jié)合于gata1轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游-1059 bp～-538 bp區(qū)域,同樣檢測(cè)到該區(qū)域高水平的H3K4me3,隨著cul4a基因表達(dá)下調(diào)H3K4me3水平也隨之降低。這說(shuō)明Cul4a可以結(jié)合在gata1基因啟動(dòng)子區(qū)域,通過(guò)促進(jìn)H3K4me3直接影響gata1基因表達(dá),從而特異性影響紅細(xì)胞發(fā)育。綜上所述,Cul4a通過(guò)促進(jìn)組蛋白H3K4me3直接調(diào)控scl-α及gata1基因轉(zhuǎn)錄活性,從而影響斑馬魚初級(jí)造血紅系發(fā)育。
【圖文】：

邐山東大學(xué)博士學(xué)位論文邐逡逑結(jié)果逡逑１．斑馬魚發(fā)育早期基因的時(shí)空表達(dá)譜逡逑從斑馬魚ｃＤＮＡ文庫(kù)中克隆ｃｗ／如基因后，我們利用整胚原位雜交（ＷＩＳＨ）逡逑技術(shù)檢測(cè)其在斑馬魚胚胎發(fā)育早期的時(shí)空表達(dá)情況。結(jié)果如圖１－１所示，，ｃｗ／辦逡逑基因在１－細(xì)胞期即有高水平表達(dá)，其轉(zhuǎn)錄本在囊胚期到原腸期所有分裂球中持續(xù)逡逑表達(dá)。６體節(jié)（１２ｈｐｆ）到受精后２４小時(shí)（２４ｈｐｆ）這段時(shí)期，ｃｗ／知基因在后部逡逑側(cè)板中胚層（ＰＬＰＭ）及中間細(xì)胞團(tuán)（ＩＣＭ）區(qū)域有明顯高表達(dá)，而這兩個(gè)部位逡逑恰是初級(jí)造血關(guān)鍵區(qū)域，提示ｃＷａ可能參與調(diào)控初級(jí)造血。逡逑ａｂｅｄ逡逑

我們選取４ｎｇ作為實(shí)驗(yàn)注射劑量。顯微注射后發(fā)現(xiàn)，與ＣｏＭＯ對(duì)照組相比，逡逑0／／辦－ＭＯ注射組胚胎表型出現(xiàn)明顯異常，除了整體發(fā)育緩慢、尾部彎曲、心包逡逑膜水腫等多個(gè)系統(tǒng)和器官的缺陷外，胸前循環(huán)區(qū)的血細(xì)胞顯著減少（圖１－２）。逡逑ＣｏＭＯ邐ｃｕｌ４ａ－ｆＡＯ邐ＭＯ＋ｃｔ／／４ａ邋ｍＲＮＡ逡逑—ａ邐＾邐１６／１５邋＂５邐Ｋ邐１２／１３邋￣Ｃ逡逑邐７２邋ｈｐｆｒ＾｜｜邐７２邋ｈｐｆ邋丨衣邐７２邋ｈｐｆ逡逑圖１－２顯微鏡下觀察斑馬魚胸前循環(huán)區(qū)血細(xì)胞量逡逑ａ．邋ＣｏＭＯ注射組；ｂ．邋ｃｉ／？ａ－ＭＯ注射組；ｃ．邐ｍＲＮＡ拯救組。白框所示為胸前循環(huán)區(qū)
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R363

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3 周作瓊;hprg1b基因的干細(xì)胞系建立及其作用研究[D];湖南師范大學(xué);2017年

4 黨W

本文編號(hào)：2695251