發(fā)布時間：2020-05-26 06:09

【摘要】：目的:觀察黃酒和紅葡萄酒是否能抑制同型半胱氨酸(Hcy)誘導的大鼠血管內(nèi)皮細胞(VECs)中基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)的表達。方法:大鼠原代主動脈VECs經(jīng)分離培養(yǎng)及純化鑒定后,取第3～4代細胞用于實驗。將Hcy(0、50、100、500、1 000μmol/L)與VECs共同孵育48 h及100μmol/L Hcy與VECs共同培養(yǎng)24、48、72 h,分別用免疫印跡和明膠酶譜法檢測Hcy對MMP-2蛋白表達和活性的影響,確定Hcy最佳干預(yù)的濃度和時間。每種酒(1.0%、1.2%、1.4%、1.6%、1.8%、2.0%)與100μmol/L Hcy共同孵育VECs 48 h,MTT法檢測酒類對細胞活性的影響,確定最佳干預(yù)濃度后處理分control組、Hcy組、Hcy+黃酒組、Hcy+紅酒組和Hcy+酒精組5組。培養(yǎng)48 h后收集樣品,免疫印跡法檢測VECs中MMP-2的表達量,明膠酶譜法測定VECs上清液中MMP-2的活性。結(jié)果:Hcy在50～500μmol/L呈濃度依賴性地促進MMP-2蛋白表達和活性的增強(P0.05或P0.01),Hcy在100μmol/L時干預(yù)24、48、72 h MMP-2蛋白表達和活性的增強呈時間依賴性,48 h時最明顯(P0.01)。與Hcy組相比,黃酒組和紅酒組VECs MMP-2蛋白表達及上清液中MMP-2活性顯著下降(P0.05),酒精組MMP-2蛋白表達及上清液中MMP-2活性下降,但差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05)。與酒精組相比,黃酒組和紅酒組VECs MMP-2表達及上清液中MMP-2活性的差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),黃酒組和紅酒組之間無顯著差異(P0.05)。結(jié)論:Hcy能增強血管內(nèi)皮細胞MMP-2蛋白表達及酶的活性,小劑量的黃酒和紅葡萄酒均能抑制Hcy誘導的MMP-2表達及活化。

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本文編號：2681398