發(fā)布時(shí)間：2020-05-24 23:34

【摘要】：目的:腎缺血再灌注損傷(Renal ischemia reperfusion injury,RIRI)是臨床上一種嚴(yán)重疾病,因其具有極高的患病率和死亡率,引起大家的關(guān)注。Sirtuins家族作為體內(nèi)一種乙�；�,與自噬密切相關(guān),參與了多種器官的缺血再灌注。本研究通過(guò)構(gòu)建小鼠腎缺血-再灌注模型,明確Sirtuins家族在該模型中的表達(dá)情況,為研究腎缺血再灌注損傷的發(fā)病機(jī)制提供理論依據(jù),同時(shí)為該病的治療提供新的靶點(diǎn)。方法:選取6周齡的野生型C57小鼠,分為對(duì)照組(Sham)和缺血灌注損傷組(IRI),每組各7只(n=7)。IRI組采取腎臟阻斷血流供應(yīng),建立小鼠腎臟缺血缺氧的模型。而Sham組的小鼠,找到腎臟后不做任何處理。IRI組小鼠45分鐘后恢復(fù)血供,觀察兩組小鼠雙腎顏色的改變。24小時(shí)后,取小鼠血清檢測(cè)肌酐和尿素氮水平,評(píng)估兩組小鼠腎功能變化。處死小鼠,取腎臟組織后,采用Western blot法測(cè)定小鼠腎組織內(nèi)Sirtuins家族Sirt1-7的蛋白表達(dá)水平,用Real-time RT-PCR技術(shù)檢測(cè)兩組小鼠腎組織中m RNA的表達(dá)情況。本實(shí)驗(yàn)中,所得數(shù)據(jù)采用均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差,組間比較采用t檢驗(yàn),P0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1.小鼠SCr:IRI組小鼠血清中SCr的濃度為130.94±12.25umol/L而Sham組血清SCr的濃度為62.62±17.38umol/L。IRI組小鼠血清SCr濃度明顯高于Sham組(P0.05);2.小鼠BUN:IRI組小鼠血清中BUN的濃度為14.70±1.63umol/L而Sham組血清BUN的濃度為14.58.62±2.26umol/L。IRI組大鼠血清BUN濃度與Sham相比升高不明顯(P0.05);3.小鼠腎缺血再灌注損傷中Sirt1-7各基因的m RNA表達(dá)情況不同。在該小鼠模型中,Sirt1-4,6,7出現(xiàn)不同程度的下調(diào),且以Sirt1-3,6,7變化明顯,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而Sirt5的基因表達(dá)是升高的。Sirt1(IRI:0.78±0.15,Sham:0.98±0.12,P0.05),Sirt2(IRI:0.69±0.13,Sham:0.97±0.15,P0.05),Sirt3(IRI:0.68±0.15,Sham:0.97±0.12,P0.05),Sirt4(IRI:0.92±0.17,Sham:0.96±0.13,P0.05),Sirt5(IRI:0.99±0.13,Sham:0.95±0.11,P0.05),Sirt6(IRI:0.75±0.14,Sham:0.94±0.16,P0.05),Sirt7(IRI:0.65±0.21,Sham:0.93±0.20,P0.05)。4.小鼠腎缺血再灌注中sirt1-7各相關(guān)蛋白的表達(dá)情況,sirt2,3,4,6,7的表達(dá)是不同程度的下調(diào),sirt4不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,其余均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,(P0.05)。sirt1、5表達(dá)上調(diào)(P0.05)。Sirt1(IRI:3.81±0.15,Sham:1.02±0.13,P0.05),Sirt2(IRI:0.69±0.13,Sham:0.98±0.17,P0.05),Sirt3(IRI:0.10±0.08,Sham:0.99±0.11,P0.05),Sirt4(IRI:0.93±0.19,Sham:0.95±0.13,P0.05),Sirt5(IRI:1.45±0.13,Sham:1.05±0.12,P0.05),Sirt6(IRI:0.08±0.03,Sham:1.03±0.32,P0.05),Sirt7(IRI:0.15±0.12,Sham:0.93±0.20,P0.05)。結(jié)論:1.Sirtuins家族基因及蛋白的表達(dá)與小鼠腎缺血再灌注損傷的發(fā)生存在一定的聯(lián)系;2.sirt3,6,7基因及蛋白在腎缺血再灌注中均出現(xiàn)下調(diào),考慮該類基因在腎臟的缺血再灌注中具有一定的保護(hù)作用,但其具體機(jī)制目前仍未明確,需進(jìn)一步探討。
【學(xué)位授予單位】：河北工程大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R-332;R692

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