【摘要】：腸道病毒71型(Enterovirus 71, EV71)屬于小RNA病毒科腸道病毒屬成員,是引起嬰幼兒手足口病(Hand-foot-and-mouth disease, HFMD)的主要病原體之一,還常誘發(fā)無(wú)菌性腦膜炎和急性弛緩性麻痹等嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)疾病甚至死亡。同屬腸道病毒的脊髓灰質(zhì)炎病毒(Poliovirus, PV)在世界上大部分地區(qū)被疫苗有效根除以后,EV71因其能在大范圍引起嚴(yán)重甚至致命性的傳染病,被認(rèn)為是目前最重要的嗜神經(jīng)性病毒之一。目前,尚沒(méi)有針對(duì)EV71的有效疫苗或者抗病毒療法。盡管EV71如此重要,其非結(jié)構(gòu)蛋白3AB在其復(fù)制過(guò)程所起到的作用卻知之甚少。利用Bac-to-Bac桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng),并利用麥芽糖融合蛋白親和層析系統(tǒng)進(jìn)行純化,得到有活性有功能的重組3AB蛋白。研究發(fā)現(xiàn),3AB蛋白具有解旋活性,能夠解開(kāi)兩端單鏈突出的RNA-RNA雙鏈,還能解旋兩端單鏈突出的RNA-DNA雙鏈和兩端單鏈突出的DNA-DNA雙鏈。并且3AB蛋白能夠解旋3'端單鏈突出的RNA雙鏈,還能解旋5'單鏈突出的RNA雙鏈,但是不能解開(kāi)平末端雙鏈。這說(shuō)明EV71的3AB蛋白的解旋活性不具有方向性或者極性。研究發(fā)現(xiàn),3AB蛋白的解旋活性不需要鎂離子。當(dāng)鎂離子濃度低于5 mM時(shí),鎂離子對(duì)EV71的3AB蛋白解旋活性的作用不敏感,然而當(dāng)鎂離子濃度在10 mM時(shí),解旋活性受到中等程度的抑制作用。研究還發(fā)現(xiàn),鋅離子對(duì)3AB蛋白解旋活性的抑制作用十分靈敏,當(dāng)鋅離子在低濃度(≤0.5 mM)時(shí),能夠很大程度地抑制3AB蛋白的解旋活性。3AB蛋白的解旋反應(yīng)不需要ATP的參與,并且該蛋白不具有ATP酶活性,說(shuō)明3AB并不是解旋酶。3AB蛋白能夠解開(kāi)RNA鏈的結(jié)構(gòu),促進(jìn)RNA鏈的退火反應(yīng),表明3AB蛋白具有RNA分子伴侶活性。對(duì)3AB蛋白的截短蛋白和突變體蛋白的解旋活性和退火活性研究發(fā)現(xiàn),3A蛋白C端的7個(gè)氨基酸加上3B蛋白組成的3B+7蛋白也具有RNA分子伴侶活性,而Lys-8、 Phe-82、 Phe-85, Tyr-89和Arg-103五個(gè)氨基酸位點(diǎn)對(duì)3AB蛋白的RNA分子伴侶活性十分關(guān)鍵,有可能是其功能活性位點(diǎn),有可能成為抗病毒治療的理想靶點(diǎn)。綜上所述,EV71的3AB蛋白具有RNA分子伴侶活性,是不斷增加的由病毒編碼的RNA分子伴侶的新成員。本研究工作填補(bǔ)了腸道病毒71型非結(jié)構(gòu)蛋白3AB功能研究的空白,對(duì)EV71病毒生命周期中3AB的功能和作用有了更為深入了解,為今后針對(duì)EV71的抗病毒研究提供了理論基礎(chǔ)。
【圖文】：

體蛋白Ｐ１形成結(jié)構(gòu)蛋白ＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３和ＶＰ４，進(jìn)一步組成五聚體，每一個(gè)逡逑五聚體為一個(gè)蛋白前亞舉元，每三個(gè)蛋白亞單元形成一個(gè)三角形，６０個(gè)蛋白亞逡逑單元形成一個(gè)正二十面體的對(duì)稱(chēng)結(jié)構(gòu)（圖１．２），即為衣殼前體，通過(guò)進(jìn)一步組裝，逡逑最終形成成熟的病毒粒子（Ａｎｄｉｎｏ邋ｅｔ邋ａｌ．，邋１９９９；邋Ｂｕｅｎｚ邋ａｎｄ邋Ｈｏｗｅ，邋２００６）。逡逑ｚ邋病毒受體逡逑，邋翻譯邋Ｚ邐Ａ贏邐＼逡逑／５－邐３－－在』？Ａ邋Ａ邋＼邐⑧③邐＼逡逑／邐０新的病毒粒子、逡逑Ｉ邐⑷邐~枺叔義希苠危遙危糧粗�、”逦ｉ邋ｑw危義襄五五五五五五義賢跡保斃。遙危斂《鏡母粗乒蹋ǎ粒睿洌椋睿镥澹澹簦幔歟�，，１９９９）辶x

本文編號(hào)：2677815