【摘要】：目的:通過對(duì)兔尿道狹窄建模方法的改良,探尋一種經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便以及可重復(fù)性高的模型建立方法,為后續(xù)尿道狹窄發(fā)生機(jī)制的研究奠定基礎(chǔ)。方法:本實(shí)驗(yàn)選用成年雄性新西蘭兔28只,隨機(jī)數(shù)字表法按照1:3:3的比例分組:正常對(duì)照組,4只,僅行輸尿管鏡尿道檢查;常規(guī)模型組,12只,采用自制電刀頭對(duì)前尿道行環(huán)形電凝,長約5mm,直到尿道粘膜蒼白;改良模型組,12只,采用輸尿管鏡直視下用自制電凝導(dǎo)絲行前尿道點(diǎn)狀環(huán)形電凝長約5mm,深達(dá)粘膜下層。建模后第30天,行逆行尿道造影和輸尿管鏡尿道檢查評(píng)估尿道狹窄的形成情況,取相應(yīng)手術(shù)部位組織行組織病理學(xué)檢查,同時(shí)采用免疫組織化學(xué)法及實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)組織中TGF-β1、Smad3、MMP1 m RNA及蛋白的表達(dá)變化。結(jié)果:1、兔尿道狹窄模型形成情況:經(jīng)過逆行尿道造影及尿道鏡檢查,正常對(duì)照組4只兔常規(guī)喂養(yǎng)未出現(xiàn)死亡及尿道狹窄。常規(guī)模型組12只兔發(fā)現(xiàn)3只形成尿道狹窄,5只形成尿道閉鎖,3只并發(fā)尿瘺,1只死亡。改良模型組12只兔均發(fā)現(xiàn)尿道存在明顯狹窄,未出現(xiàn)兔死亡。2、在兩組模型中,TGF-β1、Smad3、MMP1 m RNA及蛋白的表達(dá)水平均高于正常對(duì)照組(P0.05)。在兩組模型之間,常規(guī)模型組Smad3、MMP1 m RNA的表達(dá)水平明顯高于改良模型組(P0.05),TGF-β1 m RNA的表達(dá)水平無明顯差異(P0.05)。在兩組模型之間,TGF-β1、Smad3、MMP1蛋白的表達(dá)水平無明顯差異(P0.05)。結(jié)論:1、兔尿道狹窄瘢痕組織中TGF-β1、Smad3、MMP1 m RNA及蛋白的表達(dá)水平均增高。2、改良模型組采用輸尿管鏡直視下點(diǎn)狀環(huán)形電凝可成功建立尿道狹窄模型,成功率高、方法簡(jiǎn)便及可重復(fù)性高,可作為雄性兔尿道狹窄模型建立的有效方法。常規(guī)模型組并發(fā)癥多,可形成尿道閉鎖、尿瘺導(dǎo)致兔死亡,不宜作為兔尿道狹窄模型建立的方法。
【圖文】：

導(dǎo)尿管可以順利進(jìn)入成年雄性新西蘭兔尿道，按照F8號(hào)導(dǎo)尿管直徑估算兔尿道內(nèi)徑，制作球形電刀頭一根，并于外層套入熱塑管標(biāo)記刻度，便于術(shù)中電刀頭進(jìn)入尿道后長度的測(cè)量（見圖1A、B）。圖1 自制電刀頭設(shè)備的組成及電凝過程（A：自制電刀頭設(shè)備與普通短電刀頭對(duì)比；B：自制電刀頭設(shè)備接入普通電刀筆；C：兔腹部剃毛后負(fù)極板粘貼，會(huì)陰部常規(guī)消毒；D：使用自制電刀頭接入普通電刀筆，電凝功率設(shè)定60W，按實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行電凝建模過程。）②尿道狹窄模型制作 采用10%水合氯醛（300mg/kg）行腹腔注射麻醉，約5min麻醉成功后，兔取仰臥位置于操作臺(tái)上，固定四肢，，使用動(dòng)物專用剃毛器將兔腹部體毛剃除便于電刀負(fù)極板粘貼，使用聚維酮碘會(huì)陰部常規(guī)消毒。手術(shù)者使用自制電刀頭接入普通電刀筆，電凝功率設(shè)定60W。電刀頭進(jìn)入尿道5.0cm處固定

導(dǎo)絲尾端刮去涂層部分使用絕緣膠布與普通電刀頭金屬端妥善固定（見圖2）。圖2 自制電凝導(dǎo)絲設(shè)備的組成（A：取導(dǎo)引導(dǎo)絲插入F3號(hào)輸尿管插管中，導(dǎo)絲頭部超出輸尿管插管約3.0mm，使用502膠水將導(dǎo)絲頭部與輸尿管插管粘連固定。B：手術(shù)室常規(guī)使用GD350-B型高頻電刀。C：導(dǎo)絲尾端刮去涂層部分與普通電刀頭使用絕緣膠布固定。）② 尿道狹窄模型制作 采用10%水合氯醛（300mg/kg）行腹腔注射麻醉，約5min麻醉成功后，兔取仰臥位置于操作臺(tái)上，固定四肢，使用動(dòng)物專用剃毛器將兔腹部體毛剃除便于電刀負(fù)極板粘貼，使用聚維酮碘會(huì)陰部常規(guī)消毒。使用F8/9.8輸尿管鏡，在等滲沖洗液沖洗下直視進(jìn)入兔尿道外口，觀察整段尿道，于精阜遠(yuǎn)端約3.0cm處（距離尿道外口約5.0cm，與常規(guī)模型組電凝位置相同）固定輸尿管鏡鏡體
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R699.6;R-332

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本文編號(hào)：2674351