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大鼠口腔黏膜對(duì)正畸托槽刺激反應(yīng)的模型建立及免疫組化研究

發(fā)布時(shí)間:2020-05-18 09:58
【摘要】:目的:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)在大鼠口腔內(nèi)建模,模擬托槽對(duì)黏膜的機(jī)械及化學(xué)刺激。探究托槽對(duì)黏膜的刺激及去除托槽后的組織恢復(fù)情況,并對(duì)三種不同的托槽進(jìn)行比較,為臨床上醫(yī)生和患者對(duì)正畸托槽的選擇提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:選用三月齡的健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠48只,適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后,將大鼠隨機(jī)分組,實(shí)驗(yàn)組:國(guó)產(chǎn)自鎖組(12只),進(jìn)口自鎖組(12只)國(guó)產(chǎn)方絲組(12只)。對(duì)照組:陰性對(duì)照(12只)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)周期,每組又分為14天和28天各半。國(guó)產(chǎn)自鎖組、進(jìn)口自鎖組、國(guó)產(chǎn)方絲組、陰性對(duì)照組每組6只,共8組。實(shí)驗(yàn)組將三種托槽采用相同縫合方法分別縫合于三組大鼠下前牙唇側(cè)(自然狀態(tài)下,下唇需覆蓋托槽);陰性對(duì)照組采用相同縫合方法縫合。14天時(shí),記錄全部大鼠黏膜狀態(tài)、體重,將14天組處死取材,28天組拆除托槽及縫線。28天時(shí),記錄28天組大鼠黏膜狀態(tài)、體重,并處死取材。所有動(dòng)物均以軟食飼養(yǎng),自由飲水,同環(huán)境下飼養(yǎng)至實(shí)驗(yàn)結(jié)束,切取的下唇黏膜均常規(guī)固定,脫水,包埋。石蠟切片后進(jìn)行常規(guī)HE染色觀察黏膜組織學(xué)變化;免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)CD4和CD8的表達(dá),采用細(xì)胞圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行免疫組化染色評(píng)分,以IHS值表示其強(qiáng)度。應(yīng)用Image-pro-plus6.0圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行半定量分析。所有數(shù)據(jù)結(jié)果均應(yīng)用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理,統(tǒng)計(jì)分析時(shí)不同實(shí)驗(yàn)組間采用秩和檢驗(yàn)。對(duì)14天和28天時(shí)的CD4和CD8進(jìn)行分析,檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。結(jié)果:1.肉眼觀察黏膜狀態(tài)及HE染色,三種托槽在14天時(shí)均有不同程度的口腔黏膜反應(yīng)出現(xiàn),黏膜反應(yīng)的嚴(yán)重程度由重到輕排序?yàn)?國(guó)產(chǎn)方絲國(guó)產(chǎn)自鎖進(jìn)口自鎖。2.免疫組化測(cè)量CD4IHS值并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,國(guó)產(chǎn)自鎖14天[91.5(15.5)],進(jìn)口自鎖14天[54.0(7.5)],國(guó)產(chǎn)方絲14天[115.5(21.0)]與陰性對(duì)照14天[42(25.5)]之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。且三種托槽免疫反應(yīng)程度為:國(guó)產(chǎn)方絲國(guó)產(chǎn)自鎖進(jìn)口自鎖(P0.05)。在28天時(shí)三種托槽相比無(wú)差異(P0.05)。但黏膜的免疫反應(yīng)均大于與陰性對(duì)照組(P0.05)。3.免疫組化測(cè)量CD8IHS值并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,國(guó)產(chǎn)自鎖14天[105(19.5)],進(jìn)口自鎖14天[73.0(39.5)],國(guó)產(chǎn)方絲14天[130.5(19.5)]與陰性對(duì)照14天[49(22.5)]之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。且三種托槽免疫反應(yīng)程度為:國(guó)產(chǎn)方絲國(guó)產(chǎn)自鎖進(jìn)口自鎖(P0.05)。在28天時(shí),國(guó)產(chǎn)自鎖與陰性對(duì)照組無(wú)差異(P0.05)。其余兩組與陰性對(duì)照組相比有差異(P0.05)。結(jié)論:1.成功建立托槽對(duì)黏膜刺激的大鼠模型。2.不同種類(lèi)的托槽對(duì)口腔黏膜的損傷有不同,在實(shí)驗(yàn)的三種托槽中,方絲托槽損傷最重,進(jìn)口自鎖托槽損傷最輕。3.托槽對(duì)黏膜有一定的機(jī)械損傷及免疫影響,去除托槽后機(jī)械損傷逐漸恢復(fù)趨于正常,免疫反應(yīng)也有好轉(zhuǎn)。
【圖文】:

大鼠,托槽,粘接,牙齒生長(zhǎng)


德國(guó) EPPENDORF箱,江蘇太倉(cāng)醫(yī)用儀器廠 DSHZ-300 的戴用在臨床上的使用,應(yīng)考慮粘接托槽與大齒過(guò)小,無(wú)法粘接托槽,且大鼠下前接于下前牙,就會(huì)隨牙齒生長(zhǎng)移動(dòng),無(wú)槽穩(wěn)定與下唇黏膜接觸,且不易脫落,,體實(shí)驗(yàn)操作如下:實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物稱(chēng)重后腔注射,將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物全身麻醉(如圖 1

大鼠,托槽,實(shí)驗(yàn)組,鼠籠


圖 2 大鼠的固定及鋪巾Fig. 2 Fixation and towel laying in rats十字法”分別將三種托槽縫合于下前牙唇側(cè)牙齦處。其側(cè)臥于鼠籠,密切觀察其各項(xiàng)生命指征,注意維持醒。托槽的縫合時(shí)間為 14 天,縫合期間每天觀察治器脫落,立即將其重新縫合,以保證大鼠下唇與器就位時(shí),大鼠在閉口時(shí)下唇完全覆蓋金屬托槽。式麻醉、鋪巾、消毒,采用相同的“十字法”將縫線下飼養(yǎng)至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。全部實(shí)驗(yàn)組及陰性對(duì)照組在第 10%水合氯醛 0.3ml/100g 腹腔注射麻醉,拍攝口內(nèi)縫線。14 天組于第 14 天處死取材,28 天組于第 ,繼續(xù)飼養(yǎng)至第 28 天處死取材。本的采集治器后所有動(dòng)物自由飲水進(jìn)食。實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組動(dòng)
【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類(lèi)號(hào)】:R783.5;R-332

【參考文獻(xiàn)】

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