CDK5對小鼠黑素瘤細胞B16遷移和酪氨酸酶活性的影響
發(fā)布時間:2020-05-12 22:39
【摘要】:黑素瘤是一種最具侵襲性的、發(fā)生于皮膚的惡性癌癥,具有致死率高、治愈后易復發(fā)的特點,在細胞生物學中,抑制細胞的增殖、分化和遷移等過程對黑素瘤的控制和治療具有重要的意義。已有研究發(fā)現(xiàn)細胞周期素依賴蛋白激酶5(Cyclin-dependent Kinase5,CDK5)在B16黑素瘤細胞中高表達,CDK5-knockdown可導致細胞的凋亡和死亡,但CDK5-knockdown對黑素瘤細胞的遷移以及酪氨酸酶的活性影響未見報道。本研究通過細胞轉染的方法研究CDK5-knockdown對小鼠B16黑素瘤細胞遷移的影響以及酪氨酸酶活性進行研究,通過對實時熒光定量聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)的數(shù)據(jù)分析和Western印跡結果的比對發(fā)現(xiàn)在小鼠B16黑素瘤細胞中CDK5的敲減可抑制Integrin-Betal,Integrin-Beta5和血小板衍生生長因子-B(Platelet derived growth factor-B.PDGF-B)在轉錄和翻譯水平的表達;細胞劃痕試驗表明在小鼠B16黑素瘤細胞中CDK5的敲減表達可抑制B16黑素瘤細胞的遷移;酪氨酸酶活性檢測結果表明小鼠B16黑素瘤細胞中CDK5的敲減表達對B16細胞中酪氨酸酶活性起到了抑制作用。本試驗結果揭示敲減CDK5通過調控Integrin-Betal、Integrin-Beta5和PDGF-B的表達而對小鼠B16黑素瘤細胞的遷移起抑制作用,并對B16黑素瘤細胞中酪氨酸酶活性起調控作用。
【圖文】:
B16轉染CDK5-kn0Ckdown質粒后,熒光定量PCR和免疫印跡結果發(fā)現(xiàn),與對照逡逑組相比,CDK5蛋白水平和mRNA水平的表達量明顯低于對照組表達量,即分別下降逡逑了邋45%和65%,且差異極顯著(圖2.2)邋(P<0.01)逡逑A邐B逡逑!|逡逑II邋^邐HHHHI逡逑II.邋■邐一逡逑00.邋一HPI邐WIUHype邋(DK5邋knockdown逡逑WM邋l>p*邐CDK9邋kiMwItihna邋■逡逑c逡逑1邋5-1逡逑]f邋邐逡逑^lijL逡逑?Hrf邋(V{M邐CDK9邋fciHMiMlM*邋?逡逑圖2.2邋CDK5-knockdown在蛋白和mRNA水平表達量逡逑注:A:CDK5mRNA表達水平逡逑注:B:CDK5蛋白表達水平逡逑注:C:CDK5蛋白灰度分析表達水平逡逑2.3實時q捁舛浚校茫液偷鞍妝澩锝峁義嫌耄危米橄啾齲茫模耍擔耄睿錚悖耄洌錚鰨詈螅校模牽疲碌模恚遙危簾澩锪肯陸盜隋澹玻擔,橇x義喜鉅煜災ǎ校跡埃埃擔╁澹誨澹桑睿簦澹紓潁椋睿攏澹簦幔旎蛟冢茫模耍擔耄睿錚悖耄洌錚鰨鈄櫚模恚遙危簾澩锪肯陸靛義希玻玻,,Inte<倽}椋睿攏澹簦幔靛逑陸盜隋澹矗擔,且测犾极蠟镍(P[E埃埃保。PD科-B、Inte<倽}椋睿攏澹簦幔戾義希保梗義
本文編號:2660939
【圖文】:
B16轉染CDK5-kn0Ckdown質粒后,熒光定量PCR和免疫印跡結果發(fā)現(xiàn),與對照逡逑組相比,CDK5蛋白水平和mRNA水平的表達量明顯低于對照組表達量,即分別下降逡逑了邋45%和65%,且差異極顯著(圖2.2)邋(P<0.01)逡逑A邐B逡逑!|逡逑II邋^邐HHHHI逡逑II.邋■邐一逡逑00.邋一HPI邐WIUHype邋(DK5邋knockdown逡逑WM邋l>p*邐CDK9邋kiMwItihna邋■逡逑c逡逑1邋5-1逡逑]f邋邐逡逑^lijL逡逑?Hrf邋(V{M邐CDK9邋fciHMiMlM*邋?逡逑圖2.2邋CDK5-knockdown在蛋白和mRNA水平表達量逡逑注:A:CDK5mRNA表達水平逡逑注:B:CDK5蛋白表達水平逡逑注:C:CDK5蛋白灰度分析表達水平逡逑2.3實時q捁舛浚校茫液偷鞍妝澩锝峁義嫌耄危米橄啾齲茫模耍擔耄睿錚悖耄洌錚鰨詈螅校模牽疲碌模恚遙危簾澩锪肯陸盜隋澹玻擔,橇x義喜鉅煜災ǎ校跡埃埃擔╁澹誨澹桑睿簦澹紓潁椋睿攏澹簦幔旎蛟冢茫模耍擔耄睿錚悖耄洌錚鰨鈄櫚模恚遙危簾澩锪肯陸靛義希玻玻,,Inte<倽}椋睿攏澹簦幔靛逑陸盜隋澹矗擔,且测犾极蠟镍(P[E埃埃保。PD科-B、Inte<倽}椋睿攏澹簦幔戾義希保梗義
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