【摘要】：黑素瘤是一種最具侵襲性的、發(fā)生于皮膚的惡性癌癥,具有致死率高、治愈后易復發(fā)的特點,在細胞生物學中,抑制細胞的增殖、分化和遷移等過程對黑素瘤的控制和治療具有重要的意義。已有研究發(fā)現(xiàn)細胞周期素依賴蛋白激酶5(Cyclin-dependent Kinase5,CDK5)在B16黑素瘤細胞中高表達,CDK5-knockdown可導致細胞的凋亡和死亡,但CDK5-knockdown對黑素瘤細胞的遷移以及酪氨酸酶的活性影響未見報道。本研究通過細胞轉染的方法研究CDK5-knockdown對小鼠B16黑素瘤細胞遷移的影響以及酪氨酸酶活性進行研究,通過對實時熒光定量聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)的數(shù)據(jù)分析和Western印跡結果的比對發(fā)現(xiàn)在小鼠B16黑素瘤細胞中CDK5的敲減可抑制Integrin-Betal,Integrin-Beta5和血小板衍生生長因子-B(Platelet derived growth factor-B.PDGF-B)在轉錄和翻譯水平的表達;細胞劃痕試驗表明在小鼠B16黑素瘤細胞中CDK5的敲減表達可抑制B16黑素瘤細胞的遷移;酪氨酸酶活性檢測結果表明小鼠B16黑素瘤細胞中CDK5的敲減表達對B16細胞中酪氨酸酶活性起到了抑制作用。本試驗結果揭示敲減CDK5通過調控Integrin-Betal、Integrin-Beta5和PDGF-B的表達而對小鼠B16黑素瘤細胞的遷移起抑制作用,并對B16黑素瘤細胞中酪氨酸酶活性起調控作用。
【圖文】：

Ｂ１６轉染ＣＤＫ５－ｋｎ0Ｃｋｄｏｗｎ質粒后，熒光定量ＰＣＲ和免疫印跡結果發(fā)現(xiàn)，與對照逡逑組相比，ＣＤＫ５蛋白水平和ｍＲＮＡ水平的表達量明顯低于對照組表達量，即分別下降逡逑了邋４５％和６５％，且差異極顯著（圖２．２）邋（Ｐ＜０．０１）逡逑Ａ邐Ｂ逡逑！｜逡逑ＩＩ邋＾邐ＨＨＨＨＩ逡逑ＩＩ．邋■邐一逡逑００．邋一ＨＰＩ邐ＷＩＵＨｙｐｅ邋（ＤＫ５邋ｋｎｏｃｋｄｏｗｎ逡逑ＷＭ邋ｌ＞ｐ＊邐ＣＤＫ９邋ｋｉＭｗＩｔｉｈｎａ邋■逡逑ｃ逡逑１邋５－１逡逑］ｆ邋邐逡逑＾ｌｉｊＬ逡逑？Ｈｒｆ邋（Ｖ｛Ｍ邐ＣＤＫ９邋ｆｃｉＨＭｉＭｌＭ＊邋？逡逑圖２．２邋ＣＤＫ５－ｋｎｏｃｋｄｏｗｎ在蛋白和ｍＲＮＡ水平表達量逡逑注：Ａ：ＣＤＫ５ｍＲＮＡ表達水平逡逑注：Ｂ：ＣＤＫ５蛋白表達水平逡逑注：Ｃ：ＣＤＫ５蛋白灰度分析表達水平逡逑２．３實時q捁舛浚校茫液偷鞍妝澩锝峁義嫌耄危米橄啾齲茫模耍擔耄睿錚悖耄洌錚鰨詈螅校模牽疲碌模恚遙危簾澩锪肯陸盜隋澹玻擔�，橇x義喜鉅煜災ǎ校跡埃埃擔╁澹誨澹桑睿簦澹紓潁椋睿攏澹簦幔旎蛟冢茫模耍擔耄睿錚悖耄洌錚鰨鈄櫚模恚遙危簾澩锪肯陸靛義希玻玻�，，Ｉｎｔｅ＜倽}椋睿攏澹簦幔靛逑陸盜隋澹矗擔�，且测犾极蠟镍（Ｐ［E埃埃保�。ＰＤ科－Ｂ、Ｉｎｔｅ＜倽}椋睿攏澹簦幔戾義希保梗義

本文編號：2660939