本文關(guān)鍵詞：慢病毒介導(dǎo)P63基因轉(zhuǎn)染人脂肪干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:以慢病毒為載體,將P63基因轉(zhuǎn)染到體外培養(yǎng)的脂肪干細(xì)胞上,獲得P63基因高表達(dá)的脂肪干細(xì)胞,為進(jìn)一步研究脂肪肝細(xì)胞向表皮的分化奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法:(1)無菌條件下獲取健康男性的腹部脂肪,消化法分離脂肪干細(xì)胞,體外培養(yǎng)、擴(kuò)增,凍存?zhèn)溆谩?2)脂肪干細(xì)胞的鑒定:形態(tài)學(xué)檢測(cè)、多向分化能力及表面標(biāo)記物檢測(cè)。(3)慢病毒載體介導(dǎo)P63基因轉(zhuǎn)染人脂肪干細(xì)胞。(4)將轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞進(jìn)行PCR及Western Blot檢測(cè)。結(jié)果:分離培養(yǎng)后,細(xì)胞貼壁生長(zhǎng),形態(tài)呈梭形,并呈旋渦狀或放射狀排列;細(xì)胞生長(zhǎng)曲線為典型的“S”形;成脂誘導(dǎo)分化的細(xì)胞經(jīng)油紅O染色為陽性,對(duì)照組為陰性;成骨誘導(dǎo)分化的細(xì)胞經(jīng)茜素紅染色為陽性,對(duì)照組為陰性。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示CD14和CD45為陰性,CD29、CD44、CD105為陽性。轉(zhuǎn)染后的脂肪干細(xì)胞有明顯的P63及角蛋白表達(dá)。結(jié)論:通過外科手術(shù)獲得的人體脂肪組織中含有脂肪干細(xì)胞,經(jīng)體外培養(yǎng)擴(kuò)增后,以慢病毒為載體,轉(zhuǎn)染P63基因,細(xì)胞表現(xiàn)出更好地向表皮細(xì)胞分化的能力,為研究脂肪干細(xì)胞向表皮細(xì)胞的分化提供參考。
【關(guān)鍵詞】：脂肪干細(xì)胞 P63 慢病毒 轉(zhuǎn)染 表皮分化
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R329.28

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王平;熊燕;楊公社;沈清武;龐衛(wèi)軍;;慢病毒載體介導(dǎo)的RNA干擾Akt2表達(dá)抑制豬前體脂肪細(xì)胞分化[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2012年01期

  本文關(guān)鍵詞：慢病毒介導(dǎo)P63基因轉(zhuǎn)染人脂肪干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：264865