本文關(guān)鍵詞：慢病毒介導(dǎo)P63基因轉(zhuǎn)染人脂肪干細胞的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:以慢病毒為載體,將P63基因轉(zhuǎn)染到體外培養(yǎng)的脂肪干細胞上,獲得P63基因高表達的脂肪干細胞,為進一步研究脂肪肝細胞向表皮的分化奠定實驗基礎(chǔ)。方法:(1)無菌條件下獲取健康男性的腹部脂肪,消化法分離脂肪干細胞,體外培養(yǎng)、擴增,凍存?zhèn)溆谩?2)脂肪干細胞的鑒定:形態(tài)學檢測、多向分化能力及表面標記物檢測。(3)慢病毒載體介導(dǎo)P63基因轉(zhuǎn)染人脂肪干細胞。(4)將轉(zhuǎn)染后的細胞進行PCR及Western Blot檢測。結(jié)果:分離培養(yǎng)后,細胞貼壁生長,形態(tài)呈梭形,并呈旋渦狀或放射狀排列;細胞生長曲線為典型的“S”形;成脂誘導(dǎo)分化的細胞經(jīng)油紅O染色為陽性,對照組為陰性;成骨誘導(dǎo)分化的細胞經(jīng)茜素紅染色為陽性,對照組為陰性。流式細胞儀檢測結(jié)果顯示CD14和CD45為陰性,CD29、CD44、CD105為陽性。轉(zhuǎn)染后的脂肪干細胞有明顯的P63及角蛋白表達。結(jié)論:通過外科手術(shù)獲得的人體脂肪組織中含有脂肪干細胞,經(jīng)體外培養(yǎng)擴增后,以慢病毒為載體,轉(zhuǎn)染P63基因,細胞表現(xiàn)出更好地向表皮細胞分化的能力,為研究脂肪干細胞向表皮細胞的分化提供參考。
【關(guān)鍵詞】：脂肪干細胞 P63 慢病毒 轉(zhuǎn)染 表皮分化
【學位授予單位】：新疆醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R329.28

【參考文獻】

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1 王平;熊燕;楊公社;沈清武;龐衛(wèi)軍;;慢病毒載體介導(dǎo)的RNA干擾Akt2表達抑制豬前體脂肪細胞分化[J];中國生物化學與分子生物學報;2012年01期

  本文關(guān)鍵詞：慢病毒介導(dǎo)P63基因轉(zhuǎn)染人脂肪干細胞的實驗研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：264865