【摘要】：肝素結(jié)合表皮生長(zhǎng)因子HB-EGF屬于EGF超家族,它可以在蛋白酶的作用下形成可溶性形式,通過(guò)自分泌或旁分泌作用發(fā)揮功能。有報(bào)道稱關(guān)節(jié)炎病人樣本及關(guān)節(jié)手術(shù)造模鼠中HB-EGF表達(dá)升高,EGFR信號(hào)通路被激活。HB-EGF還可以通過(guò)調(diào)控成骨細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)促進(jìn)破骨細(xì)胞的形成。本課題在前人研究基礎(chǔ)上,使用Cre/lox P技術(shù),構(gòu)建了間質(zhì)干細(xì)胞(MSC)、軟骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞中特異性過(guò)表達(dá)或敲除HB-EGF的突變體小鼠,系統(tǒng)研究HB-EGF在骨骼系統(tǒng)中的作用及潛在機(jī)制。我們發(fā)現(xiàn)在Dermo1標(biāo)記的MSC中特異性敲除HB-EGF時(shí),敲除鼠骨骼大小和關(guān)節(jié)軟骨均無(wú)異常,而骨量及骨密度都有一定程度上升。相反,Dermo1標(biāo)記的MSC中過(guò)表達(dá)HB-EGF,小鼠骨量及骨密度均顯著下降,骨形成明顯減弱且骨礦化不足。組織學(xué)研究發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)鼠關(guān)節(jié)嚴(yán)重畸形,關(guān)節(jié)膨大,關(guān)節(jié)軟骨退化,關(guān)節(jié)軟骨下有內(nèi)生軟骨瘤樣結(jié)構(gòu)。進(jìn)一步分析還發(fā)現(xiàn),生長(zhǎng)板軟骨增殖增加,關(guān)節(jié)軟骨纖維化顯著提高,并且Dermo1-HB-EGF小鼠脊柱軟骨板也有軟骨瘤樣表型。與此同時(shí),本研究發(fā)現(xiàn)MSC中過(guò)表達(dá)HB-EGF的小鼠中,破骨細(xì)胞的數(shù)量及分化并未受到影響。為了更全面的說(shuō)明HB-EGF對(duì)骨代謝的作用,我們構(gòu)建了在Ly M標(biāo)記的破骨祖細(xì)胞中過(guò)表達(dá)HB-EGF的小鼠。實(shí)驗(yàn)鼠骨骼大小和生長(zhǎng)板軟骨均無(wú)異常,骨量及骨密度均無(wú)變化。實(shí)驗(yàn)鼠骨髓細(xì)胞體外破骨分化能力沒(méi)有差別,這說(shuō)明自分泌及旁分泌的HB-EGF對(duì)成骨-破骨之間的偶聯(lián)及破骨細(xì)胞自身的調(diào)控都沒(méi)有作用。通過(guò)分子生物學(xué)研究發(fā)現(xiàn),HB-EGF通過(guò)激活EGFR信號(hào)下游的Erk及Akt信號(hào)通路促進(jìn)MSC的增殖。另外,HB-EGF通過(guò)抑制BMP信號(hào)通路下游Smad1/5/8信號(hào)抑制MSC分化。EGFR信號(hào)通路的抑制劑AG1478對(duì)過(guò)表達(dá)小鼠軟骨異常表型具有良好的挽救作用。綜上所述,本研究首次發(fā)現(xiàn)并詳細(xì)的分析了HB-EGF在小鼠骨骼發(fā)育及骨代謝中的作用。研究結(jié)果表明HB-EGF在MSC中無(wú)論敲除和過(guò)表達(dá)都會(huì)對(duì)成年之后骨代謝平衡產(chǎn)生影響,MSC中敲除HB-EGF不影響軟骨的正常發(fā)育,相反HB-EGF的過(guò)表達(dá)卻對(duì)關(guān)節(jié)及生長(zhǎng)板的發(fā)育造成嚴(yán)重破壞,導(dǎo)致軟骨發(fā)育缺陷和關(guān)節(jié)炎的發(fā)生。以上研究結(jié)果拓展了我們對(duì)關(guān)節(jié)炎的發(fā)生及內(nèi)生軟骨瘤的產(chǎn)生的認(rèn)識(shí),也為臨床提供了新的檢測(cè)指標(biāo)和治療策略。
【圖文】：

圖 1-1 MSC 發(fā)現(xiàn)及研究進(jìn)程[3]Fig1-1 MSC discovery and research process目前公認(rèn)的 MSC 主要特征如下：1.具有體外培養(yǎng)條件下的塑料黏附特性，形為成纖維細(xì)胞紡錘樣形態(tài)；2.具有分化為成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞和脂肪細(xì)胞這

圖 1-2 MSC 潛在分化能力[4]Fig.1-2 MSC potential differentiation ability1.1.2 MSC 的標(biāo)記骨髓（BM）是最廣泛認(rèn)可的間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源，但最近許多研究
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R336

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張群燕;郭郡浩;蔡輝;;腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6與骨代謝的研究進(jìn)展[J];中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志;2017年02期

2 李斌斌;于世鳳;;頜骨骨代謝實(shí)驗(yàn)研究方法概述[J];中華口腔醫(yī)學(xué)雜志;2007年03期

3 鄒霓;金仲品;;骨代謝與年齡增長(zhǎng)的關(guān)系(英文)[J];中國(guó)臨床康復(fù);2006年16期

4 張林;;運(yùn)動(dòng)骨代謝動(dòng)物模型的選擇與構(gòu)建——運(yùn)動(dòng)骨代謝動(dòng)物模型研究進(jìn)展(一)[J];體育學(xué)刊;2005年06期

5 楊麗,張榮華,朱曉峰,蔡宇,黃豐;骨代謝與TGF-β_1、BMP-2的關(guān)系[J];山東醫(yī)藥;2004年15期

6 金仲品 ,王麗;年齡增長(zhǎng)與骨代謝研究概況[J];中國(guó)煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;2002年04期

7 余增麗,李云;鋅與骨代謝[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(醫(yī)學(xué)地理分冊(cè));2000年02期

8 茹選良,黃宗堅(jiān);鋅與骨代謝的研究進(jìn)展[J];臨床骨科雜志;1999年02期

9 張其亮,陸前進(jìn),楊斌,唐愛(ài)國(guó);SLE患者骨代謝的研究[J];中華皮膚科雜志;1994年05期

10 潘玉芹;尿中骨谷氨酸蛋白的臨床意義[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(兒科學(xué)分冊(cè));1988年06期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 莊國(guó)臣;秦漢娟;王石麟;潘子昂;何郁泉;段云波;馬海波;肖艷霞;劉京萍;劉忠厚;;鈣在人體生命活動(dòng)中的作用——重點(diǎn)談鈣與骨代謝的關(guān)系[A];骨質(zhì)疏松研究與防治文集[C];1994年

2 薛延;;骨代謝的生化檢查[A];骨質(zhì)疏松研究與防治文集[C];1994年

3 盧立肖;張宇;楊宇真;張穎;;特發(fā)性腎病綜合征對(duì)兒童骨代謝的影響[A];2006年浙江省腎臟病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

4 徐莉;陳家琦;王忠山;;多年體育運(yùn)動(dòng)對(duì)老年男性骨代謝的影響[A];第五屆全國(guó)體育科學(xué)大會(huì)論文摘要匯編[C];1997年

5 李冰燕;石階瑤;郝莉;丁曉飛;張?jiān)隼?;維生素D對(duì)骨代謝調(diào)節(jié)的直接作用[A];中國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)第十屆微量元素營(yíng)養(yǎng)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2009年

6 白金;鄒建芳;;鉛對(duì)骨代謝影響的研究進(jìn)展[A];中華預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)第十八次全國(guó)職業(yè)病學(xué)術(shù)交流大會(huì)論文匯編[C];2009年

7 桂繼琮;劉興黨;龔廣予;;牛奶和鈣強(qiáng)化豆?jié){對(duì)上海市絕經(jīng)后婦女骨代謝相關(guān)指標(biāo)的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第九次全國(guó)核醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2011年

8 陳璐璐;;瘦素與骨代謝[A];第八屆全國(guó)骨質(zhì)疏松年會(huì)暨第五屆全國(guó)鈣劑年會(huì)會(huì)議文集[C];2002年

9 林霞;;糖皮質(zhì)激素對(duì)免疫性血小板減少性紫癜患者骨代謝的影響[A];2015年浙江省骨質(zhì)疏松與骨礦鹽疾病學(xué)術(shù)年會(huì)暨骨質(zhì)疏松癥和骨質(zhì)疏松性骨折診治進(jìn)展專題研討會(huì)論文匯編[C];2015年

10 李衛(wèi);苗懿德;;老年男性慢性阻塞性肺疾病患者骨代謝的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第三次全國(guó)骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病學(xué)術(shù)會(huì)議暨骨質(zhì)疏松診斷技術(shù)繼續(xù)教育學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2004年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前9條

1 首席記者 閆煈 記者 王建影;骨代謝異常診治水平需提高[N];健康報(bào);2015年

2 林琳 寒冰;吸入性類固醇持續(xù)治療可損害骨代謝[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

3 鄒婕;小量激素增強(qiáng)糖尿病女性患者骨代謝[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2002年

4 香港麥迪信醫(yī)學(xué)出版有限公司供稿;多因素影響骨代謝平衡[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2003年

5 記者 周穎;蛇床子素調(diào)控骨代謝作用靶點(diǎn)揭示[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2010年

6 ;哪些人群應(yīng)補(bǔ)鈣[N];西藏日?qǐng)?bào);2004年

7 蔣一凡;絕經(jīng)后要防哪些病[N];北京社會(huì)報(bào);2006年

8 高潔生;婦女易患風(fēng)濕病[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2002年

9 許錦東;應(yīng)適時(shí)補(bǔ)鈣[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2003年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 李珊珊;肥大性骨關(guān)節(jié)病診治及25OHD與骨代謝隨機(jī)化研究[D];上海交通大學(xué);2018年

2 李平;HB-EGF在骨發(fā)育及骨代謝中的作用[D];上海交通大學(xué);2018年

3 陳昊;前列腺素E2通過(guò)感覺(jué)神經(jīng)反饋調(diào)控骨代謝機(jī)制研究[D];蘇州大學(xué);2017年

4 郭建斌;人白細(xì)胞介素-10基因治療對(duì)去卵巢大鼠骨代謝及種植體骨結(jié)合影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

5 毛艷華;高血壓及不同降壓藥物對(duì)去卵巢自發(fā)性高血壓大鼠骨代謝的影響[D];山東大學(xué);2016年

6 項(xiàng)守奎;GLP-1及其受體基因多態(tài)性與骨代謝相關(guān)參數(shù)的關(guān)聯(lián)研究[D];蘇州大學(xué);2016年

7 王雪彤;艾拉莫德對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者骨代謝作用的研究[D];吉林大學(xué);2017年

8 王平;運(yùn)動(dòng)性骨疲勞大鼠骨代謝與骨調(diào)因子的研究[D];蘇州大學(xué);2009年

9 楊德鴻;血小板衍生生長(zhǎng)因子AA在骨代謝轉(zhuǎn)換平衡中的作用[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2002年

10 董紅宇;小劑量糖皮質(zhì)激素對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎骨代謝的影響[D];吉林大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 王涵;蛋雞肱骨轉(zhuǎn)錄組分析及骨代謝相關(guān)候選基因的初步研究[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2019年

2 李橋;年齡對(duì)蛋雞骨代謝的影響及來(lái)曲唑?qū)ζ渥饔玫臋C(jī)理研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2017年

3 牛晨光;苷松新酮對(duì)骨代謝影響及其機(jī)制研究初探[D];上海交通大學(xué);2017年

4 鄭黎黎;伴不同骨代謝狀態(tài)2型糖尿病患者血清vaspin水平與骨代謝的相關(guān)性[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2018年

5 潘潤(rùn)洲;利拉魯肽對(duì)骨代謝的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2018年

6 付潔瓊;慢性腎臟病—礦物質(zhì)和骨代謝異常病例報(bào)告并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[D];河北醫(yī)科大學(xué);2018年

7 劉煬;顳頜關(guān)節(jié)盤移位對(duì)髁突骨代謝影響的SPECT/CT研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2018年

8 衡佳妮;老年2型糖尿病影響骨代謝的危險(xiǎn)因素及相關(guān)性分析[D];蘭州大學(xué);2018年

9 霍立雙;噻唑烷二酮類藥物對(duì)骨代謝影響的研究進(jìn)展[D];河北醫(yī)科大學(xué);2017年

10 洪建勛;絕經(jīng)后骨代謝異常的中醫(yī)病理研究[D];福建中醫(yī)藥大學(xué);2017年

，

本文編號(hào)：2647616