【摘要】：目的經(jīng)鼻腔黏膜免疫途徑給予小鼠二價(jià)人乳頭瘤病毒(human papilloma virus,HPV)疫苗,通過與皮下疫苗組比較,來評估鼻黏膜免疫途徑的免疫效果。方法選用45只6-8周齡雌性BALB/c小鼠(18-20g),隨機(jī)分成3組,分別為鼻腔生理鹽水對照組(A)、鼻腔疫苗實(shí)驗(yàn)組(B)、皮下疫苗實(shí)驗(yàn)組(C)。分別于0周,2周,4周對以上三組小鼠進(jìn)行免疫,第六周處死小鼠并通過眼球取血的方式收集血清樣本,ELISA法檢測血清中特異性抗體Ig G含量;然后,無菌取脾制備脾細(xì)胞懸液,分離脾淋巴細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),MTT法檢測小鼠脾淋巴細(xì)胞的特異性增殖情況。最后,通過ELISA法分別檢測HPV16 L1蛋白、HPV18 L1蛋白、HPV16/18 L1蛋白刺激后小鼠脾淋巴細(xì)胞培養(yǎng)上清中細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4的釋放。另外,收集肺灌洗液,鼻灌洗液以及陰道灌洗液,用ELISA法檢測灌洗液中特異性s Ig A抗體的含量。結(jié)果ELISA法結(jié)果顯示,用二價(jià)HPV疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠,三次免疫后,可有效誘導(dǎo)和增強(qiáng)黏膜免疫應(yīng)答,小鼠鼻灌洗液中針對HPV16 L1蛋白、HPV18 L1蛋白的特異性s Ig A抗體明顯增加,鼻腔疫苗組與對照組、皮下疫苗組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);小鼠肺灌洗液中針對HPV16 L1蛋白的特異性s Ig A抗體明顯增加,鼻腔疫苗組與對照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),鼻腔疫苗組與皮下疫苗組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。小鼠肺灌洗液中針對HPV18 L1蛋白的特異性s Ig A抗體明顯增加,鼻腔疫苗組與對照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),鼻腔疫苗組與皮下疫苗組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001);小鼠陰道灌洗液中針對HPV16 L1蛋白的特異性s Ig A抗體明顯增加,鼻腔疫苗組與對照組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),小鼠陰道灌洗液中針對HPV18 L1蛋白的特異性s Ig A抗體明顯增加,鼻腔疫苗組與對照組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。與鼻腔生理鹽水組相比,鼻腔疫苗組小鼠血清中針對HPV16 L1蛋白的特異性Ig G抗體明顯增加,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),鼻腔疫苗組小鼠血清中針對HPV18 L1蛋白的特異性Ig G抗體明顯增加,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01)。MTT法顯示,經(jīng)HPV16 L1蛋白、HPV18 L1蛋白、HPV16/18 L1蛋白刺激后鼻腔疫苗組、皮下疫苗組的刺激指數(shù)明顯增加,脾淋巴細(xì)胞增殖水平大大提高。經(jīng)HPV16 L1蛋白、HPV18 L1蛋白、HPV16/18 L1蛋白共刺激后,鼻腔疫苗組、皮下疫苗組的脾細(xì)胞培養(yǎng)上清中IFN-γ釋放均顯著增加。結(jié)論二價(jià)HPV疫苗對小鼠進(jìn)行鼻腔黏膜免疫后可以在血清中產(chǎn)生特異性Ig G抗體,有效誘導(dǎo)體液免疫應(yīng)答。此外,還可以誘導(dǎo)鼻,肺,陰道等處的局部黏膜免疫應(yīng)答,并產(chǎn)生特異性黏膜抗體s Ig A。因此鼻黏膜免疫途徑可以在不久的將來可作為黏膜疫苗的接種方式之一。
【圖文】：

肺灌洗液收集

鼻灌洗液收集
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R392-33

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2 朱U，

本文編號：2646276