【摘要】：目的經(jīng)鼻腔黏膜免疫途徑給予小鼠二價(jià)人乳頭瘤病毒(human papilloma virus,HPV)疫苗,通過(guò)與皮下疫苗組比較,來(lái)評(píng)估鼻黏膜免疫途徑的免疫效果。方法選用45只6-8周齡雌性BALB/c小鼠(18-20g),隨機(jī)分成3組,分別為鼻腔生理鹽水對(duì)照組(A)、鼻腔疫苗實(shí)驗(yàn)組(B)、皮下疫苗實(shí)驗(yàn)組(C)。分別于0周,2周,4周對(duì)以上三組小鼠進(jìn)行免疫,第六周處死小鼠并通過(guò)眼球取血的方式收集血清樣本,ELISA法檢測(cè)血清中特異性抗體Ig G含量;然后,無(wú)菌取脾制備脾細(xì)胞懸液,分離脾淋巴細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),MTT法檢測(cè)小鼠脾淋巴細(xì)胞的特異性增殖情況。最后,通過(guò)ELISA法分別檢測(cè)HPV16 L1蛋白、HPV18 L1蛋白、HPV16/18 L1蛋白刺激后小鼠脾淋巴細(xì)胞培養(yǎng)上清中細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4的釋放。另外,收集肺灌洗液,鼻灌洗液以及陰道灌洗液,用ELISA法檢測(cè)灌洗液中特異性s Ig A抗體的含量。結(jié)果ELISA法結(jié)果顯示,用二價(jià)HPV疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠,三次免疫后,可有效誘導(dǎo)和增強(qiáng)黏膜免疫應(yīng)答,小鼠鼻灌洗液中針對(duì)HPV16 L1蛋白、HPV18 L1蛋白的特異性s Ig A抗體明顯增加,鼻腔疫苗組與對(duì)照組、皮下疫苗組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);小鼠肺灌洗液中針對(duì)HPV16 L1蛋白的特異性s Ig A抗體明顯增加,鼻腔疫苗組與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),鼻腔疫苗組與皮下疫苗組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。小鼠肺灌洗液中針對(duì)HPV18 L1蛋白的特異性s Ig A抗體明顯增加,鼻腔疫苗組與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),鼻腔疫苗組與皮下疫苗組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001);小鼠陰道灌洗液中針對(duì)HPV16 L1蛋白的特異性s Ig A抗體明顯增加,鼻腔疫苗組與對(duì)照組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),小鼠陰道灌洗液中針對(duì)HPV18 L1蛋白的特異性s Ig A抗體明顯增加,鼻腔疫苗組與對(duì)照組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。與鼻腔生理鹽水組相比,鼻腔疫苗組小鼠血清中針對(duì)HPV16 L1蛋白的特異性Ig G抗體明顯增加,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),鼻腔疫苗組小鼠血清中針對(duì)HPV18 L1蛋白的特異性Ig G抗體明顯增加,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01)。MTT法顯示,經(jīng)HPV16 L1蛋白、HPV18 L1蛋白、HPV16/18 L1蛋白刺激后鼻腔疫苗組、皮下疫苗組的刺激指數(shù)明顯增加,脾淋巴細(xì)胞增殖水平大大提高。經(jīng)HPV16 L1蛋白、HPV18 L1蛋白、HPV16/18 L1蛋白共刺激后,鼻腔疫苗組、皮下疫苗組的脾細(xì)胞培養(yǎng)上清中IFN-γ釋放均顯著增加。結(jié)論二價(jià)HPV疫苗對(duì)小鼠進(jìn)行鼻腔黏膜免疫后可以在血清中產(chǎn)生特異性Ig G抗體,有效誘導(dǎo)體液免疫應(yīng)答。此外,還可以誘導(dǎo)鼻,肺,陰道等處的局部黏膜免疫應(yīng)答,并產(chǎn)生特異性黏膜抗體s Ig A。因此鼻黏膜免疫途徑可以在不久的將來(lái)可作為黏膜疫苗的接種方式之一。
【圖文】：

肺灌洗液收集

鼻灌洗液收集
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R392-33

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2 朱U，

本文編號(hào)：2646276