本文關鍵詞：SAMHD1蛋白結構域影響Vpx蛋白誘導降解的機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：人源SAMHD1(sterile alpha motif and HD domain-containing protein-1)是一種潛在的抗HIV-1病毒,HIV-2病毒和SIV病毒的抗病毒因子。HIV-2病毒和一些SIV病毒可以編碼病毒輔助蛋白Vpx,它可以介導以Vpx-DCAF1為基礎的E3泛素連接酶復合體降解SAMHD1蛋白。盡管已經(jīng)報道SAMHD1的N端和C端對于Vpx誘導SAMHD1蛋白的降解十分重要,但是SAMHD1蛋白的其他結構域是否對Vpx誘導其降解功能作出貢獻還尚不清楚。在我們的研究中,與人源的SAMHD1(SAMHD1HS)恰恰相反,雞源的SAMHD1(SAMHD1GG)不會被Vpx誘導降解。為了闡明SAMHD1結構域與被Vpx誘導降解之間的關系,我們將人源和雞源的SAMHD1蛋白按照結構域的劃分,構建了一系列人源、雞源的重組融合SAMHD1蛋白并進行功能性實驗。實驗結果與之前的報道一致,SAMHD1蛋白的C端對于Vpx誘導SAMHD1蛋白降解十分關鍵。然而,在接下來用SAMHD1單結構域替換融合蛋白降解實驗揭示了其HD結構域也對Vpx的降解功能做出貢獻。有趣的是,我們發(fā)現(xiàn)HD結構域雖然影響Vpx誘導的SAMHD1蛋白降解,但是它并不會阻礙Vpx與SAMHD1蛋白的相互結合,即含有雞源SAMHD1蛋白HD結構域的人源SAMHD1蛋白可以與Vpx相互結合卻不能被Vpx誘導降解。因此,我們的發(fā)現(xiàn)揭示了Vpx誘導SAMHD1蛋白降解除了必須相互結合以外,可能還需要其它因子的參與。
【關鍵詞】：SAMHD1 Vpx HIV 泛素化依賴蛋白體途徑降解
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R373
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-8
• 第1章 緒論8-13
• 1.1 獲得性免疫缺陷綜合癥8
• 1.2 免疫缺陷病病毒8-11
• 1.2.1 HIV病毒的生命周期9-10
• 1.2.2 HIV結構和輔助蛋白10-11
• 1.2.3 輔助蛋白Vpx的發(fā)現(xiàn)與功能11
• 1.3 SAMHD1功能及與Vpx的關系11-13
• 第2章 材料與方法13-24
• 2.1 材料、儀器和試劑13-19
• 2.1.1 菌株與細胞13
• 2.1.2 抗體13
• 2.1.3 主要儀器13-14
• 2.1.4 主要試劑14-15
• 2.1.5 引物合成和測序15-19
• 2.2 實驗方法19-24
• 2.2.1 蛋白表達載體的構建19-21
• 2.2.2 細胞復蘇及細胞培養(yǎng)21
• 2.2.3 Vpx降解SAMHD1實驗：21-22
• 2.2.4 免疫共沉淀22
• 2.2.5 熒光成像22-24
• 第3章 結果與討論24-31
• 3.1 Vpx具有降解人源SAMHD1蛋白能力但不具備降解雞源SAMHD1蛋白的能力24-25
• 3.2 SAMHD1GG C末端妨礙Vpx降解SAMHD125-26
• 3.3 SAMHD1的HD結構域是Vpx誘導SAMHD1降解過程中重要角色26-27
• 3.4 SAMHD1 HD結構域不影響SAMHD1-Vpx相互結合27-29
• 3.5 討論29-30
• 3.6 結論30-31
• 參考文獻31-41
• 作者簡介及在學期間所取得的科研成果41-42
• 致謝42-43

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